益母草碱在制备抗慢性肾脏病药物中的用途制造技术

本发明专利技术涉及药学领域，具体公开了一种益母草碱在制备抗慢性肾脏病药物中的用途。本发明专利技术为慢性肾脏病，特别是足细胞受损导致的慢性肾脏病提供了一种新的治疗药物或预防药物。

Application of Herba Leonuri in preparation of antichronic kidney disease drugs

The invention relates to the pharmaceutical field, in particular to the use of motherwort alkaloid in the preparation of anti-chronic kidney disease drugs. The invention provides a new therapeutic drug or preventive drug for chronic kidney disease, especially chronic kidney disease caused by podocyte damage.

【技术实现步骤摘要】
益母草碱在制备抗慢性肾脏病药物中的用途
本专利技术涉及药学
，具体涉及一种益母草碱在制备抗慢性肾脏病药物中的用途。
技术介绍
慢性肾脏病(chronickidneydisease，CKD)是全球面临的重要公共卫生问题之一，近年来CKD的患病率也在逐渐增高。2012年我国肾脏病学专家流行病学调查显示我国CKD患病率已达10.8％。目前，越来越多的研究结果证明肾小球足细胞在CKD蛋白尿的发生发展中起了重要作用。足细胞是肾小球滤过膜的重要细胞成分，维持着肾小球正常滤过，合成肾小球正常及病理状态下主要的细胞外基质，表达多种对维持系膜和内皮正常功能的细胞因子及其受体等功能。足细胞由结构和功能不同的三部分组成：细胞体、主突和足突。一般认为足细胞不可再生且修复能力有限，因此足细胞损伤是肾小球性疾病发生和进展的关键因素，寻找防治足细胞损伤的干预药物对于缓解蛋白尿，改善CKD预后及其重要。
技术实现思路
本专利技术的目的在于提供一种益母草碱在制备抗慢性肾脏病药物中的用途，用以为慢性肾脏病提供新的治疗药物或预防药物。为实现上述目的，本专利技术第一方面提供了益母草碱在制备抗慢性肾脏病药物中的用途。在一种可能的实现方式中，所述慢性肾脏病包括慢性肾脏病蛋白尿。在一种可能的实现方式中，所述慢性肾脏病蛋白尿为足细胞损伤导致的慢性肾脏病蛋白尿。在一种可能的实现方式中，所述慢性肾脏病包括足细胞损伤导致的慢性肾脏病。在一种可能的实现方式中，所述抗慢性肾脏病药物至少具有以下任一项或多项功效：减轻微量白蛋白排泄、减轻肾小球病理损伤、减轻足细胞足突融合、改善足细胞分子标志物的表达、减少足细胞凋亡、减少肾小球活性氧的产生、减轻足细胞骨架蛋白损伤。在一种可能的实现方式中，所述足细胞分子标志物包括以下一种或多种：Nephrin、Podocin。在一种可能的实现方式中，所述益母草碱为所述抗慢性肾脏病药物的有效成分之一或唯一有效成分。本专利技术第二方面提供了益母草碱在制备具有以下任一项或多项功效的药物中的用途：减轻微量白蛋白排泄、减轻肾小球病理损伤、减轻足细胞足突融合、改善足细胞分子标志物的表达、减少足细胞凋亡、减少肾小球活性氧的产生、减轻足细胞骨架蛋白损伤。本专利技术第三方面提供了一种抗慢性肾脏病的药物，所述药物包括有效量的益母草碱。在一种可能的实现方式中，所述有效率的益母草碱为所述药物的有效成分之一或唯一有效成分。本专利技术第四方面提供了一种慢性肾脏病的治疗方法，包括将益母草碱用于作用对象。本专利技术具有如下优点：为慢性肾脏病，特别是足细胞受损导致的慢性肾脏病提供了一种新的治疗药物或预防药物。附图说明图1A为光镜下肾小球组织形态学改变图；图1B为PAS染色结果定量分析系膜区面积/肾小球面积图；图1C为24h尿白蛋白排泄图；图2A为电子显微镜观察足细胞形态的结构图；图2B为Westernblotting检测足细胞标志分子Nephrin表达的结果图；图2C为免疫组化染色检测足细胞标记分子Podocin表达的结果图；图2D为Tunel染色检测肾小球足细胞凋亡、DAPI染色检测肾小球足细胞凋亡的结果，以及Tunel染色和DAPI染色Merge的结果图；图3A为肾小球DAPI染色结果、肾小球DHE染色结果，以及DHE染色和DAPI染色Merge的结果图；图3B为DHE染色的定量分析结果图。图4A为Westernblotting检测足细胞标志分子Nephrin表达的结果图；图4B1为流式细胞术检测对照组足细胞凋亡的结果图；图4B2为流式细胞术检测益母草碱组足细胞凋亡的结果图；图4B3为流式细胞术检测阿霉素组足细胞凋亡的结果图；图4B4为流式细胞术检测阿霉素+益母草碱组足细胞凋亡的结果图；图4C为凋亡定量分析结果图；图5A为DCFDA染色检测细胞内活性氧生成的结果图；图5B为DCFDA荧光定量分析的结果(对照组，即Control组，为1)图。图5C为F-actin染色检测细胞骨架图；图5D为定量分析骨架紊乱细胞的比例图。具体实施方式以下实施例用于说明本专利技术，但不用来限制本专利技术的范围。除非另外说明，本专利技术中所公开的实验方法、检测方法、制备方法均采用本
常规的分子生物学、生物化学、染色质结构和分析、分析化学、细胞培养、重组DNA技术及相关领域的常规技术。这些技术在现有文献中已有完善说明，具体可参见Sambrook等MOLECULARCLONING：ALABORATORYMANUAL，Secondedition，ColdSpringHarborLaboratoryPress，1989andThirdedition，2001；Ausubel等，CURRENTPROTOCOLSINMOLECULARBIOLOGY，JohnWiley&Sons，NewYork，1987andperiodicupdates；theseriesMETHODSINENZYMOLOGY，AcademicPress，SanDiego；Wolffe，CHROMATINSTRUCTUREANDFUNCTION，Thirdedition，AcademicPress，SanDiego，1998；METHODSINENZYMOLOGY，Vol.304，Chromatin(P.M.WassarmanandA.P.Wolffe，eds.)，AcademicPress，SanDiego，1999；和METHODSINMOLECULARBIOLOGY，Vol.119，ChromatinProtocols(P.B.Becker，ed.)HumanaPress，Totowa，1999等。益母草碱(Leonurine，Leo)是益母草的有效成份，具有广泛的生物学活性。近年来研究揭示了其治疗前列腺增生的良药，还具有改善抗血小板聚集、改善血循环、抗炎镇痛、兴奋子宫、保钾利尿和保护心肌等功效。针对益母草碱在慢性肾脏病，特别是在慢性肾脏病蛋白尿中的研究和开发尚未见相关报道。接下来在本专利技术实施例中探讨益母草碱对阿霉素(Adriamycin,ADR)所致的足细胞损伤的作用及机制。实施例1实验材料：益母草碱购自美国Sigma公司(货号：SML0670)，阿霉素(ADR)购自美国Sigma公司；抗鼠/兔通用型免疫组化检测试剂盒购自武汉三鹰生物技术有限公司；PBS粉末购自博奥德公司；焦碳酸二乙酯(DEPC)、BCA蛋白定量试剂盒购自中国凯基生物公司；PCR试剂盒、逆转录试剂盒购自日本Takara公司；Trizol购自美国Thermo公司；ACR-Bis、Tris-HCL(PH8.8)、Tris-HCL(PH6.8)、SDS、TEMED均购自杭州碧云天生物研究所；ECL显色试剂盒购自PIERCE公司；Nephrin、Podocin单克隆抗体、小鼠尿蛋白检测ELISA试剂盒购自美国Abcam公司；GAPDH单克隆抗体购自武汉三鹰生物技术有限公司；westernblot二抗均购自北京中杉金桥生物技术有限公司。DHE染色购自美国sigma公司。TUNEL凋亡检测试剂盒购自Roche公司；RPMI1640培养基、胎牛血清(FBS)、青/链霉素、细胞培养瓶、细胞培养皿购自美国Gibico公司；胰岛素-转铁蛋白-亚硒酸钠(insulintransfer本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.益母草碱在制备抗慢性肾脏病药物中的用途。

【技术特征摘要】
1.益母草碱在制备抗慢性肾脏病药物中的用途。2.根据权利要求1所述的用途，其特征在于，所述慢性肾脏病包括慢性肾脏病蛋白尿。3.根据权利要求2所述用途，其特征在于，所述慢性肾脏病蛋白尿为足细胞损伤导致的慢性肾脏病蛋白尿。4.根据权利要求1所述的用途，其特征在于，所述慢性肾脏病包括足细胞损伤导致的慢性肾脏病。5.根据权利要求1所述的用途，其特征在于，所述抗慢性肾脏病药物至少具有以下任一项或多项功效：减轻微量白蛋白排泄、减轻肾小球病理损伤、减轻足细胞足突融合、改善足细胞分子标志物的表达、减少足细胞凋亡、减少肾小球活性氧的产生、减轻足细胞骨架蛋白损伤。6.根据权利要求5所述的用...

【专利技术属性】
技术研发人员：袁杨刚，邢昌赢，祁佳，
申请(专利权)人：袁杨刚，邢昌赢，祁佳，
类型：发明
国别省市：江苏,32