降脂药在高同型半胱氨酸血症治疗方面的应用制造技术

本发明专利技术公开了降脂药在高同型半胱氨酸血症治疗方面的应用。研究发现，HHcy会显著促进B淋巴细胞自噬、浆细胞化相关基因和蛋白的表达水平，自噬、浆细胞化抑制因子则下调，表明HHcy会刺激促进B淋巴细胞自噬、浆细胞化。降脂药预处理B淋巴细胞可逆转HHcy引起的自噬、浆细胞化相关基因和蛋白上调及相关抑制因子下调。研究还发现，HHcy会显著促进B淋巴细胞分泌anti‑β2GPI，降脂药预处理B淋巴细胞可逆转HHcy对B淋巴细胞分泌anti‑β2GPI的促进作用。anti‑β2GPI作为一种抗磷脂抗体，其升高会导致血液中抗磷脂抗体水平升高，具有诱发抗磷脂综合征的风险，使用降脂药干预可预防该风险。降脂药还可通过抑制高同型半胱氨酸血症致B淋巴细胞分泌anti‑β2GPI降低anti‑β2GPI对巨噬细胞的炎性活化。

Application of lipid-lowering drugs in the treatment of Hyperhomocysteinemia

The invention discloses the application of lipid-lowering drugs in the treatment of hyperhomocysteinemia. It was found that HHcy could significantly promote the expression of autophagy, plasma cytochemical related genes and proteins in B lymphocyte, while autophagy and plasma cytochemical inhibitors were down-regulated, suggesting that HHcy could stimulate B lymphocyte autophagy and plasma cytochemistry. Pretreatment of B lymphocytes with lipid-lowering drugs reversed HHcy-induced up-regulation of autophagy, plasma cytochemistry-related genes and proteins and down-regulation of related inhibitors. It was also found that HHcy could significantly promote the secretion of anti_beta 2 GPI by B lymphocytes. Pretreatment with lipid-lowering drugs could reverse the effect of HHcy on the secretion of anti_beta 2 GPI by B lymphocytes. Anti_beta 2 GPI, as an anti-phospholipid antibody, can lead to elevated levels of anti-phospholipid antibodies in the blood, which can induce the risk of anti-phospholipid syndrome. Intervention with lipid-lowering drugs can prevent this risk. Lipid-lowering drugs can also reduce the inflammatory activation of macrophages by inhibiting the secretion of anti\\\\\\\\\\\\\\\\\\\\\\\\\\\\\\\\\\\\\\\\\\\\\\

【技术实现步骤摘要】
降脂药在高同型半胱氨酸血症治疗方面的应用
本专利技术属于医药领域，涉及降脂药在高同型半胱氨酸血症治疗方面的应用。
技术介绍
同型半胱氨酸(homocysteine，Hcy)是体内蛋氨酸代谢的中间产物，是一个含有巯基的非必需氨基酸。蛋氨酸代谢发生异常，会导致血中Hcy这一中间代谢产物的积累。如果血中Hcy水平上升高于10μM时，即定义为高同型半胱氨酸血症(hyperhomocysteinemia，HHcy)。已有研究证明，HHcy与包括心血管疾病在内的多种疾病有关。
技术实现思路
本专利技术的目的在于提供降脂药在高同型半胱氨酸血症治疗方面的应用。本专利技术的上述目的是通过下面的技术方案得以实现的：降脂药在制备抑制高同型半胱氨酸血症致B淋巴细胞自噬的药物中的应用。体内外研究发现，HHcy会显著促进B淋巴细胞自噬相关基因和蛋白的表达水平，自噬抑制因子则显著被下调，这表明HHcy在体和离体会刺激促进B淋巴细胞发生自噬。降脂药非诺贝特预处理B淋巴细胞可以逆转HHcy引起的自噬相关基因和蛋白上调以及自噬抑制因子下调。降脂药在制备抑制高同型半胱氨酸血症致B淋巴细胞浆细胞化的药物中的应用。本领域技术人员知道，当B淋巴细胞激活后会经过免疫球蛋白类型转化重组，最终分化成浆细胞。BLIMP1和IRF4具有促浆细胞化的作用，抑制B淋巴细胞浆细胞的分子包括BCL6和PAX5等；通过测定B淋巴细胞中BLIMP1、IRF4、BCL6和PAX5的表达水平可以反映B淋巴细胞的浆细胞化程度。体内外研究发现，HHcy会显著促进B淋巴细胞浆细胞化相关基因和蛋白的表达水平，浆细胞化抑制因子则显著被下调，这表明HHcy在体和离体会刺激促进B淋巴细胞浆细胞化。降脂药非诺贝特预处理B淋巴细胞可以逆转HHcy引起的浆细胞化相关基因和蛋白上调以及浆细胞化抑制因子下调。降脂药在制备抑制高同型半胱氨酸血症致B淋巴细胞分泌anti-β2GPI的药物中的应用。体内外研究发现，HHcy会显著促进B淋巴细胞分泌anti-β2GPI，降脂药非诺贝特预处理B淋巴细胞可以逆转HHcy对B淋巴细胞分泌anti-β2GPI的促进作用。降脂药在制备抑制高同型半胱氨酸血症致B淋巴细胞分泌anti-β2GPI进而升高血液中抗磷脂抗体水平的药物中的应用。anti-β2GPI是一种典型的抗磷脂抗体(APL)，anti-β2GPI升高会导致血液中抗磷脂抗体水平也显著升高。本领域技术人员知道，APL过高会引起一种自身免疫性疾病抗磷脂综合征(APS)。也就是说，对于HHcy患者，B淋巴细胞的anti-β2GPI分泌水平提高导致血液中APL过高具有引发APS自身免疫性疾病的风险，使用降脂药非诺贝特干预可以预防该风险。降脂药在制备抑制高同型半胱氨酸血症致B淋巴细胞分泌anti-β2GPI进而促进巨噬细胞炎性活化的药物中的应用。研究结果发现，anti-β2GPIIgG会直接促进巨噬细胞M1极化并抑制抑炎性M2极化，促进巨噬细胞分泌炎症因子，引发或加重机体内的炎症。而根据上述结果，降脂药非诺贝特可以抑制B淋巴细胞分泌anti-β2GPI，所以本领域技术人员可以知道降脂药可以通过抑制高同型半胱氨酸血症致B淋巴细胞分泌anti-β2GPI降低anti-β2GPI对巨噬细胞的炎性活化作用。在具体实施例中，所述降脂药为非诺贝特。附图说明图1：HHcy刺激机体产生APLIgG和anti-β2GPIIgG。同型半胱氨酸饮水喂养(1.8g/l)造成C57BL/6J小鼠HHcy模型中。ELISA检测小鼠血浆APL(A)、anti-β2GPI(B)和ACL(C)IgG水平。n＝3-5。*与对照组相比；P<0.05为具有显著性差异。图2：Hcy刺激B淋巴细胞产生APLIgG和anti-β2GPIIgG。Hcy刺激C57BL/6J小鼠脾脏B淋巴细胞72小时。ELISA检测Hcy刺激后B淋巴细胞培养基上清APL(A)、anti-β2GPI(B)和ACL(C)IgG水平。n＝6。*与对照组相比；P<0.05为具有显著性差异。图3：HHcy促进小鼠B淋巴细胞发生浆细胞化。C57BL/6J小鼠给予普通饮水或Hcy(1.8g/l)的饮水饲养两周后，分离脾脏B淋巴细胞进行检测。(A)用Westernblot检测B淋巴细胞内BLIMP1和IRF4蛋白的表达水平；eIF5作为内参。n＝3。(B)定量PCR检测B淋巴细胞Pax5、Irf4和Blimp1基因的表达水平。n＝3-5。*与对照组相比；P<0.05差异显著。图4：Hcy促进小鼠脾脏B淋巴细胞发生浆细胞化。C57BL/6J小鼠分离脾脏B淋巴细胞，使用Hcy刺激48小时。(A)Westernblot检测B淋巴细胞BLIMP1和IRF4蛋白的表达水平，eIF5作为内参。n＝3。(B)定量PCR检测B淋巴细胞Pax5、Irf4和Blimp1基因的表达水平。n＝3-5。*与对照组相比；P<0.05为具有显著性差异。图5：HHcy促进小鼠脾脏B淋巴细胞自噬作用。C57BL/6J小鼠给予普通饮水或Hcy(1.8g/l)的饮水饲养两周，分离脾脏B淋巴细胞进行检测。(A)用Westernblot检测B淋巴细胞内BLIMP1、IRF4、p62和LC3II蛋白表达水平，eIF5作为内参。n＝3。(B)定量PCR检测B淋巴细胞内Blimp1、Irf4、Lc3ii、Atg5、Atg7、Atg9和Atg12基因的表达水平。n＝3-5。*与对照组相比；P<0.05为具有显著性差异。图6：Hcy促进小鼠脾脏B淋巴细胞自噬。分离C57BL/6J小鼠脾脏B淋巴细胞，使用Hcy刺激48小时。(A)Westernblot检测B淋巴细胞BLIMP1、IRF4、p62和LC3II蛋白的表达水平，eIF5作为内参。n＝3。(B)定量PCR检测B淋巴细胞Blimp1、Irf4、Lc3ii、Atg5、Atg7、Atg9和Atg12基因的表达水平。n＝3-5。*与对照组相比；P<0.05为具有显著性差异。图7：降脂药非诺贝特抑制B淋巴细胞的浆细胞化、自噬和anti-β2GPIIgG的分泌。分离C57BL/6J小鼠脾脏B淋巴细胞，非诺贝特(10μM)预处理B淋巴细胞30分钟后，给予Hcy(100μM)刺激48小时或72小时。(A)Hcy(100μM)刺激48小时后，Westernblot检测B淋巴细胞BLIMP1、IRF4、p62和LC3II蛋白的表达水平，eIF5作为内参。n＝3。(B)Hcy(100μM)刺激B淋巴细胞72小时后，ELISA检测细胞培养基上清中anti-β2GPIIgG水平。n＝6。*与对照组相比；#与Hcy组相比；P<0.05具有显著性差异。图8：anti-β2GPI活化巨噬细胞。anti-β2GPI(1ng/μl)刺激巨噬细胞24小时。(A)免疫荧光染色检测巨噬细胞上β2-GPI(红色)和Hochest33324(蓝色)的分布情况。n＝6。(B)定量PCR检测巨噬细胞细胞M1类别转化相关的基因。(C)用定量PCR检测巨噬细胞细胞M2类别转化相关的基因。n＝6。*与对照组相比；P<0.05为具有显著性本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.降脂药在制备抑制高同型半胱氨酸血症致B淋巴细胞自噬的药物中的应用。

【技术特征摘要】
1.降脂药在制备抑制高同型半胱氨酸血症致B淋巴细胞自噬的药物中的应用。2.降脂药在制备抑制高同型半胱氨酸血症致B淋巴细胞浆细胞化的药物中的应用。3.降脂药在制备抑制高同型半胱氨酸血症致B淋巴细胞分泌anti-β2GPI的药物中的应用。4.降脂药在制备抑制高同型半胱氨酸...

【专利技术属性】
技术研发人员：王宪，冯娟，姜长涛，张岩，邵钫钰，
申请(专利权)人：北京大学，
类型：发明
国别省市：北京,11