【技术实现步骤摘要】
本专利技术属于医药检测
,涉及一种检测血浆中益母草碱含量的方法,具体涉及一种液质联用(高效液相色谱串联质谱技术)定量检测血浆中益母草碱含量的方法。
技术介绍
中药益母草为唇形科植物益母草(Leonurus helerophyllus sweet)的干燥全草,功效活血、祛痕,调经、消水、清热解毒,常用于治疗月经不调、闭经、产后腹痛、跌打伤痛、水肿等。最近研究表明益母草具有多种生物活性,如研究报道益母草碱的提取物具有改善心肌缺血、增加冠脉血流量,提高心功能,抑制血小板聚集,抗凝、抗血栓形成以及改善大脑缺血等药理作用。式(I )的益母草碱(leonurine,4_胍基-n_ 丁酰基丁香酸酯),是益母草生物碱提取物中主要有效成分,文献报道益母草碱具有子宫收缩,抗血小板聚集以及抑制血管平滑肌收缩作用。有研究表明,在现有基础上改良化学合成了益母草碱单体,经实验证实所述的化合物在离体和整体动物实验中对缺血心肌都有良好的保护作用,并推论这可能与其抗氧化抗凋亡的作用相关,因此益母草碱将是一个非常有前景的心血管活性药物。目前,益母草碱还处于临床前期研究阶段,要研究其药物代谢动力学,必须建立测定生物样本中益母草碱的含量的方法。而现有文献所报道的主要是应用反向高效液相色谱法(HPLC)或者超高压液相色谱(UPLC)测定益母草的原材料或者中成药制剂中益母草碱的含量;有报道应用HPLC法测定大鼠血浆中益母草碱血药浓度,计算益母草碱静脉注射后其药代动力学参数,但该方法的灵敏度很低,检测限约为0. 25ug/mL ;有研究在预试验中发现,如果改用口服给药后,应用上述方法无法检测到 ...
【技术保护点】
【技术特征摘要】
1.ー种定量检测血浆中益母草碱含量的方法,其特征在于,采用高效液相色谱串联质谱技术,用苯甲酰精氨酸こ酯作为检测物的内标,用高氯酸沉淀蛋白方法预处理血浆样品,按内标法以峰面积,计算血浆中益母草碱血药浓度; 所述的益母草碱分子式为C14H21N3O5,分子量为311,结构式为2.按权利要求I所述的方法,其特征在于,所述的液相色谱液相色谱采用安捷伦Zorbax SB-C18柱为固定相,こ腈/こ酸铵缓冲液混合液为流动相,等度洗脱,质谱采用电喷雾电离源,用多离子反应监测对益母草碱定量。3.按权利要求I或2所述的方法,其特征在于,包括以下步骤 步骤ー样品预处理 采用沉淀血浆蛋白作为血浆预处理方法,用10%高氯酸作为沉淀剂; 步骤ニ液相分离 (1)流动相由体积比为25%的こ腈与75%的こ酸铵缓冲液组成; (2)色谱柱采用安捷伦ZorbaxSB-C18柱,色谱柱内径2. Imm,填料粒径5 μ m,色谱柱长度150mm ; (3)洗脱方法采用等度洗脱,流速O.2m...
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