一种用于农用废弃物发酵的复合菌剂及其制备方法技术

本发明专利技术提供了一种用于农用废弃物发酵的复合菌剂及其制备方法。所述复合菌剂针对现有技术中菌剂效能较低的缺陷，将地衣芽孢杆菌、乳酸菌、产朊假丝酵母、绿色木霉、米曲霉和白腐菌进行复配，得到的复合菌剂具有微生物间相对稳定可靠、发酵效能高的优点。所述制备方法，将不同种类的微生物采用不同的培养基和发酵方法进行培养，然后再进行混合，得到的复合菌剂中菌种的活性较高，同时，由于含有乳酸菌，最终成品呈酸性，能够抵抗杂菌污染，具有储藏时间长的优点。

【技术实现步骤摘要】
一种用于农用废弃物发酵的复合菌剂及其制备方法
本专利技术属于发酵菌种
，具体涉及一种用于农用废弃物发酵的复合菌剂及其制备方法。
技术介绍
众所周知，我国广大的农村，大量农业用肥都是工业化生产的无机化肥，虽然对农业增产效果显著，但由于长期单施或偏施化肥，抑制了土壤中微生物群体及其生物酶群体的生繁与积极作用，导致土壤中有机质严重减少，土壤严重板结，综合肥力下降，生态环境破坏，农作物营养失调，自身抗体减弱，产品品质低劣，食物积聚毒素，危及人畜健康。随着工农业生产迅速发展和人口增加，我国有机废弃物以年均5％-10％的速度递增。传统处理方法已不适应现代社会的要求。据统计，我国农业废弃物的年产生量已达到近60亿吨，但利用率仅为33％。目前，约30％的农作物秸秆被焚烧，约10％的秸秆长期堆放于沟渠、路边，严重污染大气与水环境。养殖场的畜禽粪便进入水体达25-30％，直接对地下水造成污染，造成环境污染与自然生态恶化。微生物技术在农业废弃物资源化利用过程中具有关键性的作用，接种微生物菌剂可以促进农业废弃物的发酵进程，实现农业废弃物的肥料化利用，制成微生物肥料、栽培育苗基质以及饲料等系列产品，可促进有机绿色农业的发展，控制并减少农村环境污染，改善农村生态环境，增加农民收入，对实现生态经济良性循环和农业的可持续发展有重要意义。
技术实现思路
为了解决现有技术存在的问题，本专利技术提供了一种用于农用废弃物发酵的复合菌剂及其制备方法。所述复合菌剂针对现有技术中菌剂效能较低的缺陷，将地衣芽孢杆菌、乳酸菌、产朊假丝酵母、绿色木霉、米曲霉和白腐菌进行复配，得到的复合菌剂具有微生物间相对稳定可靠、发酵效能高的优点。所述制备方法，将不同种类的微生物采用不同的培养基和发酵方法进行培养，然后再进行混合，得到的复合菌剂中菌种的活性较高，同时，由于含有乳酸菌，最终成品呈酸性，能够抵抗杂菌污染，具有储藏时间长的优点。本专利技术的目的是提供一种用于农用废弃物发酵的复合菌剂。本专利技术的再一目的是提供一种所述复合菌剂的制备方法。本专利技术的技术方案为：一种用于农用废弃物发酵的复合菌剂，所述复合菌剂包括地衣芽孢杆菌、乳酸菌、产朊假丝酵母、绿色木霉、米曲霉和白腐菌，所述地衣芽孢杆菌、乳酸菌、产朊假丝酵母、绿色木霉、米曲霉和白腐菌的数量比为：7-9:1-3:3-5:2-4:1-3:1-3。所述复合菌剂采用如下制备方法制备而成：A、将各菌种分为细菌组、酵母菌组和真菌组，分别经过发酵培养后，分别得到细菌菌液、酵母菌菌液和真菌菌液；B、将步骤A得到的所述细菌菌液、酵母菌菌液和真菌菌液混合均匀后，得到所述复合菌剂。步骤A中，所述细菌菌液的制备方法为：将地衣芽孢杆菌和乳酸菌混合，在细菌种子培养基、36-38℃下培养16-20小时；然后在细菌摇床培养基、36-38℃、摇床转速为120-160r/min下培养12-16小时；最后在细菌发酵培养基、36-38℃、摇床转速为120-160r/min下发酵培养16-20小时，发酵培养完成后获得母液，即为细菌菌液；所述细菌种子培养基由以下重量百分数的组分制成：蔗糖5-10％，牛肉膏4-8％，磷酸氢二钠0.1-0.3％，琼脂1.5-2.5％，余量为水，pH值为7.0-7.5；所述细菌摇床培养基由以下重量百分数的组分制成：蔗糖10-15％，豆粕粉6-10％，牛肉膏0.5-1％，酵母膏2-5％，硫酸镁0.1-0.3％，磷酸氢二钠0.1-0.4％，余量为水，pH值为7.0-7.5；所述细菌发酵培养基由以下重量百分数的组分制成：蔗糖7-12％，豆粕粉0.5-1％，酵母膏4-6％，硫酸镁0.15-0.25％，磷酸氢二钠0.15-0.25％，磷酸二氢钾0.1-0.3％，余量为水，pH值为7.0-7.5。所述酵母菌菌液的制备方法为：将产朊假丝酵母在酵母菌种子培养基、28-32℃、摇床转速为140-160r/min下培养18-24小时；然后在酵母菌发酵培养基、29-33℃、摇床转速为140-160r/min下发酵培养36-48小时，发酵培养完成后获得母液，即为酵母菌菌液；所述酵母菌种子培养基为：蔗糖8-12％，酵母膏0.7-1％，硫酸镁0.05-0.15％，氯化钙0.004-0.008％，其余为水，pH为4.5-5.0；所述酵母菌发酵培养基为：蔗糖20-30％、牛肉膏0.4-0.6％、磷酸氢二钾0.1-0.2％、硫酸镁0.05-0.08％、氯化钙0.004-0.008％，其余为水，pH为4.5-5.0。所述真菌菌液的制备方法为：将绿色木霉、米曲霉和白腐菌混合，在PD培养基、28-32℃、摇床转速为140-160r/min下培养24-36小时；然后在真菌发酵培养基、29-33℃下静置培养64-72小时，培养完成后获得母液，即为真菌菌液；所述PD培养基为马铃薯葡萄糖培养基；所述真菌发酵培养基的含水量为55％，还包括硫酸铵0.5％和硫酸镁0.05％，真菌发酵培养基含有的其他固体成分为麸皮和玉米粉，麸皮和玉米粉的重量比为8-10:0.8-1.2。本专利技术中，所有的培养基，在使用前，均在121℃下高压灭菌20分钟，以确保菌种的培养不受其他杂菌的影响。优选的，为提高所述复合菌剂接种后的成活率和相互之间的稳定性，步骤B中，将步骤A得到的所述细菌菌液、酵母菌菌液和真菌菌液混合均匀后，接种到综合培养基上，在28-32℃、摇床转速为120-140r/min下发酵培养，检测有效活菌总数达到1亿cfu/mL时，发酵培养结束，得到所述复合菌剂；所述综合培养基由以下重量百分数的组分制成：蔗糖5-10％，蜂蜜1-2％，抗坏血酸0.2-0.5％，硫酸镁0.1-0.3％，磷酸氢二钠0.1-0.4％，磷酸二氢钾0.1-0.5％，余量为水，pH值为7.0-7.5。经过共同培养后，各种微生物之间互相影响筛选，得到发酵能力更强，相互之间更稳定的复合菌剂。本专利技术还提供了一种所述复合菌剂的制备方法，所述制备方法包括以下步骤：A、将地衣芽孢杆菌和乳酸菌混合作为细菌组，产朊假丝酵母作为酵母菌组，绿色木霉、米曲霉和白腐菌混合作为真菌组；将细菌组、酵母菌组和真菌组分别经过发酵培养后，分别得到细菌菌液、酵母菌菌液和真菌菌液；B、将步骤A得到的所述细菌菌液、酵母菌菌液和真菌菌液混合均匀后，得到所述复合菌剂；所述复合菌剂中地衣芽孢杆菌、乳酸菌、产朊假丝酵母、绿色木霉、米曲霉和白腐菌的数量比为：7-9:1-3:3-5:2-4:1-3:1-3。步骤A中，所述细菌菌液的制备方法为：将地衣芽孢杆菌和乳酸菌混合，在细菌种子培养基、36-38℃下培养16-20小时；然后在细菌摇床培养基、36-38℃、摇床转速为120-160r/min下培养12-16小时；最后在细菌发酵培养基、36-38℃、摇床转速为120-160r/min下发酵培养16-20小时，发酵培养完成后获得母液，即为细菌菌液；所述细菌种子培养基由以下重量百分数的组分制成：蔗糖5-10％，牛肉膏4-8％，磷酸氢二钠0.1-0.3％，琼脂1.5-2.5％，余量为水，pH值为7.0-7.5；所述细菌摇床培养基由以下重量百分数的组分制成：蔗糖10-15％，豆粕粉6-10％，牛肉膏0.5-1％，酵母膏2-5％，硫酸镁0.1-0.3％，磷酸氢二钠0.1-0.4％，余量为水，本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种用于农用废弃物发酵的复合菌剂，其特征在于，所述复合菌剂包括地衣芽孢杆菌、乳酸菌、产朊假丝酵母、绿色木霉、米曲霉和白腐菌，所述地衣芽孢杆菌、乳酸菌、产朊假丝酵母、绿色木霉、米曲霉和白腐菌的数量比为：7‑9:1‑3:3‑5:2‑4:1‑3:1‑3。

【技术特征摘要】
1.一种用于农用废弃物发酵的复合菌剂，其特征在于，所述复合菌剂包括地衣芽孢杆菌、乳酸菌、产朊假丝酵母、绿色木霉、米曲霉和白腐菌，所述地衣芽孢杆菌、乳酸菌、产朊假丝酵母、绿色木霉、米曲霉和白腐菌的数量比为：7-9:1-3:3-5:2-4:1-3:1-3。2.根据权利要求1所述的复合菌剂，其特征在于，所述复合菌剂采用如下制备方法制备而成：A、将各菌种分为细菌组、酵母菌组和真菌组，分别经过发酵培养后，分别得到细菌菌液、酵母菌菌液和真菌菌液；B、将步骤A得到的所述细菌菌液、酵母菌菌液和真菌菌液混合均匀后，得到所述复合菌剂。3.根据权利要求2所述的复合菌剂，其特征在于，步骤A中，所述细菌菌液的制备方法为：将地衣芽孢杆菌和乳酸菌混合，在细菌种子培养基、36-38℃下培养16-20小时；然后在细菌摇床培养基、36-38℃、摇床转速为120-160r/min下培养12-16小时；最后在细菌发酵培养基、36-38℃、摇床转速为120-160r/min下发酵培养16-20小时，发酵培养完成后获得母液，即为细菌菌液；所述细菌种子培养基由以下重量百分数的组分制成：蔗糖5-10％，牛肉膏4-8％，磷酸氢二钠0.1-0.3％，琼脂1.5-2.5％，余量为水，pH值为7.0-7.5；所述细菌摇床培养基由以下重量百分数的组分制成：蔗糖10-15％，豆粕粉6-10％，牛肉膏0.5-1％，酵母膏2-5％，硫酸镁0.1-0.3％，磷酸氢二钠0.1-0.4％，余量为水，pH值为7.0-7.5；所述细菌发酵培养基由以下重量百分数的组分制成：蔗糖7-12％，豆粕粉0.5-1％，酵母膏4-6％，硫酸镁0.15-0.25％，磷酸氢二钠0.15-0.25％，磷酸二氢钾0.1-0.3％，余量为水，pH值为7.0-7.5。4.根据权利要求2所述的复合菌剂，其特征在于，步骤A中，所述酵母菌菌液的制备方法为：将产朊假丝酵母在酵母菌种子培养基、28-32℃、摇床转速为140-160r/min下培养18-24小时；然后在酵母菌发酵培养基、29-33℃、摇床转速为140-160r/min下发酵培养36-48小时，发酵培养完成后获得母液，即为酵母菌菌液；所述酵母菌种子培养基为：蔗糖8-12％，酵母膏0.7-1％，硫酸镁0.05-0.15％，氯化钙0.004-0.008％，其余为水，pH为4.5-5.0；所述酵母菌发酵培养基为：蔗糖20-30％、牛肉膏0.4-0.6％、磷酸氢二钾0.1-0.2％、硫酸镁0.05-0.08％、氯化钙0.004-0.008％，其余为水，pH为4.5-5.0。5.根据权利要求2所述的复合菌剂，其特征在于，步骤A中，所述真菌菌液的制备方法为：将绿色木霉、米曲霉和白腐菌混合，在PD培养基、28-32℃、摇床转速为140-160r/min下培养24-36小时；然后在真菌发酵培养基、29-33℃下静置培养64-72小时，培养完成后获得母液，即为真菌菌液；所述PD培养基为马铃薯葡萄糖培养基；所述真菌发酵培养基的含水量为55％，还包括硫酸铵0.5％和硫酸镁0.05％，真菌发酵培养基含有的其他固体成分为麸皮和玉米粉，麸皮和玉米粉的重量比为8-10:0.8-1.2。6.根据权利要求2所述的复合菌剂，其特征在于，步骤B中，将步骤A得到的所述细菌菌液、酵母菌菌液和真菌菌液混合均匀后，接种到综合培养基上，在28-32℃、摇床转速为120-140r/min下发酵培养，检测有效活菌总数达到1亿cfu/mL时，发酵培养结束，得到所述复合菌剂；所述综合培养基由以下重量百分数的组分制成：蔗糖5-10％，蜂蜜1-2％，抗坏血酸0.2-0.5％，硫酸镁0.1-0.3％，磷酸氢二钠0.1-0.4％，磷酸二氢钾0....

【专利技术属性】
技术研发人员：刘海明，
申请(专利权)人：北京航天恒丰科技股份有限公司，
类型：发明
国别省市：北京,11