液相分子筛制造技术

本发明专利技术涉及一种常温常压下高效从粘液中提取细胞样本的新方法，属医疗领域，适用于医学或生物领域内，从痰液、宫颈样本等粘液样本中高效提取细胞样本。本发明专利技术应用特定蛋白，可以在水溶液中形成类似分子筛的三维结构，发明专利技术人将此技术命名为“液相分子筛”。“液相分子筛”不是裂解黏液蛋白的分子链，而是将黏蛋白分子链沿纵向分散，黏蛋白分子链自身还是完整的，属物理过程，进而将粘液中夹裹的细胞分离出来。本发明专利技术可以在常温常压下，快速高效地从大量粘液中提取细胞样本，整个过程无化学反应，也无温度和压力的变化，细胞样本得到了完整的保护。本发明专利技术填补了从粘液样本中提取细胞样本的技术空白。

【技术实现步骤摘要】
液相分子筛
本专利技术涉及一种常温常压下高效从粘液中提取细胞样本的新方法，属医疗领域，适用于医学或生物领域内，从痰液、宫颈样本等粘液样本中高效提取细胞样本。
技术介绍
痰液、宫颈脱落细胞等含有粘液或大量粘液的样本，是病理细胞学或细胞培养等领域经常遇到的样本类型。此类样本的共同特点，就是在粘液中夹裹着有效的细胞样本，而且，粘液本身无诊断或科研价值，其自身也是极大的干扰因素。因此，将粘液去除并将细胞样本高效提取出来，是此类样本进行诊断或科研行为的前提和基础。粘液，又称黏液，是由人体的黏膜层或黏膜下层的杯状细胞分泌的一种湿滑液体，一般呈胶状。粘液含有大量的黏蛋白，也含有无机盐和水。实际上，本专利技术所指的对粘液样本的处理，需要达到两个目标：一是去除粘液的干扰，二是提取夹裹在其中的细胞样本。处理粘液样本，目前国际流行的，也几乎是唯一的方法，是“黏蛋白裂解法”。即，利用DDT或氢氧化钠等试剂，在不断搅拌或加温的条件下，缓慢地对黏蛋白进行分解，将其长分子链裂解为短分子链。由于黏蛋白的分子链很长，分子间的分子力又很大，因此，裂解过程势必需要大量的化学能，这也就是为什么目前的“黏蛋白裂解法”耗能大、时间长而且效果也差的原因。更重要的是，这种“黏蛋白裂解法”由于使用了较高浓度的生化试剂，在裂解黏蛋白的过程中，也很大程度地破坏了细胞样本，达不到收集细胞样本的最终目的。以上事实不难看出，目前的技术，连分解粘液都不理想，就更谈不上提取细胞样本了。因此，国际上至今尚无有效的方法很好地同时做到既分解粘液同时又可收集细胞这方面的工作，尤其是处理痰液这样含有大量粘液而细胞又很少的样本，已经成为国际公认的难题。经多年技术攻关，专利技术人终于寻找到了有效解决上述问题的全新方法。突破的关键，是思路的转变。此类样本的处理，核心目标是有效提取细胞，粘液作为无价值成份，不是关注的重点。也就是说，只要想办法将细胞样本有效地提取出来即可，不必非要处理黏液蛋白分子。在新思路的指导下，专利技术人绕开裂解粘液的难题，将技术攻关的重点放在如何提取出细胞样本方面。专利技术人研究发现，在粘液中，细胞样本不是与黏蛋白结合于一体，而只是被黏蛋白包裹，细胞自身是独立于黏蛋白之外的，实际上呈分离状态。这就类似于，渔网只是将鱼包裹在里面，并不是与鱼结合成复合生物体。要想将鱼从渔网中解脱出来，不是非要将渔网的网线裂解成小段的碎线，而是只要将渔网散开即可取出鱼。经大量研究和实践，专利技术人应用创新的“液相分子筛”技术，很好地解决了高效处理粘液并有效提取细胞样本的难题。
技术实现思路
专利技术人经多种技术方案的筛选与大量对比实验，应用植物蛋白和纤维素为原料，提取合成了一种长分子链的蛋白，定名为“粘液亲和蛋白”。此类蛋白在干燥状态下为白色粉末状，无毒。溶于水中时，可与水分子结合形成亲水的极长分子链，而且可以稳定分散在整个液相中。此蛋白分子链具有三个特点。一是分子链特定结构的侧枝可与水溶液的特定无机盐结合，形成交错的网状结构，网孔直径约100-300微米。二是此网状结构与黏液蛋白较亲和，而与细胞膜的蛋白成分较疏离。三是前述两种特性只有在水溶液的液相中才具有，且网状结构的形成过程不可逆。综上特点，含有“粘液亲和蛋白”和特定无机盐的水溶液，形成了类似分子筛的三维结构，专利技术人将此技术命名为“液相分子筛”。″液相分子筛″处理粘液样本的过程为：粘液样本进入″液相分子筛″的液体中后，首先是蛋白分子链进一步结合水分子，黏液蛋白的分子链呈束状并沿直径方向膨胀，结构变得较为分散。经外力震荡，如用手振摇或用旋涡混匀器混匀，膨胀的束装粘液蛋白的分子链联通夹裹其中的细胞进一步分散在″液相分子筛″中。然后，由于″液相分子筛″具有″亲黏蛋白而疏细胞膜″的特性，利用分子力，将黏蛋白的分子链拉开。注意，不是将黏蛋白的分子链横向断裂开，而是将黏蛋白分子链沿纵向分散，黏蛋白分子链自身还是完整的。由于黏蛋白的分子链只是内部结合得很牢固，而分子链之间只是物理缠绕，因此将绕成束状的黏蛋白分子链拉呈细丝状几乎不消耗外界能量，仅仅依靠″液相分子筛″自身的分子力即可快速实现。与此同时，细胞从夹裹的状态被释放出来，悬浮在″液相分子筛″和离散的黏蛋白分子链的缝隙中。最后，将样本进行低速离心，在离心力的作用下，细胞样本完好地沉积在离心管管底，而″液相分子筛″和离散的黏蛋白分子链依然停留在液相中。至此，完成了细胞样本的高效提取。实际使用结果表明，本专利技术的″液相分子筛″技术，可以在常温常压下，快速高效地从大量粘液中提取细胞样本，整个过程无化学反应，也无温度和压力的变化，细胞样本得到了完整的保护。具体实施方式本专利技术在实施过程中，有下关键点：1)本技术对低温和高温均很敏感。适合的应用温度范围为-20℃至60℃。不过，在通常的使用环境下，如临床单位的常规操作间等，是没有问题的。储运过程中应避免结冰。2)离心力不可过大，否则细胞样本的分离效果会受到影响。市售的低速医用离心机是理想选择，其转速一般在4000转/分以下。不可使用高速离心机或冷冻离心机。其他类型的离心设备，其离心力的设定应参考低速医用离心机。3)配制好的″液相分子筛″液体，可以与多种无机盐或醇类等试剂混溶。4)配制好的″液相分子筛″液体，日光或消毒用的紫外光源不会影响其性能，但应避免长时间直射。5)在适宜的温度和储存条件下，配制好的″液相分子筛″液体，密封后，有效期至少为26个月。更长时间是否有效，截止申请日，专利技术人尚未进一步研究。使用效果本专利技术填补了从粘液样本中提取细胞样本的技术空白。实际使用表明，清痰样本进入″液相分子筛″液体后，只需5分钟左右，即可将其中90％以上的细胞离心提取出来。即使是浓痰样本，进入″液相分子筛″液体后，最多25-30分钟，即可将其中90％以上的细胞离心提取出来。附图说明图1是″液相分子筛″亲和离散的黏蛋白分子链的分子结构模型图。分层分布并具有规则网格结构的是″液相分子筛″结构示意，穿插其中的不规则分子团是黏蛋白分子链结构示意图。图2是应用本技术处理后的浓痰样本，将离心提取后的细胞团进行了细胞学涂片，在20倍光学生物显微镜的效果图。镜下结果表明，经本技术处理提取的细胞，形态完整，结构清晰，得到了最大限度的保护。而且，涂片背景干净，无粘液残留，很彻底地消除了粘液的干扰。本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种“液相分子筛”，其特征在于，可以在水溶液中形成类似分子筛的三维结构。

【技术特征摘要】
1.一种“液相分子筛”，其特征在于，可以在水溶液中形成类似分子筛的三维结构。2.一种“液相分子筛”，其特征在于，不是裂解黏液蛋白的分子链，而是将黏蛋白分子链沿纵向分散，黏蛋白分子链自身还是完整...

【专利技术属性】
技术研发人员：马雪松，顾苏兰，
申请(专利权)人：上海蓝盎电子科技发展有限公司，
类型：发明
国别省市：上海,31