一种人参皂苷CK-壳聚糖胶束纳米粒的制备方法技术

本发明专利技术提供了一种人参皂苷CK‑壳聚糖胶束纳米粒的制备方法。本发明专利技术制备方法包括如下步骤：(a)脱氧胆酸与O‑羧甲基壳聚糖反应，得到脱氧胆酸‑O‑羧甲基壳聚糖聚合物载体；(b)将脱氧胆酸‑O‑羧甲基壳聚糖聚合物载体在溶液中分散，搅拌；超声处理后，过滤、干燥，得到壳聚糖自组装胶束纳米粒；(c)将人参皂苷CK溶液加入壳聚糖自组装胶束纳米粒的分散液中，并搅拌；超声处理后，透析、过滤，然后干燥，得到人参皂苷CK壳聚糖胶束纳米粒。本发明专利技术中，通过采用壳聚糖胶束纳米粒进行人参皂苷CK负载的方法，可以提高抗癌药物人参皂苷CK的水溶性，增强其治疗的有效性、稳定性、靶向性及生物利用率。

Preparation of ginsenoside CK- chitosan micelles nanoparticles

The invention provides a preparation method of ginsenoside CK chitosan chitosan micelle nanoparticles. The preparation method of the present invention comprises the following steps: (a) the deoxycholic acid reacts with O_carboxymethyl chitosan to obtain the deoxycholic acid_O_carboxymethyl chitosan polymer carrier; (b) the deoxycholic acid_O_carboxymethyl chitosan polymer carrier is dispersed and stirred in the solution; after ultrasonic treatment, the chitosan is filtered and dried to obtain the self-assembly of the chitosan. Micellar nanoparticles were loaded; (c) Ginsenoside CK solution was added into the dispersion of chitosan self-assembled micelle nanoparticles and stirred; after ultrasonic treatment, dialysis, filtration, and then drying, the ginsenoside CK chitosan micelle nanoparticles were obtained. The method of loading ginsenoside CK with chitosan micelle nanoparticles can improve the water solubility of the anticancer drug ginsenoside CK, and enhance the effectiveness, stability, targeting and bioavailability of the treatment.

【技术实现步骤摘要】
一种人参皂苷CK-壳聚糖胶束纳米粒的制备方法
本专利技术涉及纳米制药领域，具体而言，涉及一种人参皂苷CK-壳聚糖胶束纳米粒的制备方法。
技术介绍
人参皂苷CK存在于人参制剂中，具有抗癌功效，可以通过抑制肿瘤细胞的增殖，抑制侵袭和转移，抑制血管生成，细胞周期阻滞及抗耐药作用与联合用药起到抗肿瘤作用，对于肺癌、胃癌、乳腺癌等多种恶性肿瘤细胞具有很好的抑制作用。壳聚糖是从虾蟹的甲壳中提取的一类多糖，具有生物相容性和生物可降解性，安全无毒；其结构中的2位和6位易于化学修饰，可用于制备多功能纳米药物载体，且氨基易于质子化，与生物黏膜静电吸附，产生药物缓释的作用。壳聚糖及其衍生物由于其独特的性质已被广泛用于纳米载体的制备。纳米载体能增加药物水溶性、改变药物吸收途径，预防药物在胃肠道内代谢降解，在所有的载药系统中，纳米粒药物递送系统具有粒径小，增加药物功效、溶解度和稳定性、延长体内循环时间，实现机体稳态治疗水平及具有靶向性等优点。纳米技术具有靶向性，使得药物在肿瘤部位具有相对高的积累量。因此，目前纳米颗粒在药物的溶解度，稳定性，生物相容性，释放特性和非特异性毒性方面取得了显着的进步。有鉴于此，特提出本专利技术。
技术实现思路
本专利技术的目的在于提供一种人参皂苷CK-壳聚糖胶束纳米粒的制备方法，从而提高抗癌药物人参皂苷CK的水溶性，增强其治疗的有效性、稳定性、靶向性及生物利用率。本专利技术的第二目的在于提供一种由本专利技术所述的制备方法得到的人参皂苷CK-壳聚糖胶束纳米粒。本专利技术的第三目的在于提供一种所述的人参皂苷CK-壳聚糖胶束纳米粒的应用。本专利技术的第四目的在于提供一种包含本专利技术人参皂苷CK-壳聚糖胶束纳米粒的药物或药物组合物。为了实现本专利技术的上述目的，特采用以下技术方案：一种人参皂苷CK壳聚糖胶束纳米粒的制备方法，所述制备方法包括如下步骤：(a)脱氧胆酸与O-羧甲基壳聚糖反应，得到脱氧胆酸-O-羧甲基壳聚糖聚合物载体；(b)将脱氧胆酸-O-羧甲基壳聚糖聚合物载体在溶液中分散，搅拌；超声处理后，过滤、干燥，得到壳聚糖自组装胶束纳米粒；(c)将人参皂苷CK溶液加入壳聚糖自组装胶束纳米粒的分散液中，并搅拌；超声处理后，透析、过滤，然后干燥，得到人参皂苷CK壳聚糖胶束纳米粒。优选的，本专利技术所述的制备方法步骤(a)中还进一步包括：脱氧胆酸溶解后，加入偶联剂，搅拌反应；将所得产物溶液加入O-羧甲基壳聚糖溶液中反应，透析、干燥后，得到脱氧胆酸-O-羧甲基壳聚糖聚合物载体。优选的，本专利技术所述的制备方法步骤(a)中，所述偶联剂为EDC和NHS。优选的，本专利技术所述的制备方法步骤(a)中，O-羧甲基壳聚糖的分子量为5.0×104～8.0×104，取代度大于90％。优选的，本专利技术所述的制备方法步骤(b)中，是在室温条件下搅拌过夜；和/或，步骤(b)中，所述干燥为冷冻干燥。优选的，本专利技术所述的制备方法步骤(b)中，所得壳聚糖自组装胶束纳米粒的粒径为100～200nm。优选的，本专利技术所述的制备方法步骤(c)中，是在室温条件下搅拌过夜；和/或，步骤(c)中，所述干燥为冷冻干燥。同时，本专利技术还提供了由本专利技术方法所得到的人参皂苷CK壳聚糖胶束纳米粒。进一步的，本专利技术也提供了所制备的人参皂苷CK壳聚糖胶束纳米粒在制备肿瘤治疗药物中的应用。同样的，本专利技术还提供了包含本专利技术所述的人参皂苷CK壳聚糖胶束纳米粒的药物或药物组合物。与现有技术相比，本专利技术的有益效果为：本专利技术中所用原料壳聚糖是一种无毒无害的天然多糖，且具有抗菌活性，可提高药物的生物利用度，且脱氧胆酸-O羧甲基壳聚糖聚合物载体具有一定的缓解药物释放的作用，可以增强抗癌药物人参皂苷CK治疗的有效性。附图说明为了更清楚地说明本专利技术实施例或现有技术中的技术方案，以下将对实施例或现有技术描述中所需要使用的附图作简单地介绍。图1为实施例所提供的人参皂苷CK-壳聚糖胶束纳米粒的微观形态图；图2为实施例所提供的人参皂苷CK-壳聚糖胶束纳米粒的粒径分布图；图3为实施例所提供的人参皂苷CK-壳聚糖胶束纳米粒的Zeta电位分布图。具体实施方式下面将结合实施例对本专利技术的实施方案进行详细描述，但是本领域技术人员将会理解，下列实施例仅用于说明本专利技术，而不应视为限制本专利技术的范围。实施例中未注明具体条件者，按照常规条件或制造商建议的条件进行。所用试剂或仪器未注明生产厂商者，均为可以通过市售购买获得的常规产品。有鉴于人参皂苷CK在水溶性和靶向性等方面所存在的不足，本专利技术特提供了一种人参皂苷CK-壳聚糖胶束纳米粒的制备方法，通过采用纳米颗粒负载的方式，以实现对于人参皂苷药用性能的改善。具体的，本专利技术所提供的制备方法步骤可参考如下：(a)脱氧胆酸与O-羧甲基壳聚糖反应，得到脱氧胆酸-O-羧甲基壳聚糖聚合物载体；此步骤中，优选的，是首先将脱氧胆酸与偶联剂反应，然后，将反应所得修饰脱氧胆酸与O-羧甲基壳聚糖反应，并在纯化后得到脱氧胆酸-O-羧甲基壳聚糖聚合物载体。上述反应步骤可具体参考如下：(i)将脱氧胆酸加入溶剂(优选的为DMSO)中，搅拌使其充分溶解，优选的，所用脱氧胆酸中，OCMC糖单元的浓度为0.25～0.45mol/mol，例如可以为，但不限于0.3、0.35，或者0.4mol/mol等；然后，加入偶联剂EDC以及NHS，优选的，EDC和NHS的摩尔量均为脱氧胆酸的1～2倍(更优选的为1.5倍)；在避光条件下持续搅拌反应，得到脱氧胆酸-NHS活性酯溶液；(ii)称取O(氧)-羧甲基壳聚糖(优选的，原料O-羧甲基壳聚糖的分子量为5.0×104～8.0×104，例如可以为，但不限于5.5、6.0、6.5、7.0，或者7.5×104等；取代度为大于90％)溶于水中；搅拌溶解后加甲醇稀释并搅拌均匀，逐滴加入脱氧胆酸-NHS活性酯溶液，并在室温避光条件下搅拌反应；将反应得到溶液透析，然后冷冻干燥，得到脱氧胆酸-O羧甲基壳聚糖聚合物载体。(b)将脱氧胆酸-O-羧甲基壳聚糖聚合物载体在溶液中分散，搅拌；超声处理后，过滤、干燥，得到壳聚糖自组装胶束纳米粒；此步骤中，优选的，是将脱氧胆酸-O羧甲基壳聚糖聚合物载体在水中分散，然后在室温条件下搅拌过夜；然后，在冰浴条件下，使用探头式超声仪器进行超声处理；将超声处理后的反应物溶液过滤后，冷冻干燥，得到壳聚糖自组装胶束纳米粒，其粒径为100～200nm。(c)将人参皂苷CK溶液加入壳聚糖自组装胶束纳米粒的分散液中，并搅拌；超声处理后，透析、过滤，然后干燥，得到人参皂苷CK壳聚糖胶束纳米粒。此步骤中，优选的，是将壳聚糖自组装胶束纳米粒分散于水溶液中，得到相应的分散液；将人参皂苷CK溶于甲醇中，并将所得溶液滴加入如上所制备的分散液中，在室温条件下搅拌反应过夜；然后，将反应液在冰浴条件下进行超声处理，然后透析、过滤、冷冻干燥，即得到人参皂苷CK-壳聚糖胶束纳米粒。此步骤中，原料人参皂苷CK与壳聚糖自组装胶束纳米粒的质量比(1～10)：10；例如可以为，但不限于1:5，3:10，2:5，1:2，3:5，7：10，4:5，或者9:10等。所制备的人参皂苷CK-壳聚糖胶束纳米粒的载药量为3～12％，包封率为20～50％，具有良好的稳定性、缓释效果和抗肿瘤活性。同时，由上述方法所制备的人参皂苷CK-壳聚糖纳米粒可以进一步本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种人参皂苷CK壳聚糖胶束纳米粒的制备方法，其特征在于，所述制备方法包括如下步骤：(a)脱氧胆酸与O‑羧甲基壳聚糖反应，得到脱氧胆酸‑O‑羧甲基壳聚糖聚合物载体；(b)将脱氧胆酸‑O‑羧甲基壳聚糖聚合物载体在溶液中分散，搅拌；超声处理后，过滤、干燥，得到壳聚糖自组装胶束纳米粒；(c)将人参皂苷CK溶液加入壳聚糖自组装胶束纳米粒的分散液中，并搅拌；超声处理后，透析、过滤，然后干燥，得到人参皂苷CK壳聚糖胶束纳米粒。

【技术特征摘要】
1.一种人参皂苷CK壳聚糖胶束纳米粒的制备方法，其特征在于，所述制备方法包括如下步骤：(a)脱氧胆酸与O-羧甲基壳聚糖反应，得到脱氧胆酸-O-羧甲基壳聚糖聚合物载体；(b)将脱氧胆酸-O-羧甲基壳聚糖聚合物载体在溶液中分散，搅拌；超声处理后，过滤、干燥，得到壳聚糖自组装胶束纳米粒；(c)将人参皂苷CK溶液加入壳聚糖自组装胶束纳米粒的分散液中，并搅拌；超声处理后，透析、过滤，然后干燥，得到人参皂苷CK壳聚糖胶束纳米粒。2.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于，步骤(a)中还进一步包括：脱氧胆酸溶解后，加入偶联剂，搅拌反应；将所得产物溶液加入O-羧甲基壳聚糖溶液中反应，透析、干燥后，得到脱氧胆酸-O-羧甲基壳聚糖聚合物载体。3.根据权利要求2所述的制备方法，其特征在于，步骤(a)中，所述偶联剂为EDC和NHS。4...

【专利技术属性】
技术研发人员：胡卫成，张建梅，王益君，王新风，张迹，
申请(专利权)人：淮阴师范学院，
类型：发明
国别省市：江苏,32