The invention provides a separation method for cell microvesicles in biological samples, belonging to the field of biological analysis. The separation method includes: the pretreated biological samples are mixed with lipid particles and incubated to form cell microvesicle lipid particles complex or fusion; and then the cell microvesicle lipid particles complex or fusion organism is separated from the biological samples. This method uses lipid particles to capture cell microvesicles, overcomes the shortcomings of poor dispersion and easy assembly of lipid molecules in biological sample solution, and effectively improves the separation efficiency and purity of cell microvesicles.
【技术实现步骤摘要】
一种生物样品中细胞微囊泡的分离方法
本专利技术涉及生物分析领域，具体而言，涉及一种生物样品中细胞微囊泡的分离方法。
技术介绍
研究人员发现，在许多液体生物样品中均含有多种膜包被的微囊泡，这类微囊泡内包含信使RNAs和microRNA等核酸类物质以及多种蛋白质。以外泌体为例，研究证实，外泌体可作为信使，通过血液、尿液、乳液、唾液等途径介导细胞间的信号转导，其内携带各种蛋白、核酸，甚至全基因组的DNA，因而外泌体内容物通常可以反映细胞健康或者疾病的状态，并且对周围细胞产生的影响，其在一定程度上反映了肿瘤等疾病的相关信息。由此，有效分离此类细胞微囊泡具有重要意义。目前，分离此类细胞微囊泡的方法主要有：1)超速离心法，这种方法需要采用昂贵的设备才能实现；2)聚合物沉淀法，其缺点在于所获得的杂蛋白过多，影响纯化过程；3)凝胶排阻法，其缺点在于分离效率低，产品纯度不高；4)脂质探针捕获法，该方法是使用偶联生物素的脂质分子与样品接触，脂质分子插入微囊泡的磷脂双分子层中，再用亲和素偶联的磁珠捕获生物素-脂质分子-微囊泡复合物。该方法的缺点是脂质分子在水溶液中分散性差，易自组装成脂...
【技术保护点】
1.一种生物样品中细胞微囊泡的分离方法，其特征在于，其包括：将预处理后的生物样品与脂质颗粒混合孵育后，形成细胞微囊泡‑脂质颗粒的复合物或融合物；再将所述细胞微囊泡‑脂质颗粒的复合物或融合物从所述生物样品中分离。
【技术特征摘要】
1.一种生物样品中细胞微囊泡的分离方法，其特征在于，其包括：将预处理后的生物样品与脂质颗粒混合孵育后，形成细胞微囊泡-脂质颗粒的复合物或融合物；再将所述细胞微囊泡-脂质颗粒的复合物或融合物从所述生物样品中分离。2.根据权利要求1所述的生物样品中细胞微囊泡的分离方法，其特征在于，所述生物样品与所述脂质颗粒在混合孵育时的温度为4～37℃、孵育时间为10min～24h。3.根据权利要求1所述的生物样品中细胞微囊泡的分离方法，其特征在于，将所述细胞微囊泡-脂质颗粒的复合物或融合物从所述生物样品中分离时，采用膜过滤法、分子排阻法或离心法。4.根据权利要求1所述的生物样品中细胞微囊泡的分离方法，其特征在于，将所述细胞微囊泡-脂质颗粒的复合物或融合物从所述生物样品中分离时，采用孔径为100nm～2μm的滤膜进行过滤。5.根据权利要求1所述的生物样品中细胞微囊泡的分离方法，其特征在于，所述脂质颗粒为能与所述细胞微囊泡结合的脂质体、固体脂质颗粒、脂复合物颗粒或其组合。6.根据权利要求5所述的生物样品中细胞微囊泡的分离方...
【专利技术属性】
技术研发人员：周明，范松，李劲松，
申请(专利权)人：马英淙，周明，李劲松，范松，
类型：发明
国别省市：北京,11
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