一种抗氯丙那林单克隆抗体杂交瘤细胞株及其应用制造技术

本发明专利技术公开了一种抗氯丙那林单克隆抗体杂交瘤细胞株及其应用，属于食品安全免疫检测领域。本发明专利技术的方法是：氯丙那林完全抗原与等量弗氏佐剂混合乳化后，通过背部皮下注射免疫BALB/c小鼠。第一次免疫用完全弗氏佐剂，之后都用不完全弗氏佐剂。将高效价低IC50的小鼠的脾细胞通过PEG方法与小鼠骨髓瘤细胞融合，经过间接竞争ELISA筛选和三次亚克隆，得到一株杂交瘤细胞株。此细胞株分泌的单克隆抗体，对氯丙那林具有较好的特异性和检测灵敏度，IC50值为0.435ng/ml，可以用于食品中氯丙那林的残留检测。

Hybridoma cell line monoclonal antibody against chlorpromazine and its application

The invention discloses a hybridoma cell line of monoclonal antibody against chlorpromazine and its application, belonging to the field of food safety immunoassay. The method of the invention is that the BALB/c mice are immunized by subcutaneous injection of clopropanoline complete antigen after being emulsified with the same amount of Freund's adjuvant. The first immunization was complete Freund's adjuvant, followed by incomplete Freund's adjuvant. Mice spleen cells with high titer and low IC50 were fused with murine myeloma cells by PEG method. A hybridoma cell line was obtained by indirect competitive ELISA screening and three subclones. The monoclonal antibody secreted by this cell line has good specificity and sensitivity to chlorpromazine. The IC50 value is 0.435ng/ml. It can be used to detect chlorpromazine residue in food.

【技术实现步骤摘要】
一种抗氯丙那林单克隆抗体杂交瘤细胞株及其应用
本专利技术涉及一种抗氯丙那林单克隆抗体杂交瘤细胞株及其应用，属于食品安全免疫学检测领域。
技术介绍
β2-受体激动剂(β2-agonist)能明显促进动物体内蛋白质的合成和脂肪的分解，所以常被当作动物饲料添加剂使用来达到提高饲养动物瘦肉率的目的。但β2-受体激动剂在动物体内代谢缓慢且具有蓄积毒性，动物可食性部分通过食物链进入人体，进而对人类的健康带来危害。氯丙那林的化学名为1-(2-氯苯基)-2-异丙基氨基-乙醇，也是一种β2-受体激动剂，在临床上常用来治疗哮喘类病症。但是当达到一定剂量，它和其它β2-受体激动剂一样在动物体内具有营养再分配作用，可能会被用作一种新型的动物促生长剂。因为公众关注少，所以在例行检测中常被忽略，给动物性食品安全带来潜在的威胁。早在2007年，通过液质联用仪发现了食用畜产品中氯丙那林的残留，并提出“新型瘦肉精”的概念。另外，2013年我国破获的首例兽药非法添加“瘦肉精”案件中，罪魁祸首也是盐酸氯丙那林，它被添加在“30％替米考星注射液”等6种治疗动物感冒的兽药中，造成氯丙那林在动物体内残留。目前检测氯丙那林的方法本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种抗氯丙那林单克隆抗体杂交瘤细胞株，已于2017年9月5日保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏编号为CGMCC No.14689，保藏地址为北京市朝阳区北辰西路1号院3号。

【技术特征摘要】
1.一种抗氯丙那林单克隆抗体杂交瘤细胞株，已于2017年9月5日保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏编号为CGMCCNo.14689，保藏地址为北京市朝阳区北辰西路1号院3号。2.由权利要求1所述的抗氯丙那林单克隆抗体杂交瘤细胞株CGMCCNo.14689分泌的单克隆抗体。3.权利要求2所述的单克隆抗体在检测食品中氯丙那林残留物方面的应用。4.权利要求2所述的单克隆抗体在检测水体中氯丙那林残留物方面的应用。5.权利要求2所述的单克隆抗体在在制备ELISA竞争法检测氯丙那林残留物方面的应用。6.一种氯丙那林的检测方法，其特征在于，所述方法包括：含有包被抗原的固相载体的制备，孵育和检测；所述含有包被抗原的固相载体的制备是合成的氯丙那林包被原包被至固相载体上；孵育是将所述单克隆抗体与待测样品充分结合，再加入酶标抗体；所述检测是加入显色底物，检测OD450下的吸光值。7.一种制备权利要求1所述的抗氯丙那林单克隆抗体杂交瘤细胞株的方法，其特征在于，将氯丙那林抗原化，再将氯丙那林的完全抗原与等量弗氏佐剂混合乳化，免疫小鼠，取高效价，低IC50的免疫小鼠脾细胞...

【专利技术属性】
技术研发人员：匡华，蒋薇，胥传来，徐丽广，马伟，刘丽强，吴晓玲，宋珊珊，胡拥明，
申请(专利权)人：江南大学，无锡迪腾敏生物科技有限公司，
类型：发明
国别省市：江苏,32