The present invention provides a method and kit for the detection of anti-ALS inhibitor herbicide Amaranthus retroflex. The primers shown in SEQ ID NO.1_2 are used for PCR detection of the tested samples. If the amplified products are mutated from alanine to threonine at 122 sites, from proline to histidine at 197 sites, or from alanine to valine at 205 sites. Acids, which were mutated from aspartic acid to glutamic acid at 376 sites, from tryptophan to leucine at 574 sites, from serine to asparagine at 653 sites, or from serine to tyrosine at 654 sites, were tested as anti-ALS inhibitor herbicide Amaranthus retroflexus. The kit of the invention contains primer pairs shown in SEQ ID NO.1 NO.1. The method has high specificity and good repeatability, can accurately detect the anti-ALS inhibitor herbicide Amaranthus retroflex, provides technical support for herbicide use in farmland, and has good application prospect.
【技术实现步骤摘要】
抗ALS抑制剂类除草剂反枝苋的检测方法及试剂盒
本专利技术涉及分子生物学
，具体涉及抗ALS抑制剂类除草剂反枝苋的检测方法及试剂盒。
技术介绍
乙酰乳酸合成酶(Acetolactatesynthase，简称ALS，EC2.2.1.6)，存在于植物、真菌、细菌以及藻类等生物体内。它是合成支链氨基酸(亮氨酸、异亮氨酸、缬氨酸)的关键酶。而支链氨基酸是合成蛋白质必不可少的原料。ALS抑制剂类除草剂是以ALS酶为靶标的除草剂。杂草受药后，ALS酶的活性被抑制，支链氨基酸合成被阻，DNA合成被破坏，最终导致植株死亡。ALS抑制剂类除草剂因除草活性高、对非靶标生物安全等优点而得到了广泛的应用。自1982年美国杜邦公司注册登记首例ALS抑制剂类除草剂氯磺隆以来，全球现已开发ALS抑制剂类除草剂50余种。在我国，广泛用于大豆田杂草防除的ALS抑制剂类除草剂主要有：咪唑乙烟酸(Imazethapyr)、氯嘧磺隆(Chlorimuron-ethyl)、噻吩磺隆(Thifensulfuron-methyl)、甲氧咪草烟(Imazamox)、灭草喹(Imazaquin)、灭草烟(I...
【技术保护点】
1.一种用于检测抗ALS抑制剂类除草剂反枝苋的特异性引物对，其特征在于，含有SEQ ID NO.1‑2所示的引物。
【技术特征摘要】
1.一种用于检测抗ALS抑制剂类除草剂反枝苋的特异性引物对，其特征在于，含有SEQIDNO.1-2所示的引物。2.含有权利要求1所述特异性引物对的试剂盒。3.权利要求1所述的特异性引物对或权利要求2所述的试剂盒在鉴定抗ALS抑制剂类除草剂反枝苋中的应用。4.权利要求1所述的特异性引物对或权利要求2所述的试剂盒在指导农田除草用药中的应用。5.抗ALS抑制剂类除草剂反枝苋的检测方法，其特征在于，包括以下步骤：(1)提取待测样品基因组DNA，以其为模板，利用权利要求1所述特异性引物对进行PCR；(2)对扩增产物进行测序，检测相应氨基酸位点的氨基酸。6.如权利要求5所述的检测方法，其特征在于，步骤(1)中PCR扩增反应使用的扩增体系，当体系30μL时配制如下：上下游引物各1μL，浓度10pmol...
【专利技术属性】
技术研发人员：黄兆峰，魏守辉，黄红娟，张朝贤，周欣欣，陈景超，姜翠兰，
申请(专利权)人：中国农业科学院植物保护研究所，
类型：发明
国别省市：北京,11
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