细胞内递送化合物制造技术

提供具有式I的化合物，其药学上可接受的盐、其药物组合物及其在抗体的细胞内递送中的用途。

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】细胞内递送化合物相关申请的交叉引用本申请要求申请号为62/382,828，2016年9月2日提交的美国临时专利申请；申请号为62/327,130，2016年4月25日提交的美国临时专利申请；和申请号为62/244,176，2015年10月20日提交的美国临时专利申请的优先权。上述申请中的每个申请的内容通过引用全部结合与本文中。
本专利技术部分针对用于细胞内递送或用于增强细胞内递送一或更多种肽或蛋白质(例如，抗体)的化合物。
技术介绍
治疗肽及蛋白质(例如，抗体)以治疗各种疾病的以有用及有前景的药物靶标呈现。蛋白质及肽治疗比基于传统小分子的药物具有数个优点。在一个实例中，蛋白质及肽治疗通常负责执行传统治疗方法无法模仿的特异性生物功能。不同于大多数小分子药物，在活体内蛋白质及肽通常耐受性良好且通常不会干扰非靶向生物过程。尽管有这样的优点，治疗肽及蛋白质(例如，抗体)受限于其对细胞内区室的有限进入。另外，即使在实现细胞内进入的实例中，肽及蛋白质(例如，抗体)仍会经部分降解，从而导致对靶标识别的不完全呈现。考虑到肽及蛋白质(例如，抗体)的治疗潜能，及对抗疾病的持续需求，用于完整肽及蛋白质(例如，抗体)的递送或增强完整肽及蛋白质(例如，抗体)的递送的方式仍为有吸引力的研究领域。
技术实现思路
现已发现本文描述的化合物及其药学上可接受的组合物在细胞内有效地递送完整抗体。参见例如，图14A、图14B、图15A及图15B。这些化合物包括具有式I的化合物：或其药学上可接受的盐，其中X、q、Ba、R1、r、t、L及AT中的每一个如本文定义及描述。还提供使用所公开的化合物来治疗本文所述的一种或多种疾病及病症的方法。附图说明本专利或本申请档案含有至少一个彩色绘制的附图。经请求并支付必要费用，由专利局提供具有彩色附图的本专利或专利申请公布的副本。图1显示化合物752(其中AT为抗VEGFR2IgG的式I的化合物)的SDS-PAGE特征。图2显示化合物752(其中AT为抗VEGFR2IgG的式I的化合物)的质谱数据。图3说明使用化合物802(其中AT为帕尼单抗(Panitumumab；)的式I的化合物)抑制人乳腺癌细胞系中配体诱导的EGFR磷酸化。图4说明使用化合物802(其中AT为帕尼单抗的式I的化合物)抑制人癌细胞中EGFR-下游抗凋亡基因的mRNA表达。图5说明化合物850(其中AT为抗CTLA4IgG的式I的化合物)的SDSPAGE特征。图6为显示克隆ST1A5(“1A5”)、ST3G12(“3G12”)及ST5G12(5G12”)的表达的经考马斯蓝染色的SDSPAGE。图7为显示用以评估STAT3克隆ST1A5、ST3G12及ST5G12结合至U251恶性胶质母细胞瘤细胞中的细胞抗原的ELISA分析的结果的图。图8A为显示评估抗STAT3抗体ST1A5、ST3G12及ST5G12结合至MDA-MB-435细胞中的细胞抗原的细胞结合分析的结果的图。MFI是指检测到的平均荧光强度。图8B为显示评估抗STAT3抗体ST1A5、ST3G12及ST5G12结合至U251细胞中的细胞抗原的细胞结合分析的结果的图。图9为显示评估裸抗STAT3ST3G12抗体(ST3G12)及化合物901a(其中AT为ST3G12的式I的化合物)结合至U251细胞中的细胞抗原的细胞结合分析的结果的图。图10为显示用以评估未经修饰(未经修饰的ST3G12)及具有化合物950的抗STAT3ST3G12抗体结合至人IgG的ELISA分析的结果的图。图11为显示用以评估未经修饰及具有化合物901a的抗STAT3ST3G12抗体结合至重组人STAT3蛋白的ELISA分析的结果的图。图12A为显示为测定人包皮成纤维细胞(HFF)、正常人星形胶质细胞(NHA)、正常结肠成纤维细胞(CCD-18CO)、正常乳腺上皮细胞(MCF-10A)、胶质母细胞瘤(U251)、三阴性乳腺癌(MDA-MB-468)、三阴性乳腺癌(HCC1954)及ER+乳腺癌(MCF-7)中的STAT3总水平及磷酸化STAT3(磷酸化STAT3)水平而实施的ELISA分析的结果的图。图12B为显示图12A中测试的细胞中的磷酸化STAT与总STAT的比率(比率P/TSTAT3)的图。图13A为显示测定化合物901a对MCF-10A细胞中STAT3磷酸化的影响的实验结果的图。图13B为显示测定化合物901a对MCF7细胞中STAT3磷酸化的影响的实验结果的图。实验过程与图13A中描述的实验过程相同。图14A为显示化合物901a在MDA-MB-468细胞中聚集的时间进程的实验结果的图。该结果显示化合物901a在肿瘤细胞中的聚集延长。图14B为显示在MCF-10A细胞中进行的与图14A中描述相同的实验的图。该结果显示在6小时后，化合物901a的聚集减少。图14C为显示用以表明化合物901a的修饰不影响其对人IgG的结合亲和力而实施的ELISA实验的结果的图。Superblock是指用于ELISA分析中的阻断缓冲剂。图14D为显示用以表明化合物901a的修饰不影响其对人IgG的结合亲和力而实施的ELISA实验的结果的图。图15A显示其中MDA-MB-468三阴性乳腺癌细胞经含于比例渐增的人血清(1％、5％、10％及20％)中的10ug/ml化合物901a治疗的显微图像。图15B为聚集于U251细胞中的化合物901a的显微图像。图15C为MCF10A人正常乳腺上皮细胞摄取化合物901a的显微图像。图15D为MDA-MB-468人乳腺癌细胞中的化合物901a的显微图像。图15E为U251细胞中的化合物901内化的共焦显微图像。图16A为显示温度对化合物901a在U251细胞中的内化的影响的图。图16B为显示温度对化合物901a在MDA-MB-468细胞中的内化的影响的图。图17A为显示为测定MDA-MB-480细胞中化合物901a的细胞摄取而实施的时间过程分析的结果的图。图17B为显示为测定MCF-10A细胞中化合物901a的细胞摄取而实施的时间过程分析的结果的图。图18为显示化合物901a使用胞吞作用独立机制进入MDA-MB-438(STAT3高)肿瘤细胞的图。图19为显示网格蛋白抑制剂Pitstop2(PS2；30uM或60uM)或窖蛋白抑制剂filipin(0.5ug/ml或1.0ug/ml)对MCF-10A细胞中的化合物901a介导的摄取的影响的图。图20为显示在MDA-MB-468乳腺癌细胞中进行的与图19中相同实验的结果的图。图21A为显示用以测定化合物901a的进入是否依赖于温度而实施的实验的结果的图。图21B为显示用以测定化合物901a的进入是否依赖于温度而实施的实验的结果的图。图22为显示用以测试抗STAT3抗体结合物是否可阻断IL-26诱导的IL-10细胞因子及抗凋亡基因BCL2L1及BIRC5的mRNA表达的结果图。图23显示化合物912(其中AT为抗KRAS的式I的化合物)的SDS-PAGE特征。图24显示抗KRAS抗体及化合物912的HPLC–HIC(疏水相互作用色谱)。图25显示化合物901a(其中AT为抗Stat3IgGST3G12的式I的化合物)的SDS-PAGE特征。图2本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种具有式I的化合物：

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】2015.10.20 US 62/244,176;2016.04.25 US 62/327,130;1.一种具有式I的化合物：其中，各Ba独立地选自腺嘌呤(A)、鸟嘌呤(G)、胞嘧啶(C)及胸腺嘧啶(T)；X为O或S；各R1独立地选自氢及经荧光团取代的(C1-C6)烷基；q为12至35的整数；r为1至10的整数；t为1至10的整数；L为-CH2-R2-*；R2为经选自以下的1或2个基团取代的-(C1-C6)烷基：-C(＝O)NRa、-NRaC(＝O)Rb、-NRaC(＝O)Rd、＝NORe、-NRa、-NRaRb、-ORb、-S(O)kRb、-NRaS(O)2Rb、-S(O)2NRaRb、-S(O)2NRa、-C(＝O)ORb、-OC(＝O)ORb、-OC(＝O)Rb、-C(＝O)NRaRb、-NRaC(＝O)Rb、-NRaC(＝O)ORb、-OC(＝O)NRaRb、苯基、-OC(＝O)NRa、-NRaC(＝O)NRaRb、-NRaC(＝O)NRa、-NRa(C＝S)NRaRb、-NRa(C＝S)NRa及-C(＝O)Rb；k为0、1或2；各Ra独立地为氢或任选地经Rf取代的(C1-C6)烷基；各Rb独立地为任选地经Rf或-C(＝O)Rf取代的(C1-C6)烷基；Rd为-[(C1-C6)烷基-O-(C1-C6)烷基]vC(＝O)NH；Re为-[(C1-C6)烷基-O-(C1-C6)烷基]pC(＝O)；各Rf独立地为其中波浪键是指与由Ra定义的(C1-C6)烷基或各由Rb定义的(C1-C6)烷基或羰基连接的连接点；Rg为(C1-C6)烷基或-[(C1-C6)烷基-O-(C1-C6)烷基]wC(＝O)NH；环A为其中虚线键是指与Rf的三唑基连接的连接点，并且波浪键是指与由Ra定义的(C1-C6)烷基或各由Rb定义的(C1-C6)烷基或羰基连接的连接点；p为1至10的整数；v为1至10的整数；w为2至12的整数；*是指与AT连接的连接点；并且AT为抗体。2.根据权利要求1所述的化合物，其特征在于，R2为经以下基团取代的-(C1-C6)烷基：-C(＝O)NRa、-NRaC(＝O)Rb、-NRaC(＝O)Rd、＝NORe、-NRa、-NRaRb、-ORb、-S(O)kRb、-NRaS(O)2Rb、-S(O)2NRaRb、-S(O)2NRa、-C(＝O)ORb、-OC(＝O)ORb、-OC(＝O)Rb、-C(＝O)NRaRb、-NRaC(＝O)Rb、-NRaC(＝O)ORb、-OC(＝O)NRaRb、-OC(＝O)NRa、-NRaC(＝O)NRaRb、-NRaC(＝O)NRa、-NRa(C＝S)NRaRb、-NRa(C＝S)NRa或-C(＝O)Rb。3.根据权利要求1或2所述的化合物，其特征在于，R2为经以下基团取代的-(C1-C6)烷基：-C(＝O)NRa、-NRaC(＝O)Rb、-NRaC(＝O)Rd、＝NORe、-NRa、-NRaRb、-ORb、-S(O)2NRaRb、-S(O)2NRa、-C(＝O)ORb、-C(＝O)NRaRb、-NRaC(＝O)Rb、-NRaC(＝O)ORb、-NRaC(＝O)NRaRb、-NRaC(＝O)NRa或-C(＝O)Rb。4.根据权利要求1至3中任一项所述的化合物，其特征在于，R2为-(C1-C6)烷基-NRaC(＝O)Rd、-(C1-C6)烷基-NRaC(＝O)Rb或-(C1-C6)烷基(＝NO)Re。5.根据权利要求1至4中任一项所述的化合物，其特征在于，Rd为-[(C1-C4)烷基-O-(C1-C4)烷基]vC(＝O)NH。6.根据权利要求1至5中任一项所述的化合物，其特征在于，Re为-[(C1-C4)烷基-O-(C1-C4)烷基]pC(＝O)。7.根据权利要求1至6中任一项所述的化合物，其特征在于，Rg为-[(C1-C4)烷基-O-(C1-C4)烷基]vC(＝O)NH。8.根据权利要求1至7中任一项所述的化合物，其特征在于，各Ra独立地选自氢和(C1-C6)烷基。9.根据权利要求1至8中任一项所述的化合物，其特征在于，Rb为经Rf或-C(＝O)Rf取代的(C1-C6)烷基。10.根据权利要求1至9中任一项所述的化合物，其特征在于，p为1至6的整数。11.根据权利要求1至10中任一项所述的化合物，其特征在于，p为1至4的整数。12.根据权利要求1至11中任一项所述的化合物，其特征在于，v为1至6的整数。13.根据权利要求1至12中任一项所述的化合物，其特征在于，v为1至4的整数。14.根据权利要求1至13中任一项所述的化合物，其特征在于，w为2至10的整数。15.根据权利要求1至14中任一项所述的化合物，其特征在于，w为2至8的整数。16.根据权利要求1至15中任一项所述的化合物，其特征在于，w为2至4的整数。17.根据权利要求1至16中任一项所述的化合物，其特征在于，Rf为18.根据权利要求1至17中任一项所述的化合物，其特征在于，环A为19.根据权利要求1至18中任一项所述的化合物，其特征在于，该荧光团若存在，则为荧光素。20.根据权利要求1至4、7至9及10至19中任一项所述的化合物，其特征在于，该化合物为式II的化合物：或其药学上可接受的盐。21.根据权利要求1至4、7至9及10至20中任一项所述的化合物，其特征在于，该化合物为式IIa的化...

【专利技术属性】
技术研发人员：Y·福，亨利·吉，贡纳·乔格·弗洛里斯·考夫曼，H·李，英格尔·桑帕特·拉拉索，
申请(专利权)人：索伦托治疗有限公司，
类型：发明
国别省市：美国,US