骆驼刺提取物及骆驼刺提取物中分离单体化合物的方法和应用技术

本发明专利技术涉及骆驼刺技术领域，是一种骆驼刺提取物及骆驼刺提取物中分离单体化合物的方法和应用，本发明专利技术首次从骆驼刺提取物中分离出单体化合物紫铆素、原儿茶醛、tortoside A和4‑乙烯基‑3‑甲氧基苯酚，本发明专利技术骆驼刺提取物作为制备防治肿瘤药物或/和保健品以及抑制或/和杀灭宫颈癌Hela细胞药物中的应用，本发明专利技术首次公开了tortoside A和4‑乙烯基‑3‑甲氧基苯酚对结肠癌HT‑29细胞、胃癌BGC823细胞、肝癌HepG2细胞、口腔癌KB细胞具有显著抑制作用，从而使本发明专利技术tortoside A和4‑乙烯基‑3‑甲氧基苯酚可以用于制备防治结肠癌、胃癌、肝癌、口腔癌的药物或/和保健品。

Method and application of separating monomer compounds from extracts of camel thorn and camel thorn

The invention relates to the technical field of camel thorn, which is a method and application for separating monomer compounds from camel thorn extract and camel thorn extract. For the first time, the monomer compounds violet riveting element, protocatechuic aldehyde, tortoside A and 4_vinyl_3_methoxyphenol are separated from camel thorn extract, and the camel thorn extract is extracted by the invention. It is the first time that tortoside A and 4_vinyl_3_methoxyphenol have significant inhibitory effects on colon cancer HT_29 cells, gastric cancer BGC_cells, liver cancer HepG2 cells and oral cancer KB cells. Thus tortoside A and 4_vinyl_3_methoxyphenol of the invention can be used for preparing drugs or/or health care products for preventing and treating colon cancer, stomach cancer, liver cancer and oral cancer.

【技术实现步骤摘要】
骆驼刺提取物及骆驼刺提取物中分离单体化合物的方法和应用
本专利技术涉及骆驼刺
，是一种骆驼刺提取物及骆驼刺提取物中分离单体化合物的方法和应用。
技术介绍
骆驼刺(AlhagisparsifoliaShap)是新疆干旱沙漠地区特有的一种落叶灌木，它也是沙漠戈壁“三宝”之一，具有开通阻滞、止咳祛痰、消除异常黏液质等功效，用于腹痛腹胀、痢疾腹泻、风湿病、滋补强壮、平衡体液和异常胆液质的常见药方。课题组对乌鲁木齐周边的骆驼刺与吐鲁番地区骆驼刺进行了比较，近年来由于乌鲁木齐周边等地气候较温和适宜的地区，其骆驼刺已不产生刺糖。因此本专利技术采用吐鲁番地区含刺糖骆驼刺作为研究对象。本专利技术借鉴前期发现的骆驼刺提取物抗肿瘤和增强免疫的研究基础，为了深入探讨骆驼刺提取物对宫颈癌的影响，本专利技术通过体外培养人宫颈癌Hela细胞，观察骆驼刺提取物中单体化合物对宫颈癌Hela细胞、结肠癌HT-29细胞、胃癌BGC823细胞、肝癌HepG2细胞、口腔癌KB细胞增殖、凋亡的影响，并初步探讨其发生机制，明确骆驼刺中具有抗肿瘤活性的单体化合物的种类，为利用骆驼刺活性成分治疗宫颈癌提供实验依据，同时对寻找新的抗癌药物和充分挖掘利用新疆维药资源无疑是一项非常有意义的工作。
技术实现思路
本专利技术提供了一种骆驼刺提取物及骆驼刺提取物中分离单体化合物的方法和应用，本专利技术骆驼刺提取物作为制备防治肿瘤药物或/和保健品以及抑制或/和杀灭宫颈癌Hela细胞药物中的应用，本专利技术首次公开了tortosideA和4-乙烯基-3-甲氧基苯酚对结肠癌HT-29细胞、胃癌BGC823细胞、肝癌HepG2细胞、口腔癌KB细胞具有显著抑制作用。本专利技术的技术方案之一是通过以下措施来实现的：一种骆驼刺提取物，包括单体化合物紫铆素、原儿茶醛、tortosideA和4-乙烯基-3-甲氧基苯酚，骆驼刺提取物按照下述步骤得到：取骆驼刺地上部分，用纯净水浸泡0.5h至1h后，用体积百分比浓度为70％的乙醇溶液回流提取三次，每次1.5h至2h，合并提取液后，过滤、浓缩提取液得到乙醇提取物，乙醇提取物即为骆驼刺提取物。本专利技术的技术方案之二是通过以下措施来实现的：一种骆驼刺提取物中分离单体化合物的方法，按照下述方法进行：取所需量乙醇提取物与等体积的水均匀混合，得到乙醇提取物稀释液，再量取所需量乙醇提取物稀释液，依次用与乙醇提取物稀释液等体积的石油醚、乙酸乙酯、正丁醇进行萃取，得到石油醚萃取粗提取物、乙酸乙酯萃取粗提取物、正丁醇萃取粗提取物；取所需量乙酸乙酯萃取粗提取物，采用硅胶吸附柱色谱，用石油醚或/和乙酸乙酯进行梯度洗脱，洗脱液经硅胶薄层鉴别后，得到乙酸乙酯萃取粗提取物的8个馏分，将乙酸乙酯萃取粗提取物第3馏分通过硅胶吸附柱色谱进行梯度洗脱时，采用体积比为42:56的二氯甲烷和甲醇作洗脱剂，得到3个组分，将乙酸乙酯萃取粗提取物第3馏分的第1组分通过SephadexLH-20凝胶柱色谱洗脱时，采用二氯甲烷和甲醇作洗脱剂，得到单体化合物4-乙烯基-3-甲氧基苯酚，将乙酸乙酯萃取粗提取物第8馏分通过开放ODS柱色谱进行梯度洗脱时，采用甲醇和水作洗脱剂，得到3个组分，将乙酸乙酯萃取粗提取物第8馏分的第2组分采用制备型高效液相色谱进行分离，得到单体化合物tortosideA；取所需量正丁醇萃取粗提取物，采用HPD100大孔吸附树脂进行粗分后，依次用体积百分比浓度为30％的乙醇、水、体积百分比浓度为90％的乙醇、水梯度洗脱，得到正丁醇萃取洗脱物，取所需量正丁醇萃取洗脱物，采用硅胶吸附柱色谱，用二氯甲烷或/和甲醇进行梯度洗脱，洗脱液经硅胶薄层鉴别后，得到的正丁醇萃取粗提取物的5个馏分，将正丁醇萃取粗提取物第1馏分通过开放ODS柱色谱洗脱时，采用甲醇和水作洗脱剂，得到2个组分，将正丁醇萃取粗提取物第1馏分的第1组分采用制备型高效液相色谱进行分离，得到单体化合物紫铆素，将正丁醇萃取粗提取物第4馏分通过开放ODS柱色谱洗脱时，采用甲醇和水作洗脱剂，得到3个组分，将正丁醇萃取粗提取物第4馏分的第1组分采用制备型高效液相色谱进行分离，得到单体化合物原儿茶醛。下面是对上述专利技术技术方案之二的进一步优化或/和改进：上述乙酸乙酯萃取粗提取物，用石油醚或/和乙酸乙酯进行梯度洗脱，石油醚与乙酸乙酯的体积比为0至100:0至100，石油醚由100递减至0，乙酸乙酯由0递增至100或/和，正丁醇萃取洗脱物，用二氯甲烷或/和甲醇进行梯度洗脱，二氯甲烷与甲醇体积比为0至100:0至100，二氯甲烷由100递减至0，甲醇由0递增至100。上述乙酸乙酯萃取粗提取物第3馏分的第1组分通过SephadexLH-20凝胶柱色谱洗脱时，采用二氯甲烷和甲醇作洗脱剂，二氯甲烷与甲醇的体积比为1:1；或/和，乙酸乙酯萃取粗提取物第8馏分通过开放ODS柱色谱洗脱时，采用甲醇和水作洗脱剂，甲醇与水的体积比为1:1；或/和，正丁醇萃取粗提取物第1馏分通过开放ODS柱色谱洗脱时，采用的甲醇和水作洗脱剂，甲醇与水的体积比为1:1；或/和，正丁醇萃取粗提取物第4馏分通过开放ODS柱色谱洗脱时，采用甲醇和水作洗脱剂，甲醇与水的体积比为1:1。本专利技术的技术方案之三是通过以下措施来实现的：一种骆驼刺提取物作为制备防治肿瘤药物或/和保健品中的应用。本专利技术的技术方案之四是通过以下措施来实现的：一种骆骆驼刺提取物作为制备抑制或/和杀灭宫颈癌Hela细胞药物中的应用。本专利技术的技术方案之五是通过以下措施来实现的：一种骆驼刺提取物中单体化合物4-乙烯基-3-甲氧基苯酚作为制备防治结肠癌或/和胃癌或/和肝癌或/和口腔癌的药物或/和保健品中的应用。本专利技术的技术方案之六是通过以下措施来实现的：一种骆驼刺提取物中单体化合物4-乙烯基-3-甲氧基苯酚作为制备抑制或/和杀灭结肠癌HT-29细胞或/和胃癌BGC823细胞或/和肝癌HepG2细胞或/和口腔癌KB细胞的药物或/和保健品中的应用。本专利技术的技术方案之七是通过以下措施来实现的：一种骆驼刺提取物中单体化合物tortosideA作为制备防治结肠癌或/和胃癌或/和肝癌或/和口腔癌的药物或/和保健品中的应用。本专利技术的技术方案之八是通过以下措施来实现的：一种骆驼刺提取物中单体化合物tortosideA作为制备抑制或/和杀灭结肠癌HT-29细胞或/和胃癌BGC823细胞或/和肝癌HepG2细胞或/和口腔癌KB细胞的药物或/和保健品中的应用。本专利技术首次从骆驼刺提取物中，分离出单体化合物紫铆素、原儿茶醛、tortosideA、4-乙烯基-3-甲氧基苯酚，本专利技术骆驼刺提取物作为制备防治肿瘤药物或/和保健品以及抑制或/和杀灭宫颈癌Hela细胞药物中的应用，本专利技术首次公开了tortosideA和4-乙烯基-3-甲氧基苯酚对结肠癌HT-29细胞、胃癌BGC823细胞、肝癌HepG2细胞、口腔癌KB细胞具有显著抑制作用，从而使本专利技术tortosideA和4-乙烯基-3-甲氧基苯酚可以用于制备防治结肠癌、胃癌、肝癌、口腔癌的药物或/和保健品。具体实施方式本专利技术不受下述实施例的限制，可根据本专利技术的技术方案与实际情况来确定具体的实施方式。本专利技术中所提到各种化学试剂和化学用品如无特殊说明，均为现有技术中公知公用的化学试剂和化学用品；本专利技术中的百分数如没有特殊说本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种骆驼刺提取物，其特征在于包括单体化合物紫铆素、原儿茶醛、tortoside A和4‑乙烯基‑3‑甲氧基苯酚，骆驼刺提取物按照下述步骤得到：取骆驼刺地上部分，用纯净水浸泡0.5h至1h后，用体积百分比浓度为70％的乙醇溶液回流提取三次，每次1.5h至2h，合并提取液后，过滤、浓缩提取液得到乙醇提取物，乙醇提取物即为骆驼刺提取物。

【技术特征摘要】
1.一种骆驼刺提取物，其特征在于包括单体化合物紫铆素、原儿茶醛、tortosideA和4-乙烯基-3-甲氧基苯酚，骆驼刺提取物按照下述步骤得到：取骆驼刺地上部分，用纯净水浸泡0.5h至1h后，用体积百分比浓度为70％的乙醇溶液回流提取三次，每次1.5h至2h，合并提取液后，过滤、浓缩提取液得到乙醇提取物，乙醇提取物即为骆驼刺提取物。2.一种骆驼刺提取物中分离单体化合物的方法，其特征在于按照下述方法进行：取所需量乙醇提取物与等体积的水均匀混合，得到乙醇提取物稀释液，再量取所需量乙醇提取物稀释液，依次用与乙醇提取物稀释液等体积的石油醚、乙酸乙酯、正丁醇进行萃取，得到石油醚萃取粗提取物、乙酸乙酯萃取粗提取物、正丁醇萃取粗提取物；取所需量乙酸乙酯萃取粗提取物，采用硅胶吸附柱色谱，用石油醚或/和乙酸乙酯进行梯度洗脱，洗脱液经硅胶薄层鉴别后，得到乙酸乙酯萃取粗提取物的8个馏分，将乙酸乙酯萃取粗提取物第3馏分通过硅胶吸附柱色谱进行梯度洗脱时，采用体积比为42:56的二氯甲烷和甲醇作洗脱剂，得到3个组分，将乙酸乙酯萃取粗提取物第3馏分的第1组分通过SephadexLH-20凝胶柱色谱洗脱时，采用二氯甲烷和甲醇作洗脱剂，得到单体化合物4-乙烯基-3-甲氧基苯酚，将乙酸乙酯萃取粗提取物第8馏分通过开放ODS柱色谱进行梯度洗脱时，采用甲醇和水作洗脱剂，得到3个组分，将乙酸乙酯萃取粗提取物第8馏分的第2组分采用制备型高效液相色谱进行分离，得到单体化合物tortosideA；取所需量正丁醇萃取粗提取物，采用HPD100大孔吸附树脂进行粗分后，依次用体积百分比浓度为30％的乙醇、水、体积百分比浓度为90％的乙醇、水梯度洗脱，得到正丁醇萃取洗脱物，取所需量正丁醇萃取洗脱物，采用硅胶吸附柱色谱，用二氯甲烷或/和甲醇进行梯度洗脱，洗脱液经硅胶薄层鉴别后，得到的正丁醇萃取粗提取物的5个馏分，将正丁醇萃取粗提取物第1馏分通过开放ODS柱色谱洗脱时，采用甲醇和水作洗脱剂，得到2个组分，将正丁醇萃取粗提取物第1馏分的第1组分采用制备型高效液相色谱进行分离，得到单体化合物紫铆素，将正丁醇萃取粗提取物第4馏分通过开放ODS柱色谱洗脱时，采用甲醇和水作洗脱剂，得到3个组分，将...

【专利技术属性】
技术研发人员：魏鸿雁，马晓玲，石磊岭，徐建国，
申请(专利权)人：新疆维吾尔自治区中药民族药研究所，
类型：发明
国别省市：新疆,65