一种测定养殖水中多种污染物残留的分析方法技术

本发明专利技术公开了一种测定养殖水中多种污染物残留的分析方法，采用超声辅助、分散液液微萃取对养殖水样品进行前处理，配制邻苯二甲酸酯类标准品、分散染料和荧光增白剂50种标准品溶液绘制标准曲线，用超高效液相色谱‑高分辨质谱仪分析,对养殖水中邻苯二甲酸酯类、荧光增白剂和分散染料进行高通量测定。本发明专利技术可以同时测定食品接触塑料制品中50种添加物残留，灵敏度高，检测限为0.1～1.0μg/kg。本发明专利技术方法灵敏、快速、简单、准确、省时、稳定，实用性强，能满足目前市场的检测需求。

【技术实现步骤摘要】
一种测定养殖水中多种污染物残留的分析方法
本专利技术涉及一种测定养殖水中多种污染物残留的分析方法，特别是一种利用超声辅助分散液液微萃取-超高效液相色谱-高分辨质谱测定养殖水中多种污染物残留的分析方法，属于食品化学分析

技术介绍
近年来，我国的经济发展速度十分迅猛，随着而来的我国城市化进程也在不断加快，我国的工业化水平也取得了突飞猛进的发展，但由于我国的发展经济的过程中没有充分考虑到经济发展对环境的影响，导致了水体被严重污染，这种现状非常不利于水产养殖的健康发展。水产养殖非常依赖于干净、清洁的水环境，只有水体干净了，水产养殖物的生产和产量及品质才会提高，水产养殖的发展也才会有良好的发展前景。邻苯二甲酸酯类(PAEs)是应用最为广泛的一类塑化剂，荧光增白剂(fluorescentwhiteningagents，FWAs)和分散染料常作为有色染料广泛的用于纺织、塑料等制品中，这三类物质容易从环境中向养殖水中迁移，会在养殖水产品中富集，对食用者的健康造成潜在危害。目前未见有关于检测养殖水中邻苯二甲酸酯类、荧光增白剂和分散染料检测方法的相关报道。四极杆/静电场轨道阱高分辨(Q-Exactive)质谱仪具有分辨率高及定量能力好的优点，不同于三重四极杆低分辨质谱使用多反应监测(MRM)模式对目标物的离子对进行定量分析，Q-Exactive质谱可以利用目标物母离子精确的相对分子质量直接定量，无需对目标物逐个优化子离子及相关参数，对于多目标物的分析，可以极大地降低检测的时间，同时又能很好地避免低分辨质谱易受基质干扰而产生假阳性的现象。
技术实现思路
本专利技术所要解决的技术问题是克服现有技术的不足，提供一种使用UA-DLLEM-UPLC-QExactiveOrbitrapMS高通量检测养殖水中31种邻苯二甲酸酯类、7种荧光增白剂和12种分散染料的检测方法，填补现有检测技术的空白。本专利技术为了实现上述目的，采用以下技术方案：一种测定养殖水中多种污染物残留的分析方法，其特征在于包括以下步骤：(1)配制标准溶液将选定的邻苯二甲酸酯类标准品、荧光增白剂标准品和分散染料标准品配制成1mg/mL的标准储备液；(2)超声辅助提取称取50mL养殖水样品，在5℃条件下14000r/min离心10min，取上清液5.0ml，50℃超声提取10min，上清液移入10ml锥形离心管中并加入0.03gNaCl，涡旋溶解2min，用乙酸溶液调pH至6.0；(3)分散液液微萃取将250μL分散剂和50μL萃取剂混合，用1mL的玻璃注射器迅速注入步骤(2)提取的溶液中，轻晃离心管，混合形成水、乙腈、三氯甲烷的乳浊液，以4500r/min离心5min，离心后的下层溶液用微型注射器取20μL，进行超高效液相色谱—高分辨质谱检测；(4)超高效液相色谱-高分辨质谱仪分析。本专利技术中，邻苯二甲酸酯类标准品分别为：邻苯二甲酸单甲酯(MHP)、邻苯二甲酸单丁酯(MBP)、邻苯二甲酸二(2-甲氧基)乙酯(DMEP)、邻苯二甲酸二乙酯(DEP)、邻苯二甲酸二(2-乙氧基)乙酯(DEEP)、邻苯二甲酸二烯丙酯(DAP)、邻苯二甲酸二异丙酯(DIPrP)、邻苯二甲酸二丙酯(DPrP)、邻苯二甲酸二苯酯(DPhP)、邻苯二甲酸二异丁酯(DIBP)、邻苯二甲酸二苄酯(DBzP)、邻苯二甲酸单-2-乙基己基酯(MEHP)、邻苯二甲酸丁苄酯(BBP)、邻苯二甲酸二丁酯(DBP)、邻苯二甲酸二(2-丁氧基)乙酯(DBEP)、邻苯二甲酸正戊异戊酯(IPP)、邻苯二甲酸二环己酯(DCHP)、邻苯二甲酸二异戊酯(DIPP)、邻苯二甲酸二戊酯(DPP)、邻苯二甲酸二(4-甲基-2-戊基)酯(BMPP)、邻苯二甲酸二己酯(DHXP)、邻苯二甲酸二(2-乙基己)酯(HEHP)、邻苯二甲酸双庚酯(DHP)、邻苯二甲酸二(2-乙基)己酯(DEHP)、邻苯二甲酸二异辛酯(DIOP)、邻苯二甲酸二正辛酯(DNOP)、邻苯二甲酸二异壬酯(DINP)、邻苯二甲酸二壬酯(DNP)、邻苯二甲酸二异癸酯(DIDP)、邻苯二甲酸二月桂酯(DLP)、邻苯二甲酸二甲酯(DMP)。其中邻苯二甲酸单丁酯(MBP)、邻苯二甲酸单-2-乙基己基酯(MEHP)标准品，称取定量标准品，用体积比为1：1：1的甲醇-丙酮-正己烷混合溶剂溶解后再用正己烷定容，用甲醇稀释，制成1mg/mL的标准储备液，其余邻苯二甲酸酯类标准品，称取定量，用正己烷配制成1mg/mL的单一标准储备液。本专利技术中分散染料标准品和荧光增白剂标准品分别为：纯度≥99.0％的分散黄23、纯度≥97.0％的分散红11、分散红1纯度≥97.5％、分散黄39纯度≥99.0％、分散黄3纯度≥99.0％、分散橙37纯度≥96.0％、分散橙3纯度≥95.0％、分散橙11纯度≥91.5％、分散蓝106纯度≥99.0％、分散蓝102纯度≥98.0％、分散红17纯度≥92.0％、分散蓝124纯度≥99.0％，C.I.184纯度≥98.0％、C.I.140纯度≥94.0％、C.I.135纯度≥95.0％、C.I.185纯度≥98.0％、C.I.367纯度≥98.0％、C.I.162纯度≥94.0％、C.I.368纯度≥98.0％，配制标准储备液时称取适量标准品用甲醇溶解定容，制成质量浓度为1mg/mL的标准储备液。本专利技术超声辅助提取时用的微型射器为50μL微型注射器。本专利技术中，分散液液微萃取中，所述的分散剂为乙腈，所述的萃取剂为CHCl3。本专利技术中，超高效液相色谱-高分辨质谱仪的参数为：色谱：CAPCELLPAKMGⅡC18柱，150mm×2.0mm，5μm；柱温：40℃；进样量：10μL；流动相：A为甲醇，含0.04％甲酸，B为20mmoL/L乙酸铵水溶液，含0.04％甲酸；梯度洗脱程序0～40.0min，流动相A的比例由35％线性变化至80％；40.0～45.0min，流动相A的比例由80％线性变化至95％；45.0～55.0min，保持A相为95％；55.0～60.0min，保持35％A；质谱：加热电喷雾离子源温度为350℃，离子传输温度为325℃，鞘气为40bar，辅助气为10bar，毛细管电压为3.2KV；FuLLscan/ddms2扫描模式：采集范围为100～1500Da，正离子模式采集；一级质谱分辨率为70000FWHM，二级质谱分辨率为17500FWHM；碰撞池能量NCE为20，40，60eV。各目标化合物的质量分析参数见表1。表1：本专利技术与现有技术相比，有以下优点：1、采用本方法测定养殖水中50种污染物残留，灵敏度高，检测限为0.1μg/kg～1.0μg/kg。2、本方法只需少量分散剂、萃取剂(乙腈250μL，三氯甲烷50μL)，能够减少对检测人员的毒害作用，保护环境。3、本方法的样品前处理时间短(<25min)，节省了分析时间，因此适用于大批量检测养殖水样品。本专利技术将分散液液微萃取技术运用于养殖水中邻苯二甲酸酯类、荧光增白剂和分散染料检测，结合四极杆/静电场轨道阱高分辨(Q-Exactive)质谱分辨率高及定量能力好的优势，建立了快速、准确省时的高通量检测养殖水中邻苯二甲酸酯类、荧光增白剂和分散染料的检测方法。【附图说明】图1为浓度本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种测定养殖水中多种污染物残留的分析方法，其特征在于包括以下步骤：(1)配制标准溶液将选定的邻苯二甲酸酯类标准品、荧光增白剂标准品和分散染料标准品配制成1mg/mL的标准储备液；(2)超声辅助提取称取50mL养殖水样品，在5℃条件下14000r/min离心10min，取上清液5.0ml，50℃超声提取8～12min，上清液移入10ml锥形离心管中并加入0.02～0.045gNaCl，涡旋溶解2min，用乙酸溶液调pH至4.5～8.5；(3)分散液液微萃取将200～300μL分散剂和50μL萃取剂混合，用1mL的玻璃注射器迅速注入步骤(2)提取的溶液中，轻晃离心管，混合形成水、乙腈、三氯甲烷的乳浊液，以4500r/min离心5min，离心后的下层溶液用微型注射器取20μL，进行超高效液相色谱—高分辨质谱检测；(4)超高效液相色谱‑高分辨质谱仪分析。

【技术特征摘要】
1.一种测定养殖水中多种污染物残留的分析方法，其特征在于包括以下步骤：(1)配制标准溶液将选定的邻苯二甲酸酯类标准品、荧光增白剂标准品和分散染料标准品配制成1mg/mL的标准储备液；(2)超声辅助提取称取50mL养殖水样品，在5℃条件下14000r/min离心10min，取上清液5.0ml，50℃超声提取8～12min，上清液移入10ml锥形离心管中并加入0.02～0.045gNaCl，涡旋溶解2min，用乙酸溶液调pH至4.5～8.5；(3)分散液液微萃取将200～300μL分散剂和50μL萃取剂混合，用1mL的玻璃注射器迅速注入步骤(2)提取的溶液中，轻晃离心管，混合形成水、乙腈、三氯甲烷的乳浊液，以4500r/min离心5min，离心后的下层溶液用微型注射器取20μL，进行超高效液相色谱—高分辨质谱检测；(4)超高效液相色谱-高分辨质谱仪分析。2.根据权利要求1所述的一种测定养殖水中多种污染物残留的分析方法，其特征在于所述的邻苯二甲酸酯类标准品分别为：邻苯二甲酸单甲酯、邻苯二甲酸单丁酯、邻苯二甲酸二(2-甲氧基)乙酯、邻苯二甲酸二乙酯、邻苯二甲酸二(2-乙氧基)乙酯、邻苯二甲酸二烯丙酯、邻苯二甲酸二异丙酯、邻苯二甲酸二丙酯、邻苯二甲酸二苯酯、邻苯二甲酸二异丁酯、邻苯二甲酸二苄酯、邻苯二甲酸单-2-乙基己基酯、邻苯二甲酸丁苄酯、邻苯二甲酸二丁酯、邻苯二甲酸二(2-丁氧基)乙酯、邻苯二甲酸正戊异戊酯、邻苯二甲酸二环己酯、邻苯二甲酸二异戊酯、邻苯二甲酸二戊酯、邻苯二甲酸二(4-甲基-2-戊基)酯、邻苯二甲酸二己酯、邻苯二甲酸二(2-乙基己)酯、邻苯二甲酸双庚酯、邻苯二甲酸二(2-乙基)己酯、邻苯二甲酸二异辛酯、邻苯二甲酸二正辛酯、邻苯二甲酸二异壬酯、邻苯二甲酸二壬酯、邻苯二甲酸二异癸酯、邻苯二甲酸二月桂酯、邻苯二甲酸二甲酯。3.根据权利要求2所述的一种测定养殖水中多种污染物残留的分析方法，其特征在于所述的邻苯二甲酸单丁酯、邻苯二甲酸单-2-乙基己基酯标准品，称取定量标准品，用体积比为1：1：1的甲醇-丙酮-正己烷混合溶剂溶解后再用正己烷定容，用甲醇稀释，制成1mg/mL的标准储备液，其余邻苯二甲酸酯类标...

【专利技术属性】
技术研发人员：张宪臣，华洪波，张朋杰，容裕棠，
申请(专利权)人：张宪臣，
类型：发明
国别省市：广东,44