治疗性HPV卵黄抗体及其应用制造技术

本发明专利技术属于生物医学领域，具体涉及一种HPV E6/E7重组微环DNA的卵黄抗体及其在治疗HPV感染的应用。其中HPV E6/E7重组微环DNA包含HPV16的E6/E7基因重组片段以及信号肽序列，将其作为核酸抗原直接免疫产蛋鸡获得本发明专利技术的卵黄抗体。DNA核酸抗原肌肉注射免疫产蛋鸡所获得的卵黄抗体(IgY)的生物活性远超一般技术(皮下注射蛋白抗原)制备的卵黄抗体，抗体效价更高，特异性更强。本发明专利技术的卵黄抗体可用于制备治疗HPV感染的药物，阴道用药对HPV阳性患者输入高活性抗HPV抗体，结合纳米脂质体的方法，抗体跨膜进入细胞，直接中和细胞内的HPV病毒的E6/E7蛋白。因此本发明专利技术的卵黄抗体对于治疗HPV感染以及预防宫颈癌有重要意义。

Therapeutic HPV yolk antibody and its application

The invention belongs to the field of biomedicine, in particular to an egg yolk antibody of HPV E6/E7 recombinant microcyclic DNA and its application in the treatment of HPV infection. The HPV E6/E7 recombinant microcyclic DNA contains the recombinant E6/E7 gene fragment of HPV 16 and the signal peptide sequence, which is used as the nucleic acid antigen to immunize laying hens directly to obtain the yolk antibody of the invention. The biological activity of egg yolk antibody (IgY) obtained by intramuscular immunization of laying hens with DNA nucleic acid antigen is much higher than that of egg yolk antibody prepared by general technology (subcutaneous injection of protein antigen), and the antibody has higher titer and specificity. The yolk antibody of the invention can be used for preparing medicines for treating HPV infection. Vaginal medicines can inject highly active anti-HPV antibodies into HPV-positive patients, and combine the method of nano-liposome, the antibody enters the cell through the membrane, and directly neutralizes the E6/E7 protein of HPV virus in the cell. Therefore, the egg yolk antibody is of great significance for the treatment of HPV infection and prevention of cervical cancer.

【技术实现步骤摘要】
治疗性HPV卵黄抗体及其应用
本专利技术属于生物医学领域，具体涉及一种HPVE6/E7重组微环DNA的卵黄抗体及其在治疗HPV感染的应用。
技术介绍
宫颈癌占女性妇科恶性肿瘤的第二位，现已成为威胁女性健康的重要疾患，中国每年死于宫颈癌的人数将近5万，宫颈癌的病因研究一直为国内外学者所重视，研究发现引起宫颈癌的关键是HPV的感染。HPV属于乳头瘤病毒科乳头瘤病毒属，是球形、双链环状DNA病毒。HPV主要通过直接或间接接触污染物品或通过性传播感染人类。HPV的感染有宿主特异性和组织特异性，只能感染人类的皮肤和粘膜受损的基底细胞。HPV经损伤的宫颈粘膜首先感染基底细胞层，病毒以少量游离DNA状态潜伏在基底细胞内，以实现免疫逃逸。当基底细胞不断分化、成熟、向粘膜表层迁移，HPV病毒就大量增殖。随着粘膜表层上皮细胞的凋亡，病毒颗粒大量释放到上皮表面，作为新的感染源可进一步加重感染。长期HPV持续感染导致宿主细胞相关基因表达发生变化，可逐渐发展为宫颈癌。HPV至今已鉴定明确的大约有200多个亚型，根据其致病和预后不同又可分为高危型HPV(HR-HPV)和低危型HPV(LR-HPV)，其中HR-H本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一段包含HPV E6/E7片段的DNA重组片段，其特征在于，由信号肽序列区、Flt3L序列区、连接区、HPV E6/E7片段、标签区依次连接组成；所述HPV E6/E7片段的核苷酸序列如SEQ ID NO:1、SEQ ID NO:2或SEQ ID NO:3所示；所述Flt3L序列区的的核苷酸序列如SEQ ID NO:4所示。

【技术特征摘要】
1.一段包含HPVE6/E7片段的DNA重组片段，其特征在于，由信号肽序列区、Flt3L序列区、连接区、HPVE6/E7片段、标签区依次连接组成；所述HPVE6/E7片段的核苷酸序列如SEQIDNO:1、SEQIDNO:2或SEQIDNO:3所示；所述Flt3L序列区的的核苷酸序列如SEQIDNO:4所示。2.根据权利要求1所述的DNA重组片段，其特征在于，所述连接区的核苷酸序列如SEQIDNO:5所示。3.根据权利要求1所述的DNA重组片段，其特征在于，所述标签区的核苷酸序列如SEQIDNO:6所示。4.根据权利要求1所述的DNA重组片段，其特征在于，所述信号肽序列区为选自组织型纤溶酶原激活物tPa、HSVgDs及生长激素的分泌信号肽对应的核苷酸序列中的一种或多种。5.根据权利要求1所述的DNA重组片段，其特征在于，所述信号肽序列区的核苷酸序列如SEQIDNO:7所示。6.重组微环DNA，其特征在于，所述微环DNA包含权利要求1所述的DNA重组片段。7.权利要求6所述的重组微环DNA作为核酸抗原制备的卵黄抗体。8.权利要求7所述的卵黄抗体的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：1)权利...

【专利技术属性】
技术研发人员：庞以芹，谢亦武，吴必杰，魏勇，
申请(专利权)人：江苏润洁生物科技有限公司，
类型：发明
国别省市：江苏,32