一种红霉素杂质B的分离方法技术

本发明专利技术涉及一种红霉素杂质B的分离方法，其特征在于其工艺步骤为：将经过陶瓷微滤膜过滤、脱色树脂脱色、纳滤浓缩处理后红霉素发酵液打入树脂柱中进行循环吸附，待树脂柱中的水溶液完全走空后，氨水过柱，排出树脂中的残余水分，然后用洗脱剂洗脱，根据流出时间或流出量，将流出的洗脱剂分段接出、分别成盐结晶。本发明专利技术利用红霉素B在不同时间段中在洗脱剂中的溶解度不同，来达到分离的目的，通过收集不同时间段的洗脱液病分别成盐结晶，得到具有不同杂质B含量的硫氰酸红霉素成品，将这种不同质量的成品应用于不同用途，从而满足不同市场需求。

A method for separating erythromycin impurity B

The invention relates to a separation method of erythromycin impurity B, which is characterized in that the process steps are as follows: after the ceramic microfiltration membrane filtration, decolorization resin decolorization, and nanofiltration concentration treatment, the erythromycin fermentation liquid is sorted into the resin column, and after the water solution in the resin column is completely empty, the ammonia water passes through the column and the resin is discharged. Remaining water is then eluted with eluent, and the eluent is separated into salt crystals according to the elution time or quantity. The invention uses the different solubility of erythromycin B in the eluant in different time periods to achieve the purpose of separation. By collecting the salt crystallization of the eluant in different time periods, the product of erythromycin thiocyanate with different impurity B content is obtained, and the finished products of different quality are applied to different uses and thus satisfied. Different market demand.

【技术实现步骤摘要】
一种红霉素杂质B的分离方法
本专利技术涉及生物与新医药技术，特别是涉及一种红霉素杂质B的分离方法。
技术介绍
红霉素是一类大环内酯类抗生素，主要由链霉菌、小单孢菌和糖多孢菌产生。在临床上主要应用于治疗革兰氏阳性细菌感染，对革兰氏阴性菌如流感杆菌、百日咳杆菌、淋球菌、布氏杆菌、军团菌及脑膜炎球菌等也有抗菌作用。红霉素发酵液中主要含有红霉素A(Er-A)、红霉素B（Er-B）、红霉素C（Er-C）、红霉素D（Er-D）、以及红霉素E（Er-E）、红霉素F（Er-F），其中红霉素A是红霉素成品（硫氰酸红霉素）的主要活性成分，红霉素B和红霉素C生物活性低，副作用大，是成品中的杂质，欧洲药典中规定它们的含量不能超过5%。此外，新一代红霉素衍生物都是以红霉素A为原料合成的。因此，有效提升红霉素A含量，降低成品中红霉素B（Er-B）、红霉素C（Er-C）、红霉素D（Er-D）、以及红霉素E（Er-E）、红霉素F（Er-F）等杂质成分含量是当前红霉素生产的一个重要技术突破点。红霉素杂质B(结构式如下式所示)的化学结构和红霉素A在R、R1、R2位上的官能团相同，唯一不同的是在氨基糖部分，即红霉素B的甲氨基，比红霉素A少了一个甲基而显得碱性更强一些，在成盐反应中红霉素杂质B会优先参与成盐结晶并析出，从而影响到红霉素产品的数量和质量。因此，切实阻断红霉素杂质B的成盐反应可能是提升红霉素产品数量和质量的有效手段。但是在结晶过程中，要避免红霉素杂质B与硫氰酸的成盐反应非常困难。
技术实现思路
本专利技术的目的在于克服上述现有技术的缺陷，提供一种控制硫氰酸红霉素成品中红霉素杂质B的方法，该方法通过在红霉素成盐结晶的上游降低或分离红霉素杂质B，从而有效控制硫氰酸红霉素成品中的杂质B含量。为实现上述专利技术目的所采取的技术方案为：一种红霉素杂质B的分离方法，其特征在于其工艺步骤为：将经过陶瓷微滤膜过滤、脱色树脂脱色、纳滤浓缩处理后红霉素发酵液打入树脂柱中进行循环吸附，待树脂柱中的水溶液完全走空后，氨水过柱，排出树脂中的残余水分，然后用洗脱剂洗脱，根据流出时间或流出量，将流出的洗脱剂分段接出、分别成盐结晶。用所述陶瓷微滤膜过滤多次，每次过滤完后加水稀释，再过滤。所述陶瓷微滤膜滤径为1～10μｍ。经两道脱色树脂脱色，脱色液透光率不低于35%。所述树脂为漂莱特红霉素专用吸附树脂PAD550，过柱速度1-5BV/h。所述洗脱剂为丙酮、醋酸丁酯和乙醇中的一种或几种的混合液，其用量为树脂体积1-2.5BV（BV，树脂柱内装载树脂的体积称为床，容积(bedvolume)简写为BV）。本专利技术是在综合考虑了阻断红霉素杂质B与硫氰酸的成盐反应的困难性后，另辟蹊径，在成盐结晶的上游降低或分离杂质B来达到降低红霉素成品中的红霉素B杂质含量。本专利技术基于极性原理，即红霉素各组分在洗脱剂中的溶解度不同，来达到分离的目的。通过收集不同时间段的洗脱液并分别成盐结晶，得到具有不同杂质B含量的硫氰酸红霉素成品，将这种不同质量的成品应用于不同用途（如对杂质B含量高的产品用于低质量要求的产品合成或重结晶工艺。），从而满足不同市场需求。具体实施方式下面用实例予以说明本专利技术，应该理解的是，实例是用于说明本专利技术而不是对本专利技术的限制。本专利技术的范围与核心内容依据权利要求书加以确定。下述实施例中，红霉素发酵液采用以红色链霉菌微生物的7天培养发酵液，发酵液pH=6.0～7.0,温度为32～36℃,发酵单位一般为6000～9000μ/ml。下述实施例中，陶瓷微滤膜的滤径为1～10μｍ；洗脱过程为碱性有机溶剂，包括：丙酮、醋酸丁酯、乙醇等有机溶剂或者以上有机溶剂不同比例的混合物；脱色树脂为市售江苏苏青大孔吸附树脂DOC2001。下述实施例中，树脂采用漂莱特PAD550型，将树脂装柱，玻璃柱高径比为60:9，树脂装柱高度25cm，共1000ml。下述实施例中，树脂柱用乙醇浸泡12h以上，并循环清洗30min以活化。活化结束，排出乙醇，用纯水将树脂中的乙醇压出至无乙醇残留，待用。树脂吸附期间控制流速在1-5BV/h。实施例1取陶瓷微滤膜分离出的红霉素过滤液10000ml，红霉素化学单位6500u/ml，先后经过两道脱色树脂脱色，脱色后透光率44.2%。然后纳滤浓缩2倍或以上，红霉素浓度5000～30000u/ml。用蠕动泵将浓缩液打入吸附树脂，过柱速度为3BV/h，循环吸附，直至树脂出水红霉素浓度小于200u/ml时吸附结束。待树脂柱中的水溶液完全走空后，用0.5BV、浓度为0.5%的氨水过柱，用空气将树脂柱中的残水顶出（*BV单位均以树脂体积计）。用2200ml醋酸丁酯做洗脱剂，用蠕动泵打入吸附树脂柱，洗脱速率0.5BV/h。洗脱液流出1800ml时，将余下的洗脱液单独接出。用分液漏斗将醋酸丁酯中的残水分出。醋酸丁酯洗脱液分别检测红霉素浓度。根据醋酸丁酯洗脱液体积和红霉素浓度，计算洗脱收率。将上述两段收集的醋酸丁酯洗脱液分别成盐结晶：在搅拌下按醋酸丁酯洗脱液中红霉素总量（以百万为单位）的1.0分别加入50%硫氰酸钠水溶液，搅拌均匀后，滴加20%的冰醋酸水溶液，控制终点pH4.0-5.0。结晶结束，用抽滤分离，用湿品2倍体积纯水洗涤湿盐两次，抽干，湿品用烘箱干燥。干品用液相检测组份含量。实验结果见下表：批号洗脱部分洗脱收率%红A红B红C杂A杂B杂C杂D杂E杂F收率%EMT-1一步洗脱液82.381.40.160.690.50.303.410.20.470.1769.3EMT-3二步洗脱液15.679.40.270.920.962.801.530.21.210.467.2实施例2取陶瓷膜分离出的红霉素过滤液10000ml，红霉素化学单位6023u/ml，先后经过两道脱色树脂脱色，脱色后透光率37.8%，脱色液用纳滤浓缩2倍或以上，红霉素浓度5000～30000u/ml。用蠕动泵将脱色液打入活化好的吸附树脂，过柱速度为1.5BV/h，循环吸附，直至吸附后水溶液中的红霉素浓度小于200u/ml时吸附结束。待树脂柱中的水溶液完全走空后，用0.5BV、浓度为1.0%的氨水过柱，用空气将树脂柱中的残水顶出。用1500ml醋酸丁酯做洗脱剂，用蠕动泵打入吸附树脂，洗脱速率0.5BV/h。洗脱液每流出500ml时，与后面的洗脱液分开。用分液漏斗将醋酸丁酯中的残水分出。醋酸丁酯洗脱液分别检测红霉素浓度。根据醋酸丁酯洗脱液体积和红霉素浓度，计算洗脱收率。将上述三段收集的醋酸丁酯洗脱液分别成盐结晶：在搅拌下按醋酸丁酯洗脱液红霉素总量（以百万为单位）的1.0加入50%硫氰酸钠水溶液，搅拌均匀后，滴加20%的冰醋酸水溶液，控制终点pH4.0-5.0。结晶结束，用抽滤分离，用湿品2倍体积纯水洗涤湿盐两次，抽干后，烘箱干燥，干品用液相检测组份含量。实验结果见下表：批号洗脱部分洗脱收率%红A红B红C杂A杂B杂C杂D杂E杂F收率%EMT-1一步洗脱液68.383.80.270.080.140.224.390.082.160.5369.8EMT-2二步洗脱液22.481.40.310.220.380.443.820.240.990.3666.7EMT-3三步洗脱液7.663.40.150.20.252.071.410.040.630.本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种红霉素杂质B的分离方法，其特征在于其工艺步骤为：将经过陶瓷微滤膜过滤、脱色树脂脱色、纳滤浓缩处理后的红霉素发酵液打入树脂柱中进行循环吸附，待树脂柱中的水溶液完全走空后，氨水过柱，排出树脂中的残余水分，然后用洗脱剂洗脱，根据流出时间或流出量，将流出的洗脱剂分段接出、分别成盐结晶得到杂质B含量不同的硫氰酸红霉素。

【技术特征摘要】
1.一种红霉素杂质B的分离方法，其特征在于其工艺步骤为：将经过陶瓷微滤膜过滤、脱色树脂脱色、纳滤浓缩处理后的红霉素发酵液打入树脂柱中进行循环吸附，待树脂柱中的水溶液完全走空后，氨水过柱，排出树脂中的残余水分，然后用洗脱剂洗脱，根据流出时间或流出量，将流出的洗脱剂分段接出、分别成盐结晶得到杂质B含量不同的硫氰酸红霉素。2.按照权利要求1所述的红霉素杂质B的分离方法，其特征在于，用所述陶瓷微滤膜过滤多次，每次过滤完后加水稀释，再过滤。3.按照权利要求1...

【专利技术属性】
技术研发人员：罗江涛，李学兵，王东东，鲍晶，张志，
申请(专利权)人：宁夏启元药业有限公司，
类型：发明
国别省市：宁夏,64