本发明专利技术涉及使用分子标志物作为呼吸系统感染病例演变的预后工具来检测呼吸系统疾病。具体而言，在对由合胞呼吸道病毒和人偏肺病毒引起的呼吸系统感染的鉴别诊断过程中，将建立严重性标志物IL‑3、IL‑33和IL12p40的表达模式。可以使用ELISA测定、流式细胞术或实时PCR定义生物样品中分子标志物的表达模式。感染病原体的确认结合分子标志物IL‑3、IL‑33和IL12p40的模式定义将指示疾病严重性的预后。
IL-3, IL-33 and IL-12P40 are used to characterize respiratory infections caused by syncytial respiratory viruses.
The present invention relates to the use of molecular markers as a prognostic tool for respiratory system infections to detect respiratory diseases. Specifically, in the differential diagnosis of respiratory infection caused by the syncytial respiratory virus and the human partial lung virus, the expression pattern of IL 3, IL 33 and IL12p40, a serious marker, will be established. ELISA markers, flow cytometry or real-time PCR can be used to define the expression patterns of biomarkers in biological samples. Patterns defining the binding molecular markers IL_3, IL_33and IL_12p40to the pathogen of infection will indicate the prognosis of disease severity.
【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】IL-3、IL-33和IL-12P40用于表征由合胞呼吸道病毒引起的呼吸系统感染的用途专利
本专利技术涉及分子标志物作为呼吸系统感染病例演变的检测工具的用途。具体地，在对由合胞呼吸道病毒(SRV)和人偏肺病毒(MPV)引起的呼吸系统感染的鉴别诊断过程中。具体地，在本专利技术中描述了标志物IL-3、IL-12p40和IL-33用于预测由SRV引起的细支气管炎导致的反复呼吸系统事件的发生的用途。现有技术合胞呼吸道病毒(SRV)是呼吸道感染最常见的原因，也是婴儿下呼吸道急性感染引起住院的首要原因。SRV细支气管炎已经与哮喘和反复喘息相关联，但这种相关联的机制尚未得到阐明。SRV是属于副粘病毒科(Paramyxoviridae)的包膜病毒，是呼吸道急性感染的更普遍的病原体之一，在公共卫生系统中造成高负荷。SRV引起所有年龄患者的下呼吸道疾病，在6个月以下的婴儿中并且特别是在慢性疾病或基础疾病患儿中感染更严重。许多患有SRV细支气管炎的婴儿在其生命的头几个月内发展成反复喘息和哮喘，但SRV引起细支气管炎免疫发病机制的具体机制仍不明确。此外，目前的临床参数不允许预测曾经患有SRV细支气管炎的婴儿在以后的生命中遭受某些慢性疾病的可能性。由这种病毒引起的炎症的特征是在下呼吸道中存在大量的细胞浸润，大部分是嗜中性粒细胞。肺中的这种变化已被描述为诱导特异性细胞因子和趋化因子分泌的由气道上皮细胞中、肺泡巨噬细胞和外周血嗜中性粒细胞的SRV感染的结果。这些分子对炎性细胞和另一种细胞显示趋化性质。Th1/Th2型细胞因子的失衡也被认为是SRV感染引起的细胞募集炎症中的关键事件，其可能由嗜酸性粒细胞和可能有助于哮喘发展的与过敏诱导相关的另一类细胞如嗜碱性粒细胞和肥大细胞介导。此外，已知由气道上皮细胞产生的一些细胞因子直接参与过敏诱导和哮喘，包括IL-25、IL-33和胸腺基质淋巴细胞生成素(TSL)。在现有技术中发现了一些文献，其指出使用标志物作为呼吸系统疾病的鉴别诊断工具，其中发现：专利申请WO2012169887A2涉及预测SRV严重性的方法，然而该文献研究标志物OLFM4、CD177、MMP8、MMP9、PTX3、IL-8、RANTES和CD4及其组合，没有提及使用标志物IL-3、IL-12p40和IL-33。从该文献不能推导得到的是,细胞因子IL-33、IL12p40或IL-3将会与表现出反复喘息的患者或在被SRV感染后未来发展为哮喘的可能性有关系。文献EP1867734A1描述分子标志物用于疾病的诊断和预后的用途。但是，其涉及的疾病为脑血管型，并且它没有提及用于诊断呼吸系统疾病的标志物。只有少数研究已经分析了婴儿SRV细支气管炎期间呼吸道的上部和下部区域。本专利技术的目的是公开分子标志物细胞因子IL-3、IL-12p40和IL-33用于预测由于SRV感染产生的细支气管炎的未来反复喘息发生(IL-3和IL12p40)或在这些婴儿生命的较后阶段可能发展成哮喘(IL-33)的用途。附图说明图1。图1显示与对照相比，感染SRV的患者的支气管肺泡灌洗液(BALF)中细胞因子和趋化因子的产生模式。由Luminex分析在患有SRV细支气管炎的婴儿和作为对照的健康婴儿的BALF中定义细胞因子和趋化因子浓度。细胞因子和趋化因子浓度以pg/ml表示，并根据它们的四分位数中位数和范围进行分组以用于它们的比较。通过Mann-Whitney的非参数检验U定义与对照健康婴儿(N＝5)相比SRV细支气管炎(N＝14)的显著性(*P值<0.05被认为统计学显著)。分析了BALF样品(sampler)中IL-3、IL-4、IL-10和IL-13(a),IL-1β、IL-6、IL-7和TNF-β(b),趋化因子CCL2/MCP-1、CCL3/MIP1α、嗜酸性粒细胞趋化因子和IL-8(c)以及IL-12p40、IL-12p70、IFN-γ和IL-17(d)的产生。图2。图2显示与对照个体相比，感染SRV患者的鼻咽抽吸物(NPA)样品中细胞因子和趋化因子的产生模式。使用定量RT-PCR中的TaqMan探针通过相对定量(RQ)将患有SRV细支气管炎的婴儿(N＝14)的NPA中介质(mediator)表达与对照婴儿(N＝5)进行比较。TaqMan特异性探针用于扩增细胞因子IL-1α、IL-1β、TNFα、IL-6和IL-8(a)；趋化因子CXCL10、CCL2/MCP-1、CCL3/MIP-1α和CCL4/MIP-1β(b)。介质的相对浓度表示为相对于对照的相对诱导的增加倍数。它们的中位数和四分位数值分别显示为水平条和矩形(*P值<0.05被认为统计学显著)。图3。图3显示根据随访期间哮喘发展的SRV细支气管炎婴儿的BALF样品的细胞因子和趋化因子产生。根据随访期间哮喘发展分析以下细胞因子和趋化因子浓度：嗜酸性粒细胞趋化因子、IL-3、IL-5、TNF-β(a)和IL-12p40、IL-12p70和IL-7(b)，其是通过Luminex在患有SRV引起的细支气管炎的婴儿的BALF样品中检测的(N＝14)。介质浓度表示为pg/ml并且它们的中位数和四分位数的值分别显示为水平条和矩形(*P值<0.05被认为统计学显著)。图4。图4显示了根据特应性过敏家族史分析的患有SRV细支气管炎的婴儿鼻咽抽吸物中IL-33的ARN信使诱导的相对定量。在具有或不具有特应性过敏家族史的患有SRV细支气管炎的婴儿(N＝14)的鼻咽抽吸物中定义IL-33的基因表达。结果显示为相对于对照的相对诱导的增加倍数。每个组的中位数和四分位数值分别显示为水平条和矩形(*P值<0.05被认为统计学显著)。图5。图5显示了感染SRV的患者的BALF样品中IL-12p40和IL-3与反复喘息发作次数之间的相关性。建立了IL-12p40(a)或IL-3(b)与患有SRV的婴儿(14)的BALF样品中反复喘息发作的Pearson相关性。结果针对随访期间的细胞因子和发作次数表示为pg/ml(*P值<0.05被认为统计学显著)。专利技术描述本专利技术描述了分子标志物IL-3、IL-12p40和IL-33作为预测在这些婴儿、具体是在12月龄以下的患者中生命的较后阶段在SRV感染引起的细支气管炎后反复喘息发生(IL-3、IL-12p40)和可能发展成哮喘(IL-33)的分子标志物的用途。用于预测由SRV和MPV感染发展成的疾病的严重性的方法包括：-使用标志物IL-3、IL-12p40和IL-33，使用分子生物学方法如PCR扩增呼吸系统分泌样品；-用某种分子定量方法如ELISA定量与标志物IL-3、IL-33或IL-12p40互补的靶序列的过表达；-基于定量所获得的过表达关联由SRV引起的疾病的发展：如果在支气管肺泡灌洗中发现浓度大于500pg/ml的IL-12p40或IL-3，则发展喘息的可能性高；如果在支气管肺泡灌洗中发现浓度大于500pg/ml的IL-33，则发展哮喘的可能性高。实施例12月龄以下的先前健康的婴儿，由于病毒性细支气管炎而住院治疗的婴儿登记在本研究中。要进入登记，患者必须为SRV免疫荧光阳性并且为12个月以下，没有严重疾病的风险因本文档来自技高网...
【技术保护点】
1.分子标志物IL‑3、IL‑12p40和IL‑33的用途，其中它们用于由合胞呼吸道病毒(SRV)引起的细支气管炎后反复喘息和哮喘的预测。
【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】2015.07.31 CL 2015021531.分子标志物IL-3、IL-12p40和IL-33的用途，其中它们用于由合胞呼吸道病毒(SRV)引起的细支气管炎后反复喘息和哮喘的预测。2.根据权利要求1所述的用途，其中呼吸感染之一是细支气管炎。3.用于预测细支气管炎后由它引起的反复喘息和哮喘的方法，其中该方法包括：-使用标志物IL-3、IL-1...
【专利技术属性】
技术研发人员：A·M·卡莱伊斯帕拉，S·M·布埃诺拉米雷斯，J·P·贝特兰德纳瓦雷特，M·K·莱雷莫尔科伊，
申请(专利权)人：智利天主教教皇大学，
类型：发明
国别省市：智利,CL
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