一种袋鼠蕨种苗组培快繁方法技术

本发明专利技术公开了一种繁殖速度快、成本低且出苗率高的袋鼠蕨种苗组培快繁方法。本发明专利技术包括以下步骤：（1）芽的诱导与分化，挑取袋鼠蕨匍匐茎带芽点的茎段并在芽点处分化出不定芽；（2）无菌苗的增殖培养，取分化出的不定芽置于MS培养基中，获得数量巨大的植株；（3）无菌苗的移栽驯化，植株长成3～5cm的植株后进行移栽驯化，洗净所述无菌苗根部的培养基并移栽入泥炭土和沙石的基质内。本发明专利技术可应用于袋鼠蕨培育领域。

A rapid propagation method for tissue culture of fern of kangaroo

The invention discloses a tissue culture and rapid propagation method of kangaroo fern seedling with fast propagation speed, low cost and high seedling emergence rate. The invention includes the following steps: (1) the induction and differentiation of buds, pick up the stem segments of the bud point of the kangaroo fern and differentiate the adventitious buds at the bud point; (2) the proliferation and culture of the sterile seedlings, the differentiated adventitious buds are placed in the MS medium, and a large number of plants are obtained, and (3) the transplanting and domestication of aseptic seedlings and the plants grow to 3. After transplanting and domesticating the plants, the roots of the aseptic seedlings were washed and transplanted into the peat soil and sand stone substrates. The invention can be applied to the field of cultivation of kangaroo ferns.

【技术实现步骤摘要】
一种袋鼠蕨种苗组培快繁方法
本专利技术涉及一种植物培养方法，尤其涉及一种袋鼠蕨（WART/KANGAROOFERN,拉丁名Microsorumscoiopendrium）种苗组培快繁方法。
技术介绍
袋鼠蕨，这容易生在热带的蕨类植物不仅是一个受欢迎的室内植物,而且可以非常优秀地被当作户外地被植物种植，或是装在篮子中置于阴暗的地方生长。它可以生长在排水性良好地基质中。现有的袋鼠蕨主要采用的分株进行繁殖的方法，一棵袋鼠蕨一年只能繁殖出8～10棵，并需要大量的母本园，因其繁殖系数低，成本高，远不能满足市场的需要。组织培养法，它是一种利用植物细胞的全能性，离体培养植物组织小块，进行植物无性快繁的工厂化育苗技术，具体工艺是：选取袋鼠蕨幼嫩叶片，先诱导出愈伤组织，再分化出不定芽，再培育成可以移栽驯化的壮苗。一般情况下此过程需要12～24个月以上。而且需要较高的生产成本（包括培养基成本和培养条件耗费）等。所以现有的袋鼠蕨苗繁殖技术仍存在以下缺陷：繁殖速度较慢，组培繁殖出苗率低，成本较高。
技术实现思路
本专利技术所要解决的技术问题是克服现有技术的不足，提供一种繁殖速度快、成本低且出苗率高的袋鼠蕨种苗组培快繁方法。本专利技术所采用的技术方案是，该方法包括以下步骤：（1）芽的诱导与分化：挑取袋鼠蕨匍匐茎带芽点的茎段并进行无菌处理，将经过无菌处理的带芽点茎段切成若干截，每一截含有一个芽点，插入由0.2～1.0mg/L的BA、0.02～0.05mg/L的NAA和0.2～0.5mg/L的KT组成的1/2MS培养基中，培养温度为26～28度，光照2000～2500lux，光照时间每天12小时，培养6～8周后，芽点处分化出不定芽；（2）无菌苗的增殖培养：取分化出的不定芽，置于由0.1～0.8mg/L的BA和0.1～0.4mg/L的KT组成的MS培养基中，培养6～8周，不定芽长出一丛小苗，把长出的一丛小苗分成4～8株，继续置于由0.1～0.8mg/L的BA和0.1～0.4mg/L的KT组成的培养基中，继续将小苗分成4～8株，如此反复分切，获得数量巨大的植株，上述培养环境要求为：26～28度，光照3000lux，每天光照12小时；（3）无菌苗的移栽驯化：将经过步骤（2）处理的植株置于由0.3～1.0mg/L的IBA、3%的糖和2g/L的活性炭组成的MS培养基中，光照3500lux，培养六周后，无菌苗出现3～4条1.5～2.5cm的根，长成3～5cm的植株后进行移栽驯化，洗净所述无菌苗根部的培养基并移栽入泥炭土和沙石比例为5：1的基质内，保持温度为25～28度，光照3000～7000lux，移栽后的第一周用无纺布覆盖，控制湿度85～95%，保持叶表面水雾不干。进一步地，所述步骤（1）中，对袋鼠蕨匍匐茎带芽点的茎段进行无菌处理的步骤为：将带芽点的茎段先用75%的酒精处理8～12秒，再在0.1%的升汞溶液中浸泡8～12分钟取出，然后用无菌水冲洗4～5次。进一步地，所述步骤（1）中，挑取袋鼠蕨匍匐茎带芽点的茎段为幼嫩茎段。本专利技术的有益效果是：本专利技术采用含有BA（0.2～1.0）mg/L和NAA（0.02～0.05）mg/L和KT（0.2～0.5）mg/L的1/2MS培养基，可以有效促进袋鼠蕨芽点分化出不定芽；另外，本专利技术采用含有BA（0.1～0.8）mg/L、KT（0.1～0.4）mg/L的MS培养基作为增殖培养基，袋鼠蕨植株能旺盛分化出从芽；最后由含有IBA（0.3～1.0）mg/L、糖3%和活性炭2g/l组成的MS培养基中培养六周即可快速生根。本专利技术通过直接诱导出袋鼠蕨不定芽，不定芽又直接快速增殖减少了愈伤组织的诱导这一步骤，简化培养条件或培养方式等工艺，可以降低生产成本，提高商品化生产的效率和利润，因此本专利技术的袋鼠蕨苗的快繁方法繁殖速度快，成本低。具体实施方式本专利技术公开了一种袋鼠蕨种苗组培快繁方法。以下通过具体实施例对本专利技术方法作进一步的说明。（一）芽的诱导和分化（1）挑取袋鼠蕨匍匐茎带芽点的幼嫩茎段；（2）将所述带芽点幼嫩茎段先用75%的酒精处理8～12秒，再在0.1%的升汞溶液中浸泡8～12分钟取出，然后用无菌水冲洗4～5次；（3）取经升汞消毒后的带芽点幼嫩茎段，切成一截一截，每一截一个芽点，插入加有BA（0.2～1.0）mg/L和NAA（0.02～0.05）mg/L和KT（0.2～0.5）mg/L的1/2MS培养基中；（4）培养温度为26～28度，光照2000～2500lux，光照时间每天12小时，培养6～8周后，可见芽点处分化出不定芽。（二）无菌苗的增殖培养（1）取分化出的不定芽，置于BA（0.1～0.8）mg/L和KT（0.1～0.4）mg/L的MS培养基中，培养6～8周左右，不定芽可以很快长出一丛小苗。把一丛小苗分成4-8株，继续置于BA（0.1～0.8）mg/L和KT（0.1～0.4）mg/L的培养基中，每一丛苗又可以继续分成4～8株，如此反复分切，可以很快获得数量巨大的植株；（2）培养环境要求为：26～28度，光照3000lux，每天光照12小时。（三）无菌苗的移栽驯化（1）所述植株置于由IBA（0.3～1.0）mg/L、糖3%和活性炭2g/L组成的MS培养基中，光照3500lux，培养六周后，无菌苗有3～4条2cm左右的根，长成3～5cm的植株，可进行移栽驯化；（2）栽前3～4天打开瓶盖使无菌苗逐步适应外界条件；（3）洗净所述无菌苗根部培养基并移栽入泥炭土和沙石比例为5：1的基质内；（4）保持温度为25～28度，弱光条件（光照3000～7000lux），移栽后的第一周用无纺布覆盖，控制湿度85～95%，保持叶表面水雾不干。和现有的袋鼠蕨种苗组培方法相比，本专利技术采用含有BA（0.2～1.0）mg/L和NAA（0.02～0.05）mg/L和KT（0.2～0.5）mg/L的1/2MS培养基，可以有效促进袋鼠蕨芽点分化出不定芽；另外，本专利技术采用含有BA（0.1～0.8）mg/L、KT（0.1～0.4）mg/L的MS培养基作为增殖培养基，袋鼠蕨植株能旺盛分化出从芽；最后由含有IBA（0.3～1.0）mg/L、糖3%和活性炭2g/l组成的MS培养基中培养六周即可快速生根；本专利技术通过直接诱导出袋鼠蕨不定芽，不定芽又直接快速增殖减少了愈伤组织的诱导这一步骤，简化培养条件或培养方式等工艺，可以降低生产成本，提高商品化生产的效率和利润；此外，本专利技术的繁殖时间大大缩短，半年时间内即可培育出大量的袋鼠蕨种苗，且出苗率极高。本专利技术可应用于袋鼠蕨培育领域。本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种袋鼠蕨种苗组培快繁方法，其特征在于，该方法包括以下步骤：（1）芽的诱导与分化：挑取袋鼠蕨匍匐茎带芽点的茎段并进行无菌处理，将经过无菌处理的带芽点茎段切成若干截，每一截含有一个芽点，插入由0.2～1.0mg/L的BA、0.02～0.05mg/L的NAA和0.2～0.5mg/L的KT组成的 1/2MS培养基中，培养温度为26～28度，光照2000～2500lux，光照时间每天12小时，培养6～8周后，芽点处分化出不定芽；（2）无菌苗的增殖培养：取分化出的不定芽，置于由0.1～0.8mg/L的BA和0.1～0.4mg/L 的KT组成的MS培养基中，培养6～8周，不定芽长出一丛小苗，把长出的一丛小苗分成4～8株，继续置于由0.1～0.8mg/L的BA和0.1～0.4mg/L的KT组成的培养基中，继续将小苗分成4～8株，如此反复分切，获得数量巨大的植株，上述培养环境要求为：26～28度，光照3000lux，每天光照12小时；（3）无菌苗的移栽驯化：将经过步骤（2）处理的植株置于由0.3～1.0mg/L 的IBA、3%的糖和2g/L的活性炭组成的MS培养基中，光照3500lux，培养六周后，无菌苗出现3～4条1.5～2.5cm的根，长成3～5cm的植株后进行移栽驯化，洗净所述无菌苗根部的培养基并移栽入泥炭土和沙石比例为5：1的基质内，保持温度为25～28度，光照3000～7000lux，移栽后的第一周用无纺布覆盖，控制湿度85～95%，保持叶表面水雾不干。...

【技术特征摘要】
1.一种袋鼠蕨种苗组培快繁方法，其特征在于，该方法包括以下步骤：（1）芽的诱导与分化：挑取袋鼠蕨匍匐茎带芽点的茎段并进行无菌处理，将经过无菌处理的带芽点茎段切成若干截，每一截含有一个芽点，插入由0.2～1.0mg/L的BA、0.02～0.05mg/L的NAA和0.2～0.5mg/L的KT组成的1/2MS培养基中，培养温度为26～28度，光照2000～2500lux，光照时间每天12小时，培养6～8周后，芽点处分化出不定芽；（2）无菌苗的增殖培养：取分化出的不定芽，置于由0.1～0.8mg/L的BA和0.1～0.4mg/L的KT组成的MS培养基中，培养6～8周，不定芽长出一丛小苗，把长出的一丛小苗分成4～8株，继续置于由0.1～0.8mg/L的BA和0.1～0.4mg/L的KT组成的培养基中，继续将小苗分成4～8株，如此反复分切，获得数量巨大的植株，上述培养环境要求为：26～28度，光照3000lux，每天光...

【专利技术属性】
技术研发人员：徐红，姚慧芬，金剑平，
申请(专利权)人：珠海诺德生物科技有限公司，
类型：发明
国别省市：广东,44