一种抑制香石竹玻璃化的培养基及应用制造技术

本发明专利技术公开了一种抑制香石竹玻璃化的培养基及应用。抑制香石竹玻璃化的培养基含有间苯三酚4.5～5.5mg/L。应用包括：将香石竹无菌苗接种于所述的培养基上进行培养，培养条件为：光照强度2800～3000Lux，温度23～27℃，每日光照时间为16～18小时。本发明专利技术主要在以MS培养基为基础的条件下添加间苯三酚激素，如此使得香石竹在生长发育过程中，发生玻璃化现象的几率大大降低，降低到了3％以内。

A medium for inhibiting the vitrification of carnation and its application

The invention discloses a medium for inhibiting the vitrification of carnation and its application. The medium for inhibiting the vitrification of carnation contains 4.5 - 5.5mg/L of phthalphenol three. The application includes: inoculating the free seedling of carnation on the culture medium. The conditions of the culture are as follows: the light intensity is 2800 ~ 3000Lux, the temperature is 23~27, and the light time is 16~18 hours a day. The present invention is mainly based on the addition of benzene three phenol hormone on the basis of the MS medium, so that the probability of the occurrence of vitrification in the growth and development of carnation is greatly reduced to less than 3%.

【技术实现步骤摘要】
一种抑制香石竹玻璃化的培养基及应用
本专利技术涉及组织培养，尤其涉及一种抑制香石竹玻璃化的培养基及应用。
技术介绍
香石竹又名康乃馨，为石竹科石竹属多年宿根性草本植物，是目前世界上应用最普遍的花卉之一，也是中国、云南省最重要的出口花卉之一。香石竹以其花姿优美、花色艳丽、保鲜期长等特点为人们所喜爱。目前香石竹市场需求量很大，而常规的扦插繁殖和无性繁殖无法满足市场的需求。组织培养是在短期内大量快速繁殖苗木、满足市场需求的有效途径。在组培扩繁过程中，香石竹存在茎秆细弱、黄化、增殖力弱及玻璃化严重等现象，影响种苗的产量和质量，限制了其组培技术的应用。因此，克服香石竹组培苗增殖力弱和玻璃化的现象，对香石竹无病毒苗木的快速繁殖和推广具有重要的意义。目前很多科学工作者在研究控制植物玻璃化现象中做了大量试验，在香石竹茎尖培养上一般是采用去除细胞分裂素、增加琼脂浓度、降低培养基中大量元素、降低温度、增加光照等手段来克服植物的玻璃化现象。目前这些克服香石竹玻璃化的方法可以在一定程度上降低香石竹组培苗的玻璃化发生率。但对香石竹红色品种作用不大，对其他色系品种作用也不明显，而对香石竹茎尖脱毒苗的玻璃化现象无明显作用。
技术实现思路
专利技术目的：为解决香石竹组培在生长繁育过程中的玻璃化现象，本专利技术提供了一种抑制香石竹玻璃化的培养基。技术方案：本专利技术所述的抑制香石竹玻璃化的培养基，含有间苯三酚。优选的，间苯三酚的浓度为4.5～5.5mg/L。进一步优选的，间苯三酚的浓度为5.0mg/L。具体的，所述的抑制香石竹玻璃化的培养基，组成为：基础培养基+间苯三酚+7～9g/L琼脂+30～35g/L蔗糖。优选的，所述的基础培养基为MS培养基。本专利技术还提供了所述的抑制香石竹玻璃化的培养基在香石竹组织培养中的应用。所述的应用，包括：将香石竹无菌苗接种于所述的培养基上进行培养，培养条件为：光照强度2800～3000Lux，温度23～27℃，每日光照时间为16～18小时。所述香石竹为红色品种“马斯特”。与现有技术相比，本专利技术的有益效果为：本专利技术主要在以MS培养基为基础的条件下添加间苯三酚激素，如此使得香石竹在生长发育过程中，发生玻璃化现象的几率大大降低，降低到了5％以内，40天后继代倍数可达5倍。具体实施方式下面结合具体实施例，进一步阐明本专利技术，应理解这些实施例仅用于说明本专利技术而不用于限制本专利技术的范围，在阅读了本专利技术之后，本领域技术人员对本专利技术的各种等价形式的修改均落于本申请所附权利要求所限定的范围。实施例11、培养基的配方为：MS培养基+4.5mg/L间苯三酚+7g/L琼脂+30g/L糖，该培养基的ph为5.7。每升培养基里有：大量元素：1900mg硝酸钾，1650mg硝酸铵，370mg七水合硫酸镁，170mg磷酸二氢钾，440mg二水合氯化钙；铁盐：37.3mg乙二胺四乙酸二钠，27.8mg七水合硫酸亚铁；微量元素：22.3mg四水合硫酸锰，8.6mg七水合硫酸锌，6.2mg硼酸，0.83mg碘化钾，0.25mg七水合钼酸钠，0.025mg五水合硫酸铜，0.025mg六水合氯化钴；有机元素：2mg甘氨酸，0.5mg维生素B6，0.1mg维生素B1，0.5mg烟酸，100mg肌醇激素：4.5mg间苯三酚；其他：7g琼脂，30g蔗糖。2、培养基的配制方法包括：(1)配制MS培养基：(11)50倍大量元素母液的配制：分别称取82.5g硝酸铵、95g硝酸钾、18.5g七水合硫酸镁，然后用蒸馏水溶解后定容至1000ml，配成母液Ⅰ；称取22g二水氯化钙，用蒸馏水溶解后定容至1000ml，配成母液Ⅱ；称取8.5g磷酸二氢钾，用蒸馏水溶解后定容至1000ml，配成母液Ⅲ；使用时配制每升培养基取母液Ⅰ，母液Ⅱ，母液Ⅲ各20ml；(12)100倍的微量元素母液的配制：称取2.23g硫酸锰，0.86g硫酸锌，0.0025g硫酸铜，0.025g钼酸钠，0.62g硼酸，0.0025g氯化钴，0.083g碘化钾用蒸馏水溶解后定容至1000ml，配成母液Ⅳ，使用时配制每升培养基取10ml母液Ⅳ；(13)100倍的EDTA-铁盐母液的配制：称取1.865g乙二胺四乙酸二钠，加200ml蒸馏水进行溶解，再称取1.39g硫酸亚铁加入溶解，溶解时需要用电热炉加热，当溶液呈浅棕色透明液体时，停止加热，加蒸馏水定容至1000mL，配成母液Ⅴ，使用时配制每升培养基取10ml母液Ⅴ；(14)100倍的有机成分母液的配制：称取0.05g烟酸，0.01g盐酸硫胺素，0.05g盐酸吡哆醇，10g肌醇，0.2g甘氨酸，用蒸馏水溶解后混合定容至1000ml，配成母液Ⅵ，使用时配制每升培养基取10ml母液Ⅵ；(2)激素母液的配制：称取50mg间苯三酚，先用5ml体积浓度95％的酒精溶解，然后加水定容至50ml，配成1mg·mL-1的间苯三酚母液，使用时配制每升培养基取4.5mL间苯三酚母液；(3)按上述步骤(11)至步骤(14)中配制每升培养基的用量加入后，再加入琼脂7g，蔗糖30g，间苯三酚母液4.5ml，加热溶解后定容至1L，用0.lmol·L-1盐酸或氢氧化钠调pH值至5.7，再分装培养基，灭菌。3、将香石竹无菌苗(品种为“马斯特”，无菌苗由江苏农林职业技术学院组培中心提供)在超净台上接种至配制好的灭菌的培养基上，在光照强度3000Lux的条件下培养，培养条件为：温度23-27℃，每日光照时间为16小时。40天后计算香石竹的玻璃化率为5％，继代倍数(增殖倍数)可达5倍。使用该培养基，基本可完全改善香石竹玻璃化现象，大大提高香石竹的产量和质量。实施例21、培养基配方为MS培养基+5mg/L间苯三酚+7g/L琼脂+30g/L糖，该培养基的ph为5.7。每升培养基里有：大量元素：1900mg硝酸钾，1650mg硝酸铵，370mg七水合硫酸镁，170mg磷酸二氢钾，440mg二水合氯化钙；铁盐：37.3mg乙二胺四乙酸二钠，27.8mg七水合硫酸亚铁；微量元素：22.3mg四水合硫酸锰，8.6mg七水合硫酸锌，6.2mg硼酸，0.83mg碘化钾，0.25mg七水合钼酸钠，0.025mg五水合硫酸铜，0.025mg六水合氯化钴；有机元素：2mg甘氨酸，0.5mg维生素B6，0.1mg维生素B1，0.5mg烟酸，100mg肌醇；激素：5mg间苯三酚；其他：7g琼脂，30g蔗糖。2、培养基的配制方法包括：(1)配制改良MS培养基：(11)50倍大量元素母液的配制：分别称取82.5g硝酸铵、95g硝酸钾、18.5g七水合硫酸镁，然后用蒸馏水溶解后定容至1000ml，配成母液Ⅰ；称取22g二水氯化钙，用蒸馏水溶解后定容至1000ml，配成母液Ⅱ；称取8.5g磷酸二氢钾，用蒸馏水溶解后定容至1000ml，配成母液Ⅲ；使用时配制每升培养基取母液Ⅰ，母液Ⅱ，母液Ⅲ各20ml；(12)100倍的微量元素母液的配制：称取2.23g硫酸锰，0.86g硫酸锌，0.0025g硫酸铜，0.025g钼酸钠，0.62g硼酸，0.0025g氯化钴，0.083g碘化钾用蒸馏水溶解后定容至1000ml，配成母液Ⅳ，使用时配制每升培养基取10ml母液Ⅳ；(13)100倍的EDTA-铁盐母液的配制：称取1.865g乙二胺四乙酸二钠，加2本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种抑制香石竹玻璃化的培养基，其特征在于，含有间苯三酚。

【技术特征摘要】
1.一种抑制香石竹玻璃化的培养基，其特征在于，含有间苯三酚。2.根据权利要求1所述的抑制香石竹玻璃化的培养基，其特征在于，间苯三酚的浓度为4.5～5.5mg/L。3.根据权利要求1所述的抑制香石竹玻璃化的培养基，其特征在于，间苯三酚的浓度为4.9～5.1mg/L。4.根据权利要求1所述的抑制香石竹玻璃化的培养基，其特征在于，组成为：基础培养基+间苯三酚+7～9g/L琼脂+30～35g/L蔗糖。5.根据权利要求...

【专利技术属性】
技术研发人员：许建民，颜志明，李大为，仇学文，
申请(专利权)人：江苏农林职业技术学院，
类型：发明
国别省市：江苏,32