一种碳纳米管复合物修饰的电容电阻型免疫试纸条制造技术

本实用新型专利技术涉及免疫层析检测分析领域，具体涉及一种碳纳米管复合物修饰的电容电阻型免疫试纸条，试纸条包括依次黏贴在硝酸纤维素膜上的样品垫、抗体吸附垫和吸水垫，所述抗体吸附垫和吸水垫之间的硝酸纤维素膜上至少修饰有2条基于碳纳米管‑粘结剂复合物的反应线形成的反应区，各反应线两端均设有石墨电极接脚，石墨电极接脚与外接信号增益电路的信号输入端相连以测定试纸条的电容或者电阻值。利用抗原‑抗体复合物形成后增加检测线的电容或电阻值，从而可以利用外接电路形成信号放大，增强检测的灵敏度。本实用新型专利技术装置提供了一种新型的免疫试纸条构造和检测方式，拓展了免疫层析检测作为POCT平台的应用前景。

【技术实现步骤摘要】
一种碳纳米管复合物修饰的电容电阻型免疫试纸条
本技术涉及免疫层析检测分析领域，具体涉及一种碳纳米管复合物修饰的电容电阻型免疫试纸条。
技术介绍
现场快速检测（PointOfCareTesting,POCT）是体外诊断（IVD）的一个新兴细分行业，指在病人身旁进行的临床检测，通常不一定是临床检验师来进行。是在采样现场即刻进行分析，省去标本在实验室检验师的复杂处理程序，快速得到检验结果的一种新方法。POCT以“患者为中心”，是实现对病人个性化服务的最佳载体。其凭借简单、快捷和低成本等优势，在临床获得广泛应用，是IVD行业重要的发展方向和增长最快的领域。目前主流的POCT技术包括有生物传感器、生物芯片、免疫试纸条等。近年基于金纳米标记、荧光量子点标记技术开发的免疫层析试纸快检技术是免疫层析领域的主流技术，检测项目主要集中在快速血凝检测、心脏标志物快速诊断、肝肾功能检测、肿瘤的早期诊断项目的检测等。除了在临床诊断应用之外，免疫层析试纸快检技术还可应用于食品安全分析、环境样本分析等领域，展示出其宽广的应用前景。目前主流实验室免疫层析检测的主要方式是以封装好的试纸条为测试基础，利用试纸条带上免疫反应产生的光学信号获得信号值。当前主流的POCT试纸条采用的检测方案有基于可见光区的直读显色的金标免疫试纸条、基于荧光标记物及时间分辨荧光标记物的荧光免疫试纸条等。这些都是通过光学信号得到相应的检测数据，从而对目标化合物进行分析和定性。近年，基于电化学检测方案的便携性试纸条不断有新的产品问世，针对血糖、早期肿瘤标志物等指标发展出了多种电化学检测装置或试纸条带。主要的检测装置有微流控、叉指电极等。通过在基材上印刷或者喷涂工作电极、参比电极以及对电极可形成电回路，利用电信号检测可以有效利用电信号可实现增益的优势，在部分领域对底物实现了高灵敏度的检测。但这些电化学检测免疫试纸条构造过于复杂，电极信号受到样品中干扰物质影响较大，存在着结果不准确、测定不精准的问题。
技术实现思路
本技术的目的是力图解决上述现有电化学免疫试纸条技术的不足，提供一种新型电化学免疫层析检测试纸条和电容电阻信号检测方案。该电化学试纸条与接口的便携式电化学仪器配套可以实现以下功能，样品上样后测量各反应区的电容电阻值，排除样品中的非特异性干扰。本技术是通过以下技术方案实现的：一种碳纳米管复合物修饰的电容电阻型免疫试纸条，包括依次黏贴在硝酸纤维素膜上的样品垫、抗体吸附垫和吸水垫，抗体吸附垫内吸附有内标抗体，所述抗体吸附垫和吸水垫之间的硝酸纤维素膜上至少修饰有2条基于碳纳米管-粘结剂复合物的反应线形成的反应区，各反应线两端均设有石墨电极接脚，接脚有齿可以与反应区各反应线形成咬合，该接头与反应区碳纳米管打印层不会形成相间电位。石墨电极接脚与外接信号增益电路的信号输入端相连以测定试纸条的电容或者电阻值，利用抗原-抗体复合物形成后增加检测线的电容或电阻值，从而可以利用外接电路形成信号放大，增强检测的灵敏度。优选地，所述反应区有3条基于碳纳米管-粘结剂复合物的反应线。优选地，所述2条基于碳纳米管-粘结剂复合物的反应线分别为空白线与测定线，所述空白线吸附有无抗体或抗原修饰的碳纳米管-粘结剂复合物，测定线吸附有捕捉目标待测物的抗体或抗原修饰的碳纳米管-粘结剂复合物。优选地，所述3条基于碳纳米管-粘结剂复合物的反应线分别为空白线、测定线与质控线，所述空白线吸附有无抗体或抗原修饰的碳纳米管-粘结剂复合物，测定线吸附有捕捉目标待测物的抗体或抗原修饰的碳纳米管-粘结剂复合物，质控线吸附有捕捉多余内标抗体的抗抗体修饰的碳纳米管-粘结剂复合物。优选地，所述反应区背面设有一层由疏水性材料构成的疏水层。可以进一步保护碳纳米管-复合物反应区的稳定性，同时迫使流动在硝酸纤维素膜上的待测样品液体只能通过反应区，避免检测灵敏度下降。优选地，所述硝酸纤维素膜的背面设有一绝缘层。优选地，所述碳纳米管为经羧基化改性的多壁碳纳米管。优选地，所述粘结剂为羟乙基纤维素、羟甲基纤维素、壳聚糖、聚乙二醇中的一种或者两种的复合物。优选地，所述疏水性材料为三甲基氯硅烷、六甲基二硅氮烷、叔丁基二甲基氯硅烷、三异丙基氯硅烷中的任一种。优选地，所述硝酸纤维素膜的长度为5~10cm，宽度为2~5cm。优选地，所述各反应线的宽度为1~5mm，间距为1~2cm。一种所述的碳纳米管复合物修饰的电容电阻型免疫试纸条的制备方法，包括以下步骤：（1）将样品垫、抗体吸附垫和吸水垫依次黏贴在硝酸纤维素膜上；（2）配制无抗体或抗原修饰的碳纳米管-粘结剂复合物打印液、捕捉目标待测物的抗体或抗原修饰的碳纳米管-粘结剂复合物打印液、捕捉多余内标抗体的抗抗体修饰的碳纳米管-粘结剂复合物打印液；（3）将步骤（2）中各种碳纳米管-粘结剂复合物打印液，通过喷涂分别打印在抗体吸附垫和吸水垫之间的硝酸纤维素膜上形成反应线构成反应区；（4）将石墨电极接脚分别紧密咬合连接在步骤（3）形成的反应线两端；（5）将疏水性材料溶解在有机溶剂中，打印在反应区的背面形成疏水层；（6）在硝酸纤维素膜背面再设置一绝缘层。优选地，步骤（2）所述各打印液的质量浓度为0.5~5%，体积为5~100微升。优选地，步骤（2）所述碳纳米管-粘结剂复合物打印液为含碳纳米管0.5~5.0wt%、粘结剂1~10wt%的pH在5.0~7.4缓冲液中混配的分散液。优选地，步骤（5）所述有机溶剂为甲苯，疏水性材料溶解在有机溶剂中形成的打印液的质量浓度为5~10%、体积为5~100微升。优选地，步骤（2）所述各打印液应进入基材硝酸纤维素膜0.2~0.5mm，步骤（5）所述疏水材料应打印进入基材硝酸纤维素膜0.5~1mm形成疏水层。本技术的有益效果在于：（1）免疫试纸条电化学集成度高，三组接头盒接脚准确的保证了试纸条各反应区信号值获得，且与其他电化学免疫试纸条相比，构造简单，不需要在膜上设置有关电极组件，避免了通过设置多组印刷电极构成试纸条的复杂性，且有利于后期工业化大规模的生产。有效实现了检测装置微型化和便携化。（2）以碳纳米管复合物浸润的膜相反应区可以有效的保证纳米材料上固定的抗原或者抗体与样品溶液中的抗体或者抗原结合，形成的免疫复合物有效的阻断碳纳米管导电性，可以通过外接电路准确获得相应的电容或者电阻信号。（3）采用依次开启各反应区的电流回路，有效避免了同时开启时电流信号的互相干扰。（4）由于采用外接信号增益电流回路，本技术免疫检测可以比常规胶体金试纸条灵敏度高出1-3个数量级。本技术装置提供了一种新型基于碳纳米管复合物修饰的电化学免疫试纸条，是一种便携的POCT检测方式，拓展了免疫层析检测作为POCT平台的应用前景。与目前实验室所采用的装置相比具有体积小、操作简单、集成化程度高、便于携带等优点，可推广应用于体检中心、自我检测、家庭医疗以及食品安全快速检测等领域。附图说明图1为本技术的免疫试纸条构造整体结构示意图。图2为本技术免疫试纸条侧面设计示意图。图3为本技术混配的抗体修饰的碳纳米管-粘结剂复合物透射电镜图。图4为本技术免疫试纸条放入电路基座电路示意图。附图标记：1-硝酸纤维素膜，2-样品垫，3-抗体吸附垫，4-吸水垫，5-空白线，6-测定线，7本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种碳纳米管复合物修饰的电容电阻型免疫试纸条，其特征在于：包括依次黏贴在硝酸纤维素膜上的样品垫、抗体吸附垫和吸水垫，抗体吸附垫内吸附有内标抗体，所述抗体吸附垫和吸水垫之间的硝酸纤维素膜上至少修饰有2条基于碳纳米管‑粘结剂复合物的反应线形成的反应区，各反应线两端均设有石墨电极接脚，石墨电极接脚与外接信号增益电路的信号输入端相连。

【技术特征摘要】
1.一种碳纳米管复合物修饰的电容电阻型免疫试纸条，其特征在于：包括依次黏贴在硝酸纤维素膜上的样品垫、抗体吸附垫和吸水垫，抗体吸附垫内吸附有内标抗体，所述抗体吸附垫和吸水垫之间的硝酸纤维素膜上至少修饰有2条基于碳纳米管-粘结剂复合物的反应线形成的反应区，各反应线两端均设有石墨电极接脚，石墨电极接脚与外接信号增益电路的信号输入端相连。2.根据权利要求1所述的一种碳纳米管复合物修饰的电容电阻型免疫试纸条，其特征在于：所述反应区有3条基于碳纳米管-粘结剂复合物的反应线。3.根据权利要求1所述的一种碳纳米管复合物修饰的电容电阻型免疫试纸条，其特征在于：所述2条基于碳纳米管-粘结剂复合物的反应线分别为空白线与测定线，所述空白线吸附有无抗体或抗原修饰的碳纳米管-粘结剂复合物，测定线吸附有捕捉目标待测物的抗体或抗原修饰的碳纳米管-粘结剂复合物。4.根据权利要求2所述的一种碳纳米管复合物修饰的电容电阻型免疫试纸条，其特征在于：所述3条基于碳纳米管-粘结剂复合物的反应线分别为空白线、测定线与质控线，所述空白线吸附有无抗体或...

【专利技术属性】
技术研发人员：张宜明，刘峰，谢龙生，
申请(专利权)人：必欧瀚生物技术合肥有限公司，
类型：新型
国别省市：安徽,34