一种适用于少细胞的染色质免疫共沉淀测序方法及其试剂盒和应用技术

本发明专利技术公开了一种适用于少细胞的染色质免疫共沉淀测序方法，包括以下步骤：步骤一：染色质预清除；步骤二：对预清除后的染色质进行免疫共沉淀，然后加入转座体系进行转座反应；步骤三：用AMPure beads对已转座的DNA进行纯化；步骤四：文库扩增；步骤五：文库大小选择；其中，步骤二中还包括标签片段化方法。本发明专利技术的目的是提出一种适用于少细胞的染色质免疫共沉淀测序方法及其试剂盒和应用，通过对ChIP‑seq方法的改进，能有效对少细胞进行组蛋白修饰进行检测，其结果与大量细胞的检测的结果完全一致。

【技术实现步骤摘要】
一种适用于少细胞的染色质免疫共沉淀测序方法及其试剂盒和应用
本专利技术涉及生物
，尤其涉及一种适用于少细胞的染色质免疫共沉淀测序方法及其试剂盒和应用。
技术介绍
组蛋白是染色体基本结构--核小体中的重要组成部分，其多种氨基酸残基可发生乙酰化(acetylation)、甲基化(methylation)、磷酸化(phosphorylation)、泛素化(ubiquitylation)等多种共价修饰作用。最新的研究表明，组蛋白氨基酸残基上还可以发生如巴豆酰化(crotonylation)、丙酰化(propionylation)、丁酰化(butyrylation)、2-羟基异丁基酰化(2-ohi-butyrylation)、琥珀酰化(succinylation)等全新的修饰类型，从而大大拓展了对组蛋白修饰的认识。组蛋白修饰可通过影响组蛋白与DNA双链的亲和性，从而改变染色质的疏松或凝集状态，或通过影响其它转录因子与结构基因启动子的亲和性来发挥基因调控作用。组蛋白修饰对基因表达的调控有类似DNA遗传密码的调控作用，是表观遗传学研究的核心内容之一。因此，组蛋白修饰又称为“组蛋白密码”或“表本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种适用于少细胞的染色质免疫共沉淀测序方法，其特征在于包括以下步骤：步骤一：染色质预清除；步骤二：对预清除后的染色质进行免疫共沉淀，然后加入转座体系进行转座反应；步骤三：用AMPure beads对已转座的DNA进行纯化；步骤四：文库扩增；步骤五：文库大小选择；其中，步骤二中还包括标签片段化方法。

【技术特征摘要】
1.一种适用于少细胞的染色质免疫共沉淀测序方法，其特征在于包括以下步骤：步骤一：染色质预清除；步骤二：对预清除后的染色质进行免疫共沉淀，然后加入转座体系进行转座反应；步骤三：用AMPurebeads对已转座的DNA进行纯化；步骤四：文库扩增；步骤五：文库大小选择；其中，步骤二中还包括标签片段化方法。2.根据权利要求1所述的一种适用于少细胞的染色质免疫共沉淀测序方法，其特征在于：所述标签片段化方法具体为在PCR仪中37℃孵育20分钟。3.根据权利要求1所述的一种适用于少细胞的染色质免疫共沉淀测序方法，其特征在于：所述步骤三具体为向已转座的DNA中加入终浓度为0.65×的AMpu...

【专利技术属性】
技术研发人员：冯宇亮，姜昊，陈海洋，郑晓斌，
申请(专利权)人：苏州睿迈英基因检测科技有限公司，
类型：发明
国别省市：江苏,32