用于降低血浆来源免疫球蛋白组合物的血栓栓塞可能性的方法技术

本发明专利技术提供通过使用阳离子交换色谱来降低免疫球蛋白组合物的酰胺分解和抗补体活性(ACA)含量的方法。在一个特定实施方案中，本发明专利技术提供通过收集阳离子交换洗脱液的前导部分来降低免疫球蛋白组合物的因子XI和/或因子XIa和/或ACA含量的方法。本发明专利技术还提供免疫球蛋白组合物，其具有降低的酰胺分解活性水平、因子XI和/或因子XIa和/或ACA含量。

Method for reducing thromboembolic potential of plasma derived immunoglobulin composition

The present invention provides a method for reducing the amide decomposition and anti complement activity (ACA) content of immunoglobulin compositions by using cation exchange chromatography. In a specific implementation, the present invention provides a method for reducing the factor XI and / or factor XIa and / or ACA content of the immunoglobulin composition by collecting the preamble part of the cation exchange eluent. The invention also provides an immunoglobulin composition which has a reduced activity of amide decomposition, factors XI and / or factor XIa and / or ACA content.

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】用于降低血浆来源免疫球蛋白组合物的血栓栓塞可能性的方法相关申请的交叉引用本申请要求2011年8月26日提交的美国临时申请第61/527,974号的权益，所述美国临时申请的内容以全文引用的方式明确并入本文中以用于所有目的。专利技术背景血浆来源血液产品不仅用于治疗多种血液病症，而且用于治疗其它根源的疾病。举例来说，1952年首次使用来源于人血浆的免疫球蛋白(IgG)产品来治疗免疫缺陷症。从那时起，IgG制剂被广泛用于至少三类主要的医学病状中：(1)免疫缺陷症，如X连锁无丙种球蛋白血症(X-linkedagammaglobulinemia)、低丙种球蛋白血症(原发性免疫缺陷症)以及后天性免疫功能降低病状(继发性免疫缺陷症)、特征性低抗体含量；(2)炎症和自身免疫疾病；以及(3)急性感染。在制备和配制血浆来源生物疗法时，必须考虑各种安全预防措施。这些预防措施包括去除和/或失活血液传播病原体(例如病毒性和细菌性病原体)、抗补体活性以及因使用捐赠血浆所产生的其它非所需污染物的方法。研究已指出，施用酰胺分解活性水平高的药物可能导致非所需的血栓栓塞事件(WolbergAS等,CoagulationfactorXIisacontaminantinintravenousimmunoglobulinpreparations.AmJHematol2000;65:30-34；和AlvingBM等,Contact-activatedfactors:contaminantsofimmunoglobulinpreparationswithcoagulantandvasoactiveproperties.JLabClinMed1980;96:334-346；所述文献的公开内容以全文引用的方式并入本文中用于所有目的)。血栓栓塞事件报导增加后，(Octapharma)在美国自愿退市并且欧洲委员会中止和Octagam10%的行销授权，这都着重表明了这个担忧。已提出的是，血栓栓塞事件的增加归结于生物体内高水平的酰胺分解活性，这是由丝氨酸蛋白酶和丝氨酸蛋白酶酶原杂质造成，如因子XI、因子XIa、因子XII以及因子XIIa(FDA通告：自愿退市-2010年9月23日，Octagam[静脉内免疫球蛋白(人)]的5%液体制剂；Octagam50mg/ml灌注溶液，OctapharmaFrance-Miseenquarantainedetousleslots，2010年9月9日AFSSAPS线上公布；和欧洲药品管理局(EuropeanMedicinesAgency)在2010年9月23日线上公布的关于中止Octagam(5%和10%人正常免疫球蛋白)的行销授权的问答)。EDQM(EuropeanDirectorateontheQualityofMedicines&HealthCare(欧洲药品质量和健康保障局))公布了一篇关于静脉内施用(0918)人正常免疫球蛋白的专论修订版，以便在2012年1月1日进行快速实施，从而解决免疫球蛋白产品的潜在促凝血活性。修订版阐明“制备方法还包括显示可除去血栓生成剂的一个或多个步骤。重点是鉴别活化凝血因子和其酶原以及可能引起其活化的工艺步骤。还应关注可由制造工艺引入的其它促凝血剂。”2011年3月18日，Swissmedic报道称：FDA已注意到血栓栓塞不利事件与众多Vivaglobin产品有关。由CSL制造的Vivaglobin(160mg/mL人正常免疫球蛋白皮下注射溶液)已获准为用于患有原发性免疫缺陷综合征、骨髓瘤或慢性淋巴性白血病的成人与儿童的替代疗法。血栓栓塞不利事件的风险直到这次的这种施用途径才得以认识。调查揭示，至少一些批次中存在促凝血活性。结果，Vivaglobin退出市场并且被新产品Hizentra(20%人正常免疫球蛋白皮下注射溶液)替代。由于关于Vivaglobin的不利事件的报道，因此现在要求皮下施用的免疫球蛋白产品具有低水平的促凝血活性，类似于对于静脉内免疫球蛋白产品的要求。总称为凝血因子的专门丝氨酸蛋白酶为凝血级联的接触活化与组织因子途径的整体组分。刺激凝血途径之后，作为失活酶前体的丝氨酸蛋白酶酶原变成催化下一个蛋白酶酶原活化的活化蛋白酶，从而产生活化级联。这种凝血级联使凝血酶(因子IIa)和因子XIIIa的活化达到顶点，所述凝血酶和因子XIIIa的作用分别是使纤维蛋白原(因子I)转变成纤维蛋白(因子Ia)和与纤维蛋白交联形成纤维蛋白凝块。接触活化途径(又称为固有凝血途径)始于激肽释放酶和因子XIIa(FXIIa)分别从前激肽释放酶和因子XII的活化。活化丝氨酸蛋白酶FXIIa使因子XI(FXI)分解，从而使酶原转变成因子XIa(FXIa)，所述因子XIa为一种参与因子Xa(FXa)的后续活化丝氨酸蛋白酶。由于越来越多地担心血浆来源蛋白质组合物中存在丝氨酸蛋白酶和丝氨酸蛋白酶酶原，因此，本领域中仍需要降低免疫球蛋白制剂中这些污染物(尤其是FXI及FXIa)的含量的方法。专利技术简述本专利技术在各个方面中提供用于降低IgG免疫球蛋白组合物的酰胺分解性含量(例如FXI和/或FXIa)的方法，和酰胺分解活性水平(例如FXI和/或FXIa)低于市面上可获得的相当组合物的IgG免疫球蛋白组合物。在第一方面中，本专利技术提供用于降低血浆来源免疫球蛋白组合物中的因子XI(FXI)和/或因子XIa(FXIa)含量的方法，所述方法包括以下步骤：(a)提供包含IgG免疫球蛋白和FXI和/或FXIa的血浆来源免疫球蛋白组合物；(b)使所述血浆来源免疫球蛋白组合物与安置在色谱柱中的阳离子交换树脂在包括pH不超过6.0并且电导率不超过11mS/cm的第一溶液条件下接触，以便使IgG免疫球蛋白和至少一部分FXI和/或FXIa与所述阳离子交换树脂结合；(c)通过使所述阳离子交换树脂与包括pH为至少7.5并且电导率为至少15mS/cm的洗脱缓冲液接触来形成包含前导部分和滞后部分的洗脱液从而使IgG免疫球蛋白从阳离子交换树脂中洗脱；以及(d)分别收集所述洗脱液的所述前导部分和所述洗脱液的所述滞后部分，其中所述洗脱液的所述前导部分占所述洗脱液的不超过80%。在上文提供的方法的一个实施方案中，洗脱缓冲液包括至少20mS/cm的电导率。在上文提供的方法的另一个实施方案中，洗脱缓冲液包括至少22mS/cm的电导率。在上文提供的方法的另一个实施方案中，洗脱缓冲液包括至少25mS/cm的电导率。在上文提供的方法的一个实施方案中，所述方法在步骤(c)中使所述免疫球蛋白从所述阳离子交换树脂洗脱之前进一步包括以下步骤：用pH不超过6.0和电导率小于11mS/cm的洗涤缓冲液洗涤结合有所述免疫球蛋白和FXI和/或FXIa的所述阳离子交换树脂。在上文提供的方法的一个实施方案中，所述阳离子交换树脂为弱阳离子交换树脂。在上文提供的方法的一个特定实施方案中，所述弱阳离子交换树脂为羧甲基阳离子交换树脂。在上文提供的方法的一个实施方案中，洗脱缓冲液的pH介于7.5与8.5之间。在上文提供的方法的另一个实施方案中，洗脱缓冲液的pH为8.0±0.2。在上文提供的方法的一个实施方案中，洗脱缓冲液包含介于200mM与300mM之间的氯化钠。在上文提供的方法本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种用于降低包含IgG免疫球蛋白的血浆洗脱份中的因子XI(FXI)和/或因子XIa(FXIa)含量的单步洗脱方法，所述方法包括以下步骤：(a)提供包含IgG免疫球蛋白和杂质FXI和/或杂质FXIa的包含IgG免疫球蛋白的血浆洗脱份；(b)使所述包含IgG免疫球蛋白的血浆洗脱份与安置在色谱柱中的弱阳离子交换树脂在包括pH不超过6.0并且电导率不超过11mS/cm的第一溶液条件下接触，以便使所述IgG免疫球蛋白与FXI和/或FXIa的至少一部分与所述弱阳离子交换树脂结合；(c)通过使所述弱阳离子交换树脂与包括pH为至少7.5并且电导率为至少15mS/cm的洗脱缓冲液接触来形成包含前导部分和滞后部分的洗脱液从而使所述IgG免疫球蛋白从所述弱阳离子交换树脂洗脱；以及(d)通过收集pH不超过6.0的洗脱液作为前导部分和pH超过6.0的洗脱液作为滞后部分来分别收集所述洗脱液的所述前导部分和所述洗脱液的所述滞后部分，其中所述洗脱液的所述前导部分占所述洗脱液的不超过80％，所述洗脱缓冲液包含介于200mM与300mM之间的氯化钠；所述洗脱液的前导部分包含酰胺分解活性的量低于起始组合物的IgG免疫球蛋白组合物，并且所述洗脱液的滞后部分含有高于所述洗脱液的前导部分的酰胺分解活性的浓度。...

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】2011.08.26 US 61/527,9741.一种用于降低包含IgG免疫球蛋白的血浆洗脱份中的因子XI(FXI)和/或因子XIa(FXIa)含量的单步洗脱方法，所述方法包括以下步骤：(a)提供包含IgG免疫球蛋白和杂质FXI和/或杂质FXIa的包含IgG免疫球蛋白的血浆洗脱份；(b)使所述包含IgG免疫球蛋白的血浆洗脱份与安置在色谱柱中的弱阳离子交换树脂在包括pH不超过6.0并且电导率不超过11mS/cm的第一溶液条件下接触，以便使所述IgG免疫球蛋白与FXI和/或FXIa的至少一部分与所述弱阳离子交换树脂结合；(c)通过使所述弱阳离子交换树脂与包括pH为至少7.5并且电导率为至少15mS/cm的洗脱缓冲液接触来形成包含前导部分和滞后部分的洗脱液从而使所述IgG免疫球蛋白从所述弱阳离子交换树脂洗脱；以及(d)通过收集pH不超过6.0的洗脱液作为前导部分和pH超过6.0的洗脱液作为滞后部分来分别收集所述洗脱液的所述前导部分和所述洗脱液的所述滞后部分，其中所述洗脱液的所述前导部分占所述洗脱液的不超过80％，所述洗脱缓冲液包含介于200mM与300mM之间的氯化钠；所述洗脱液的前导部分包含酰胺分解活性的量低于起始组合物的IgG免疫球蛋白组合物，并且所述洗脱液的滞后部分含有高于所述洗脱液的前导部分的酰胺分解活性的浓度。2.如权利要求1所述的方法，其中所述洗脱缓冲液包括至少20mS/cm的电导率。3.如权利要求1或2所述的方法，其中所述洗脱缓冲液包括至少25mS/cm的电导率。4.如权利要求1或2所述的方法，所述方法在步骤(c)中使所述免疫球蛋白从所述弱阳离子交换树脂洗脱之前进一步包括以下步骤：用包括pH不超过6.0并且电导率小于11mS/cm的洗涤缓冲液洗涤结合有所述免疫球蛋白和FXI和/或FXIa的所述弱阳离子交换树脂。5.如权利要求1或2所述的方法，其中所述弱阳离子交换树脂为羧甲基阳离子交换树脂。6.如权利要求1或2所述的方法，其中所述洗脱缓冲液包括介于7.5与8.5之间的pH。7.如权利要求6所述的方法，其中所述洗脱缓冲液包括8.0±0.2的pH。8.如权利要求1或2所述的方法，其中所述洗脱缓冲液包含介于240mM与260mM之间的氯化钠。9.如权利要求1或2所述的方法，其中所述洗脱缓冲液包含介于100mM与300mM之间的甘氨酸。10.如权利要求9所述的方法，其中所述洗脱缓冲液包含介于175mM与225mM之间的甘氨酸。11.如权利要求1或2所述的方法，其中所述洗脱液的前导部分由不超过70％的所述洗脱液组成。12.如权利要求1或2所述的方法，其中所述分别收集所述洗脱液的所述前导部分和所述洗脱液的所述滞后部分的步骤包括分别收集pH不超过5.5的洗脱液和pH超过5.5的洗脱液。13.如权利要求1或2所述的方法，其中所述分别收集所述洗脱液的所述前导部分和所述洗脱液的所述滞后部分的步骤包括分别收集pH不超过5.0的洗脱液和pH超过5.0的洗脱液。14.如权利要求4所述的方法，其中所述洗涤缓冲液包括介于5.0与6.0之间的pH。15.如权利要求14所述的方法，其中所述洗涤缓冲液包括5.5±0.2的pH。16.如权利要求1所述的方法，其中在步骤(b)中与所述弱阳离子交换树脂结合的所述FXI和/或FXIa的小于50％存在于步骤(d)中所收集的所述洗脱液的所述前导部分中。17.如权利要求16所述的方法，其中在步骤(b)中与所述弱阳离子交换树脂结合的所述FXI和/或FXIa的小于25％存在于步骤(d)中所收集的所述洗脱液的所述前导部分中。18.如权利要求16所述的方法，其中在步骤(b)中与所述弱阳离子交换树脂结合的所述FXI和/或FXIa的小于10％存在于步骤(d)中所收集的所述洗脱液的所述前导部分中。19.如权利要求16至18中任一项所述的方法，其中FXI和/或FXIa的量是通过使用FXIa特异性底物执行酰胺分解活性分析来测定。20.如权利要求1或2所述的方法，其中步骤(a)中所提供的所述包含IgG免疫球蛋白的血浆洗脱份为混悬血浆洗脱份沉淀物，所述混悬血浆洗脱份沉淀物选自由以下组成的组：洗脱份I沉淀物、洗脱份I+II+III沉淀物、洗脱份II沉淀物、洗脱份II+III沉淀物、洗脱份IV-1、Kistler-Nitschmann沉淀物A、Kistler-Nitschmann沉淀物B、科恩洗脱份II、科恩池、科恩洗脱份I或II+III、以及其被修饰沉淀物。21.如权利要求20所述的方法，其中步骤(a)中所提供的所述包含IgG免疫球蛋白的血浆洗脱份为混悬洗脱份II沉淀物。22.一种用于降低包含IgG免疫球蛋白的血浆洗脱份中的抗补体活性(ACA)的单步洗脱方法，所述方法包括以下步骤：(a)提供包含IgG免疫球蛋白组合物第一量的ACA的血浆洗脱份；(b)使所述包含IgG免疫球蛋白组合物的血浆洗脱份与安置在色谱柱中的弱阳离子交换树脂在包括pH不超过6.0并且电导率不超过11mS/cm的第一溶液条件下接触，以便使所述I...

【专利技术属性】
技术研发人员：W·泰施纳，H·A·巴特韦克，B·克尔布尔，L·霍夫鲍尔，HP·施瓦茨，
申请(专利权)人：百深有限责任公司，百深公司，
类型：发明
国别省市：瑞士,CH