使用ATAP肽治疗疾病的方法和组合物技术

本发明专利技术涉及使用ATAP肽治疗疾病的方法和组合物。具体的，本发明专利技术涉及ATAP‑iRGD‑M8和铂类药物的组合在制备用于联合治疗肿瘤性疾病的药物中的用途，包含ATAP‑iRGD‑M8和铂类药物的药物组合物，包括物理上相互隔离的多肽药物组合物和铂类药物组合物的药盒产品，制备所述药物组合物的方法以及对药物组合物进行质量检测的方法。本发明专利技术包含ATAP‑iRGD‑M8和铂类药物的药物组合物具有优良的抗肿瘤效果并且具有优良的药学性能。

Methods and compositions for the treatment of disease with ATAP peptide

The invention relates to methods and compositions for treating diseases using ATAP peptides. Specifically, the invention relates to the use of the combination of ATAP iRGD M8 and platinum drugs in the preparation of drugs for combined treatment of tumorous diseases, including pharmaceutical compositions of ATAP iRGD M8 and platinum drugs, including a physically isolated polypeptide drug composition and a drug box product of a platinum class composition, and preparation of the drug. Method of substance composition and method for quality detection of pharmaceutical composition. The invention comprises ATAP iRGD M8 and platinum pharmaceutical compositions with excellent anti-tumor effect and excellent pharmaceutical properties.

【技术实现步骤摘要】
使用ATAP肽治疗疾病的方法和组合物
本专利技术属于生物医药领域，具体涉及一种多肽、含有多肽的药物组合物及其应用。
技术介绍
尾锚定(tail-anchored，TA)蛋白质，包括Bcl-2家族成员，特征性地在羧基(C)末端通过单疏水节段束缚于磷脂双层，其中分子的大部分位于胞质溶胶中。Bcl-2是哺乳动物基因家族和它们产生的蛋白质的原型。Bcl-2相关蛋白的生物功能不可避免地与它们的特定的亚细胞定位相关联；细胞质、内质网(ER)膜或线粒体外膜(MOM)。研究表明Bcl-2家族成员可调节线粒体外膜透化作用(MOMP)并且可以促凋亡(例如，Bax、BAD、Bak、Bok、Bcl-Xs、Bik、Bim、Bid、Egl-1、以及Diva等等)或抗凋亡(例如，Bcl-2proper、Bcl-xL、Mcl-1、CED-9、A1、Bcl-w、以及Bfl-1等等)。Bcl-2家族成员和若干病症有关，包括：癌症，例如黑素瘤、乳腺癌、前列腺癌、和肺癌；神经性障碍，例如精神分裂症；以及免疫紊乱。癌症和增生包括各种非常复杂的疾病；然而，它们均具有一个共同的特点，即所有细胞是高度增殖的并且能够持续分裂，且不进行终末分化。这就证实了在这些以及其他的相关病症的病因中对于减少凋亡的作用。虽然目前的几种癌症疗法可促进癌细胞死亡和抑制癌细胞生长，但这些中的许多疗法对于癌症患者是高度毒性的并且它们的给药导致许多使人不愉快的和不堪忍受的副作用。此外，许多目前可应用的癌症疗法表明仅对特定病因的癌症或增生有效。因此，非常期望这样的治疗，即可以在大量的癌细胞类型和起源的范围内促进癌细胞死亡，并且对于患者在很大程度上是无毒性的。近来，人们已经证明了抗凋亡Bfl-1在氨基酸147-175处包含独特的两亲性尾锚定肽(ATAP)。如本文所述，Bfl-1ATAP包含带电荷的氨基酸，其线性连接于α-螺旋的一侧。在人基因组中，同源ATAP序列存在于另一种肿瘤抑制基因中，即人子宫颈癌抑制基因-1(HCCS-1)。在HCCS1的N端的另外的线粒体靶向信号(MTS)有助于其线粒体靶向和凋亡功能。已经证实，ATAP肽能够调节凋亡级联反应。因此，ATAP肽可以适合用于高效治疗剂以治疗多种疾病，包括细菌感染、癌症以及增生性疾病。CN105061580A(中国专利申请号201510511414.5)公开了一种经分离的多肽、或它的类似物或衍生物，由26至50个氨基酸组成，该多肽包括典型的SEQIDNO：36示出的氨基酸序列，其中，所述多肽形成两亲性螺旋结构，靶向线粒体外膜，通过破坏线粒体通透性诱发凋亡。另外，该专利技术的多肽还包括SEQIDNO：38、39、40、41、42、43、44、45、46、47、48、49、50、51以及53，其中SEQIDNO53为包括38个氨基酸的肽，其余为包括29个氨基酸的肽。上述SEQIDNO：36的氨基酸序列为：KFEPKSGWMTFLEVTGKICEMLSLLKQYC。典型的SEQIDNO：36肽还在Ko等人的文献(Ko，J.，Choi，K.，Pan，Z.，Lin，P.，Weisleder，N.，Kim，C.W.，Ma，J.(2007)Tail-anchoringdomainofBfl-1targetsmitochondriaandinducesapoptosisbyitsamphipathicproperty.J.CellSci.120:2912-23)中公开，如该Ko文献图1之C记载的称为ATAP片段的147-175残基。De等人的文献(DeG，KoJK，TanT，ZhuH，LiH，MaJ(2014).Amphipathictail-anchoringpeptideisapromisingtherapeuticagentforprostatecancertreatment.Oncotarget.2014,5:7734-47)中公开一种全新结构设计的多肽，其主要是将典型的SEQIDNO：36肽19位C替换为A，并与通称为iRGD的片段CRGDKGPDC连接(脱除左侧一个C)，形成表2所述M5的肽，其氨基酸序列为KFEPKSGWETFLEVTGKIAEMLSLLKQYCRGDKGPDC，该M5亦称为ATAP-iRGD-M5。De文献还记载，出于生物学活性改进的需要，在该ATAP-iRGD-M5的K端再增加一个赖氨酸K，形成称为M6的多肽KKFEPKSGWETFLEVTGKIAEMLSLLKQYCRGDKGPDC；接着出于溶解性和稳定性改进的需要，将该M6肽的氨基端乙酰化以及羧基端酰胺化，形成称为M8的多肽，其氨基酸序列为：Ac-KKFEPKSGWMTFLEVTGKIAEMLSLLKQYCRGDKGPDC-amide。试验结果显示，该M8多肽呈现优良的生物学活性和优良的溶解性和稳定性。如De文献中提到的，其中所涉及的M5、M6、M8等多肽可通过综合文献方法制得，亦可通过本领域常规的多肽合成方法(例如Fmoc固相合成法)获得或者通过商业途径合成得到(例如委托GLBiochemLtd制备)。肿瘤(包括良性肿瘤和恶性肿瘤，后者通常亦称为癌症)是人类面临的最重大的疾病之一。铂类药物在肿瘤治疗中具有极其重要的临床价值。典型的铂类药物有顺铂(Cisplatin)、卡铂(Carboplatin)、奥沙利铂(Oxalipaltin)、奈达铂(Nedaplatin)、宋铂(Sunplatin)、乐铂(Lobaplatin)、米铂(Miriplatin)、锡铂、顺氯卡铂、依铂、碳铂、洛铂、诺贝铂或赛特铂等。第一代抗癌药物——顺铂，是顺式一二氯二氨合铂的简称，常缩写为DDP或CDDP，属难溶性化合物。顺铂的特点主要是高效广谱的抗癌药，抗癌作用强，抗癌活性高。对肿瘤抑制率可达61％～98％，尤其对于实体瘤和对一般化疗不甚敏感肿瘤疗效较为显著。顺铂及其类似物的应用发展基本囊括了这些年来实体瘤治疗所取得的成就。顺铂对男性睾丸非精原细胞性肿瘤有特效。对晚期卵巢癌、头颈部肿瘤也可达到明显缓解，并使宫颈癌、肺癌、胃癌、骨肉瘤、间皮瘤、子宫内膜癌等的临床有效率得到很大的改观。第二代铂类抗癌药——卡铂，其全称是1,1-环丁二羧酸二合铂。卡铂的化学稳定性好，水溶性较好，其溶解度比顺铂高16倍。主要毒副作用是骨髓抑制，这是其主要的剂量限制性毒性。卡铂的作用机制与顺铂相同，可以替代顺铂用于某些癌症的治疗。其他副作用诸如肾毒性、胃肠道反应、听力下降、神经毒性均远远低于顺铂，卡铂可作为非小细胞肺癌、肝癌等的首选治疗药物(联合用药)，还可作为膀胱癌、子宫癌等数种癌症的次选治疗药。我国在使用卡铂治疗食道癌、头颈部癌和胃癌等方面也有许多成功的经验。第三代铂类抗癌药——奥沙利铂(oxaliplatin)，其是一种新型的铂类化合物，其铂原子与(1R,2R)-1,2-(DACH)载体和一个草酸基团形成螫合物，全称为草酸【反式-左旋-1,2-二氨环已烷】铂。奥沙利铂的作用机制与顺铂相同，但有不同的广谱的体外细胞毒性和体内抗肿瘤作用。在对顺铂存在内源性或获得性耐药的结肠癌及其他实体瘤中，依然表现出抗瘤活性。其广泛的抗瘤谱可能与形成了不同的加合物结构并避开了某些铂类耐药机制(特别是错配修复缺陷和本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.对药物组合物或者制备该药物组合物过程中的制剂中间体进行质量检测的方法，所述药物组合物或制剂中间体中包含ATAP‑iRGD‑M8和铂类药物，该方法包括如下步骤：(1)照《中华人民共和国药典》2015年版四部“0903不溶性微粒检查法”之“第一法(光阻法)”进行；(2)取所述药物组合物，任选的用微粒检査用水溶解和/或稀释至多肽药浓度为2mg/ml或者小于2mg/ml的溶液；(3)用光阻法微粒检测仪测定步骤(2)所得溶液中的微粒数，以每1ml溶液中粒径10μm～25μm的粒子数为n1，每1ml溶液中粒径大于25μm的粒子数为n2，计算每1ml溶液中平均粒子数N，其中N＝n1+2.5×n2；进一步的，该方法如说明书第三方面任一实施方案所述。

【技术特征摘要】
1.对药物组合物或者制备该药物组合物过程中的制剂中间体进行质量检测的方法，所述药物组合物或制剂中间体中包含ATAP-iRGD-M8和铂类药物，该方法包括如下步骤：(1)照《中华人民共和国药典》2015年版四部“0903不溶性微粒检查法”之“第一法(光阻法)”进行；(2)取所述药物组合物，任选的用微粒检査用水溶解和/或稀释至多肽药浓度为2mg/ml或者小于2mg/ml的溶液；(3)用光阻法微粒检测仪测定步骤(2)所得溶液中的微粒数，以每1ml溶液中粒径10μm～25μm的粒子数为n1，每1ml溶液中粒径大于25μm的粒子数为n2，计算每1ml溶液中平均粒子数N，其中N＝n1+2.5×n2；进一步的，该方法如说明书第三方面任一实施方案所述。2.ATAP-iRGD-M8和铂类药物的组合在制备用于联合治疗肿瘤性疾病的药物中的用途。3.根据权利要求2的用途，其特征在于：所述肿瘤选自：白血病(包括急性白血病、急性淋巴白血病、急性髓细胞性白血病、成髓细胞白血病、前髓细胞性白血病、粒-单核细胞型白血病、单核细胞性白血病、红白血病、慢性白血病、慢性髓细胞性白血病、慢性淋巴白血病)、真性红细胞增多、淋巴瘤、何杰金病、非何杰金病、多发性骨髓瘤、特发性巨球蛋白血症、实体瘤、肉瘤和癌、纤维肉瘤、粘液肉瘤、脂肉瘤、软骨肉瘤、骨源性肉瘤、脊索瘤、血管肉瘤、内皮肉瘤、淋巴管肉瘤、淋巴管内皮肉瘤、滑膜瘤、间皮瘤、尤因瘤、平滑肌肉瘤、横纹肌肉瘤、结肠癌、胰腺癌、乳腺癌、卵巢癌、胃癌、前列腺癌、鳞状细胞癌、基底细胞癌、腺癌、汗腺癌、皮脂腺癌、乳头状癌、乳头腺癌、囊腺癌、髓样癌、支气管癌、肾细胞癌、肝癌、胆管癌、绒毛膜癌、精原细胞瘤、胚胎癌、维尔姆斯肿瘤、子宫颈癌、子宫癌、睾丸肿瘤、肺癌、小细胞肺癌、膀胱癌、上皮癌、神经胶质瘤、星形细胞瘤、成神经管细胞瘤、颅咽管瘤、室管膜瘤、松果体瘤、成血管细胞瘤、听神经瘤、少突神经胶质瘤、硬脑膜肉瘤、黑素瘤、神经母细胞瘤、视网膜神经细胞瘤、肠癌、非小细胞肺癌、小细胞肺癌、头颈部癌、胰腺癌、黑色素瘤等；所述铂类药物选自：顺铂、卡铂、奥沙利铂、奈达铂、宋铂、乐铂、米铂、锡铂、顺氯卡铂、依铂、碳铂、洛铂、诺贝铂或赛特铂等；所述药物中，所述ATAP-iRGD-M8与所述铂类药物的重量比为1：0.05～20；所述药物中，所述ATAP-iRGD-M8与所述铂类药物的重量比为1：0.1～10；所述药物中，所述ATAP-iRGD-M8与所述铂类药物的重量比为1：0.2～5；和/或所述药物中，所述ATAP-iRGD-M8与所述铂类药物的重量比为1：0.25～4。4.根据权利要求2的用途，其特征在于：所述药物是用于注射或口服使用的制剂形式，优选是用于注射使用的制剂形式；所述药物是呈无菌溶液或无菌粉末形式的制剂形式；所述药物是呈冷冻干燥粉针剂的形式；所述呈冷冻干燥粉针剂形式的药物中包含作为冻干赋形剂的糖类物质；所述的糖类物质选自葡萄糖、乳糖、蔗糖、甘露醇及其组合；冻干赋形剂的添加量是所述多肽重量的0.5～10倍，例如是所述多肽重量的1～5倍；和/或所述药物中还包括氯化钠和枸橼酸，例如ATAP-iRGD-M8与氯化钠和枸橼酸的重量比为1：0.02～0.1：0.05～0.2，例如ATAP-iRGD-M8与氯化钠和枸橼酸的重量比为1：0.025～0.05：0.05～0.1...

【专利技术属性】
技术研发人员：刘河，史卫国，郭晓春，杨惠仁，麻建杰，郭二明，王兴辉，
申请(专利权)人：北京爱泰浦生物医药科技有限责任公司，
类型：发明
国别省市：北京,11