一种用于防治水稻稻瘟病的肥料的制备方法技术

本发明专利技术公开了一种用于防治水稻稻瘟病的肥料的制备方法，属于肥料领域。本发明专利技术将芸苔素内酯和胺鲜酯进行复配，其主要功效一方面促进植株的碳、氮代谢，从而提高水稻活力和发育；另一方面提高作物产量，改善作物品质。本发明专利技术通过促渗剂渗入水稻根部，通过芸苔内酯和胺鲜酯促进酶活和光合作用，再通过分离培养的菌株在酶活作用下大大增加活性，促进抵抗稻瘟病病菌的侵入的能力，另一方面添加猕猴桃茎叶活性物质，抑制生成稻瘟病病菌在水稻体内的繁殖和生长，控制稻瘟病。本发明专利技术解决了目前防治稻瘟病采用杀菌类药物防治，造成大量的人力物力资源浪费，而且对环境造成了不必要的污染，同时稻谷内产生了不必要的农药残留的问题。

【技术实现步骤摘要】
一种用于防治水稻稻瘟病的肥料的制备方法
本专利技术属于肥料领域，具体涉及一种用于防治水稻稻瘟病的肥料的制备方法。
技术介绍
水稻是我国最重要的粮食作物，水稻施肥是一个极其复杂的问题，需要根据水稻品种的营养特性、肥料的性质、土壤、气候等特点。确定适宜的施肥时间、施肥量、肥料品种和施肥方法，使施用的肥料获得最高的利用率和最佳的经济利益，达到高产、优质、高效的目的。合理的施肥既能提高产量，改善作物品质，又能使土壤养分保持平衡，有利于增强土地肥力。但是，现有技术中，水稻施肥多以尿素、碳铵、磷酸二铵等常规的单质肥料为主，水稻长期施用单质肥料，会对土壤和作物产生不良影响，导致水稻的生长速度变慢和水稻的产量低下，并且现有的肥料都无法抑制水稻稻瘟病的发展。稻瘟病是水稻重要病害之一，可引起大幅度减产，严重时减产40~50％，甚至颗粒无收。世界各稻区均有发生，其中以叶部、节部发生为多，发生后可造成不同程度减产，尤其穗颈瘟或节瘟发生早而重，可造成白穗以致绝产。近年来，广东稻瘟病年发生面积不少于50万亩，而且出现逐年增加趋势，局部大爆发并不少见。稻瘟病可能发生在省域内的任何年头、任何季节。主要危害叶片、茎秆、穗部。因危害时期、部位不同分为苗瘟、叶瘟、节瘟、穗颈瘟、谷粒瘟。苗瘟发生于三叶前，由种子带菌所致，病苗基部灰黑，上部变褐，卷缩而死，湿度较大时病部产生大量灰黑色霉层，即病原菌分生孢子梗和分生孢子。叶瘟在整个生育期都能发生，分孽至拔节期危害较重。节瘟常在抽穗后发生，初在稻节上产生褐色小点，后渐绕节扩展使病部变黑，易折断，发生早的形成枯白穗，仅在一侧发生的造成茎秆弯曲。穗颈瘟初形成褐色小点，放展后使穗颈部变褐，也造成枯白穗；发病晚的造成秕谷，枝梗或穗轴受害造成小穗不实。谷粒瘟产生褐色椭圆形或不规则斑，可使稻谷变黑；有的颖壳无症状，护颖受害变褐，使种子带菌。目前的防治方法以化学防治使用最为广泛，主要是通过杀菌剂防治，如使用30%克瘟散乳油500倍液，50%消菌灵水溶性粉剂500倍液，40%克百菌悬乳剂500液，25%咪鲜胺乳油1500倍液等。但是由于防治主要采用杀菌类药物进行防治，造成大量的人力物力资源浪费；而且对环境造成了不必要的污染，同时稻谷内产生了不必要的农药残留，给食品安全带来隐患。因此，可以生产出一种可以有效防治稻瘟病的肥料存在很大的市场需求。
技术实现思路
本专利技术所要解决的技术问题：针对目前防治稻瘟病采用杀菌类药物防治，造成大量的人力物力资源浪费，而且对环境造成了不必要的污染，同时稻谷内产生了不必要的农药残留的问题，提供一种用于防治水稻稻瘟病的肥料的制备方法。为解决上述技术问题，本专利技术采用如下所述的技术方案是：一种用于防治水稻稻瘟病的肥料的制备方法，其特征在于，该制备方法包括如下步骤：（1）取芸苔素内酯加入质量分数为80%的乙醇溶液和胺鲜酯进行混合，溶解后，得混合物，向混合物中加入壬基酚聚氧乙烯醚和水，搅拌，得复配制剂物，备用；（2）取猕猴桃茎叶粉加入磷酸缓冲溶液和纤维素酶，酶解，灭酶，取灭酶物加入无水乙醇混合，微波提取，在3~4℃条件下离心，过滤，取滤液减压浓缩，得浓缩物，备用；（3）取预处理的水稻剪成1~2cm左右长的小段，置于腐植酸琼脂培养基上培养，挑取析出的菌径最大的菌落接种至PDA培养基中培养培养，挑取培养物重复划线接种培养2~3次，得纯化培养物，取纯化培养物接种至PDA液体培养基中振荡培养，干燥，粉碎过筛，收集过筛颗粒物；（4）按质量份数计，取步骤（1）备用的复配制剂物30~50份，步骤（2）浓缩物60~70份，过筛颗粒物40~50份，促渗剂10~15份，磷酸二氢铵2~5份，磷酸二氢钾3~5份，磷酸氢二胺1~3份混合，得用于防治水稻稻瘟病的肥料。所述步骤（1）中芸苔素内酯与质量分数为80%的乙醇溶液和胺鲜酯的质量比为2：75~80：3；混合物、壬基酚聚氧乙烯醚和水的质量比为20：1：100。所述步骤（2）中猕猴桃茎预处理：将猕猴桃鲜茎叶洗净，剪成段，在40~45℃条件下干燥，粉碎过100目筛，经石油醚脱脂脱色后干燥，得到猕猴桃茎叶粉；猕猴桃茎叶粉、磷酸缓冲溶液和纤维素酶的质量比为3：10：2，30~40℃酶解1~2h；灭酶物与无水乙醇的质量比为1：30~35；微波条件：微波功率300W的条件下，每间隔1min微波1次，每次作用1min，提取时间5~6min。所述步骤（3）中腐植酸琼脂培养基：按质量份数计，取1~4份腐植酸，0.2~0.4份磷酸氢二钠，0.8~1.2份氯化钾，0.02~0.05份七水合硫酸镁，0.05~0.09份七水合硫酸亚铁，0.01~0.04份碳酸钙，18~25份琼脂粉，1~3份VitaminB100x，1000份纯水，pH值7.2±0.2，121℃灭菌20~25min，冷却至50~55℃，取冷却物按质量比1000：1~2加入苯菌灵，即得腐植酸琼脂培养基。所述步骤（3）中水稻预处理：将采集的处于前7~8周营养生长期未感染稻瘟的新鲜水稻清水洗净，水稻按照根、茎、叶和鞘四个组织剪开，浸于浓度为120mmol/L的磷酸氢二钠缓冲液中超声1~2min，再在质量分数为4%的次氯酸钠溶液中浸没6min，取出依次用乙醇和无菌水清洗30s，干燥1~3h。所述步骤（3）中置于腐植酸琼脂培养基上的培养条件：27~33℃培养2~3周；接种至PDA培养基的培养条件：27~35℃培养5~7d；纯化培养物按10%的接种量接种至PDA液体培养基中振荡培养2~3d。所述步骤（4）中促渗剂的配制：取木质素按质量比1：8：5加入浓度为0.1mol/L的NaOH溶液和淀粉混合，得混合溶液，按质量份数计，取混合溶液20~30份，丙烯酰胺6~8份，丙烯酸8~10份，过硫酸钾5~7份，蒸馏水100~150份，调节pH至7.5~8，通入氮气，搅拌30min，加入丙酮抽提，取沉淀于55~60℃下干燥至恒重。本专利技术与其他方法相比，有益技术效果是：（1）本专利技术将芸苔素内酯和胺鲜酯进行复配，其主要功效一方面为提高水稻体内叶绿素、蛋白质、核酸的含量和光合速率，提高过氧化物酶及硝酸还原酶的活性，促进植株的碳、氮代谢，从而提高水稻活力和发育；另一方面提高作物产量，改善作物品质，提高作物耐寒、耐旱、耐涝、耐盐碱能力，提高抗逆能力，减轻农药药害及化学污染药害，同时能抗多种病毒、细菌、真菌增强了水稻的抗病能力，在与杀菌剂混用时，提高了杀菌剂的防治效果从而减少杀菌剂的使用量；（2）本专利技术通过提取猕猴桃茎叶中的活性物质，能够抑制scytalone脱氢酶的作用，从而抑制黑色素的形成，导致稻瘟病菌细胞内积累了大量的黑色素中间体scytalon，作用于稻瘟病时孢子虽能萌发但菌丝变形且不能产生附着孢，附着孢不能产生黑色素，由于黑色素的缺失，使得真菌不能产生高压，也无法完成附着孢的渗入，阻碍了真菌对寄主的侵入；（3）本专利技术分离培养基主要是以淀粉为碳源，酪蛋白为氮源，内生真菌的生长一般比内生放线菌快，加以苯菌灵等抗真菌化合物以促进所要筛选的放线菌生长，通过筛选水稻的内生放线菌，内生菌与宿主共存一段时间后，能够在植物体内产生多种有效的生物活性物质，尤其是当宿主受到外界病原菌侵入的时候，产生的活性物质量会大大提升，内生菌能产生的生物活性物质种类很多，如能拮抗真菌细本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种用于防治水稻稻瘟病的肥料的制备方法，其特征在于，该制备方法包括如下步骤：取芸苔素内酯加入质量分数为80%的乙醇溶液和胺鲜酯进行混合，溶解后，得混合物，向混合物中加入壬基酚聚氧乙烯醚和水，搅拌，得复配制剂物，备用；取猕猴桃茎叶粉加入磷酸缓冲溶液和纤维素酶，酶解，灭酶，取灭酶物加入无水乙醇混合，微波提取，在3~4℃条件下离心，过滤，取滤液减压浓缩，得浓缩物，备用；取预处理的水稻剪成1~2cm左右长的小段，置于腐植酸琼脂培养基上培养，挑取析出的菌径最大的菌落接种至PDA培养基中培养培养，挑取培养物重复划线接种培养2~3次，得纯化培养物，取纯化培养物接种至PDA液体培养基中振荡培养，干燥，粉碎过筛，收集过筛颗粒物；按质量份数计，取步骤（1）备用的复配制剂物30~50份，步骤（2）浓缩物60~70份，过筛颗粒物40~50份，促渗剂10~15份，磷酸二氢铵2~5份，磷酸二氢钾3~5份，磷酸氢二胺1~3份混合，得用于防治水稻稻瘟病的肥料。

【技术特征摘要】
1.一种用于防治水稻稻瘟病的肥料的制备方法，其特征在于，该制备方法包括如下步骤：取芸苔素内酯加入质量分数为80%的乙醇溶液和胺鲜酯进行混合，溶解后，得混合物，向混合物中加入壬基酚聚氧乙烯醚和水，搅拌，得复配制剂物，备用；取猕猴桃茎叶粉加入磷酸缓冲溶液和纤维素酶，酶解，灭酶，取灭酶物加入无水乙醇混合，微波提取，在3~4℃条件下离心，过滤，取滤液减压浓缩，得浓缩物，备用；取预处理的水稻剪成1~2cm左右长的小段，置于腐植酸琼脂培养基上培养，挑取析出的菌径最大的菌落接种至PDA培养基中培养培养，挑取培养物重复划线接种培养2~3次，得纯化培养物，取纯化培养物接种至PDA液体培养基中振荡培养，干燥，粉碎过筛，收集过筛颗粒物；按质量份数计，取步骤（1）备用的复配制剂物30~50份，步骤（2）浓缩物60~70份，过筛颗粒物40~50份，促渗剂10~15份，磷酸二氢铵2~5份，磷酸二氢钾3~5份，磷酸氢二胺1~3份混合，得用于防治水稻稻瘟病的肥料。2.根据权利要求1所述的用于防治水稻稻瘟病的肥料的制备方法，其特征在于，所述步骤（1）中芸苔素内酯与质量分数为80%的乙醇溶液和胺鲜酯的质量比为2：75~80：3；混合物、壬基酚聚氧乙烯醚和水的质量比为20：1：100。3.根据权利要求1所述的用于防治水稻稻瘟病的肥料的制备方法，其特征在于，所述步骤（2）中猕猴桃茎预处理：将猕猴桃鲜茎叶洗净，剪成段，在40~45℃条件下干燥，粉碎过100目筛，经石油醚脱脂脱色后干燥，得到猕猴桃茎叶粉；猕猴桃茎叶粉、磷酸缓冲溶液和纤维素酶的质量比为3：10：2，30~40℃酶解1~2h；灭酶物与无水乙醇的质量比为1：30~35；微波条件：微波功率300W的条件下，每间隔1min微波1次，每次作用1min，提取时间5~6min。4.根据权...

【专利技术属性】
技术研发人员：芮志行，郑薇，程依，
申请(专利权)人：芮志行，
类型：发明
国别省市：江苏,32