一种利用靶向PD-1抗体沉默免疫细胞负调控受体的方法技术

本发明专利技术公开了一种利用靶向PD‑1抗体沉默免疫细胞负调控受体的方法，包括以下步骤：(1)分离：取抗凝处理的血液，离心，吸取血浆、白细胞和血小板，去掉红细胞层，得血浆和白细胞的混合物；(2)共浴：将PD‑1单抗，与血浆和白细胞的混合物共浴，得PD‑1抗体处理后的白细胞制品。利用上述方法制备得到的白细胞制品，可用于对于健康人群、肿瘤患者、肿瘤患者免疫治疗后等免疫状态的实验室研究；亦可作为肿瘤患者治疗方案制定的佐证、治疗后的评价；与肿瘤细胞混合，研究不同封闭效果下白细胞对肿瘤细胞的杀伤效果等；也可用于肿瘤患者等需要将自身T淋巴细胞的PD‑1封闭后回输的临床治疗试验中。

A method of silencing the negative regulatory receptors of immune cells by targeting PD-1 antibody

The present invention discloses a method for silencing negative regulatory receptors of immune cells by targeting PD 1 antibodies, including: (1) separation: extraction of anticoagulant blood, centrifugation, absorption of plasma, white blood cells and platelets, removal of the red cell layer, and the mixture of plasma and leukocytes; (2) Co bath 1 mAb, and plasma A white blood cell mixture was prepared by bathing with the mixture of leukocytes and PD 1 antibody. Leukocyte products obtained by this method can be used in laboratory studies of immune states such as healthy people, tumor patients and tumor patients after immunotherapy, and can also be used as evidence and after treatment for cancer patients. Tumor cell killing effect, etc., can also be used for tumor patients and other clinical trials that need to shut down PD T 1 of their own lymphocytes.

【技术实现步骤摘要】
一种利用靶向PD-1抗体沉默免疫细胞负调控受体的方法
本专利技术涉及一种利用靶向PD-1抗体沉默免疫细胞负调控受体的方法，涉及将人血液中淋巴细胞提取及处理

技术介绍
人体内T细胞的激活需要两个信号，其一是TCR接收APC的MHC呈递抗原信息，其二是来自细胞表面的一系列受体、配体，其中PD-1受体就在其中。而PD-1受体主要表达于T细胞表面和初级B细胞表面，并且在这些细胞的分化和凋亡中发挥非常重要的作用。研究发现PD-1有两个配体，分别是PD-L1和PD-L2。PD-L1与T细胞上的受体PD-1相互作用，在免疫应答的负性调控方面发挥着重要作用。在许多人类肿瘤组织中均可检测到PD-L1蛋白的表达，肿瘤部位的微环境可诱导肿瘤细胞上的PD-L1的表达，而表达的PD-L1有利于肿瘤的发生和生长，诱导抗肿瘤T细胞的凋亡。因此，可利用PD-1抗体沉默效果封闭免疫细胞表面受体PD-1，以此来避免来自肿瘤细胞表面PD-L1与细胞表面受体PD-1结合抑制免疫细胞杀伤肿瘤的效果，从而恢复人体免疫细胞活性，进而增强自身免疫应答。目前，现有技术中通常采用静脉注射的方法注入PD-1抗体，存在以下不足之本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种利用靶向PD‑1抗体沉默免疫细胞负调控受体的方法，其特征在于：包括以下步骤：(1)分离：取抗凝处理的血液，离心，得到上层血浆层、中间细胞层和下层红细胞层，吸取血浆、白细胞和血小板，去掉红细胞层，得血浆和白细胞的混合物；(2)共浴：将PD‑1单抗，与上述得到的血浆和白细胞的混合物共浴，共浴条件为：5％CO2，37℃，60min；PD‑1单抗的用量为：每1ml血浆和白细胞的混合物加入2μgPD‑1单抗；共浴后，内毒素检测，若呈阳性，过100目筛，得PD‑1抗体处理后的白细胞制品。

【技术特征摘要】
1.一种利用靶向PD-1抗体沉默免疫细胞负调控受体的方法，其特征在于：包括以下步骤：(1)分离：取抗凝处理的血液，离心，得到上层血浆层、中间细胞层和下层红细胞层，吸取血浆、白细胞和血小板，去掉红细胞层，得血浆和白细胞的混合物；(2)共浴：将PD-1单抗，与上述得到的血浆和白细胞的混合物共浴，共浴条件为：5％CO2，37℃，60min；PD-1单抗的用量为：每1ml血浆和白细胞的混合物加入2μgPD-1单抗；共浴后，内毒素检测，若呈阳性，过100目筛，得PD-1抗体处理后的白细胞制品。2.根据权利要求1所述的利用靶向PD-1抗体沉默免疫细胞负调控受体的方法，其特征在于：所述步骤(1)中，离心的参数为：2600rpm，离心10min。3.根据权利要求1所述的利用靶向PD-1抗体沉默免疫细胞负调控受体...

【专利技术属性】
技术研发人员：贺盛，唐正晓，张振，杨学文，吴忠坤，
申请(专利权)人：海南博鳌银丰康养国际医院有限公司，银丰生物工程集团有限公司，
类型：发明
国别省市：海南,46