一种多孔壳聚糖微载体及其制备方法和应用技术

本发明专利技术公开了一种多孔壳聚糖微载体及其制备方法和应用。该多孔壳聚糖微载体以壳聚糖为主要成分，多孔壳聚糖微载体的直径为100～300μm，其表面和内部具有相互联通的孔隙，所述孔隙的尺径为10～70μm，且孔隙率为95％以上。本发明专利技术的多孔壳聚糖微载体尺寸均一，且表面和内部具有相互联通的孔隙，孔隙率最高可达95％以上；利用本发明专利技术的多孔壳聚糖微载体培养细胞，细胞不仅可以粘附于载体表面，还能进入内部孔隙生长，并在三维空间形成有效的细胞‑细胞连接，实现真正的三维培养，有效地模拟体内环境，更好地保持细胞的活力与功能，具有良好的生物相容性。

Porous chitosan microcarrier and preparation method and application thereof

The invention discloses a porous chitosan microcarrier and a preparation method and application thereof. The porous chitosan microcarrier is composed of chitosan as the main component. The diameter of the porous chitosan microcarrier is 100~300 u m, and its surface and interior have interconnected pores. The pore size of the porous chitosan microcarrier is 10~70 mu m, and the porosity is over 95%. The porous chitosan microcarrier of the invention has the same size, and the surface and the interior have interconnected pores, and the porosity is up to 95%. The cells can be cultured by the porous chitosan microcarrier of the invention, and the cells can not only adhere to the surface of the carrier, but also enter the inner pore growth, and form effective three dimensional space. The cells are connected to achieve real three-dimensional culture, effectively simulate the body environment, better maintain the vitality and function of the cells, and have good biocompatibility.

【技术实现步骤摘要】
一种多孔壳聚糖微载体及其制备方法和应用
本专利技术属于天然高分子多孔材料领域，具体涉及一种多孔壳聚糖微载体及其制备方法和应用。
技术介绍
微载体技术是实现大规模细胞培养的有效手段，目前国外已有部分实心或多孔微载体实现商品化，如Cytodex、Cultispher等，同时还有多种微载体处于实验室研究阶段。与传统的平板培养相比，这些微载体能为贴壁性细胞提供充足的粘附位点，实现细胞大规模悬浮培养，但现有的微载体均忽视了让细胞进入其内部孔隙生长并在三维空间形成有效的细胞-细胞连接，从而未能实现真正的细胞三维培养。壳聚糖是由自然界广泛存在的甲壳素经过脱乙酰基后的产物，具有良好的生物相容性、血液相容性与微生物可降解性等优良性能，在生物医学领域有广阔的应用前景。近年来，基于壳聚糖的细胞微载体已有报道，包括实心微载体(中国专利技术专利CN201210000553.8)与多孔微载体(中国专利技术专利CN200910041768.2，CN200910041767.8)，但没有证据表明这些微载体能让细胞进入内部孔隙生长并在三维空间形成有效的细胞-细胞连接，同时其制备技术往往采用戊二醛、环氧氯丙烷等交联剂或本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种多孔壳聚糖微载体，其特征在于，其以壳聚糖为主要成分，所述多孔壳聚糖微载体的直径为100～300μm，其表面和内部具有相互联通的孔隙，所述孔隙的尺径为10～70μm，且孔隙率为95％以上。

【技术特征摘要】
1.一种多孔壳聚糖微载体，其特征在于，其以壳聚糖为主要成分，所述多孔壳聚糖微载体的直径为100～300μm，其表面和内部具有相互联通的孔隙，所述孔隙的尺径为10～70μm，且孔隙率为95％以上。2.如权利要求1所述的多孔壳聚糖微载体，其特征在于，所述多孔壳聚糖微载体的直径为165～220μm，优选180μm～200μm；所述孔隙的尺径为20～60μm，优选25～50μm，更优选30～40μm；和/或，所述多孔壳聚糖微载体的孔隙率为97～99％；优选98％。3.如权利要求1或2所述的多孔壳聚糖微载体，其特征在于，所述多孔壳聚糖微载体的比表面积大于10m2/g；优选28～32m2/g；更优选30.1m2/g。4.如权利要求1～3任一项所述的多孔壳聚糖微载体，其特征在于，所述多孔壳聚糖微载体的弹性模量为130～160kPa，优选135～155kPa，更优选145kPa。5.一种如权利要求1～4任一项所述多孔壳聚糖微载体的制备方法，其特征在于，其包括如下步骤：(1)将分散相与连续相混合均匀，乳化后得W/O乳液；所述分散相为壳聚糖的醋酸水溶液，所述连续相为含乳化剂的有机溶剂溶液；(2)将所述W/O乳液在-50℃～-5℃淬火2～6小时进行热致相分离；(3)将相转变液倒入淬火后的乳液中进行反相再生，即得多孔壳聚糖微载体；所述相转变液为含碱的乙醇和水混合液。6.如权利要求5所述的制备方法，其特征在于，步骤(1)中所述壳聚糖的脱乙酰化程度大于80％，粘均分子量为10～15万，较佳地为10万；所述脱乙酰化程度优选95％；步骤(1)中：所述壳聚糖的含量为1％～3％，优选1％；所述醋酸水溶液的醋酸含量为1％～3％；优选1％；所述乳化剂的含量为3％～7％，优选5％；所述乳化剂优选Span80与Tween60的混合物；所述Span80与所述Tween60的质量比为24:(1～5)...

【专利技术属性】
技术研发人员：杨光，黄丽霞，肖林，郑瑞珠，刘海清，
申请(专利权)人：华中科技大学鄂州工业技术研究院，华中科技大学，
类型：发明
国别省市：湖北,42