一种非变性蛋白质的提取方法及其专用提取液技术

本发明专利技术公开了一种非变性蛋白质的提取方法及其专用提取液。该提取方法包括步骤a2)：采用提取液提取样品中的非变性蛋白质；所述提取液中含有蔗糖、NaCl、L‑抗坏血酸钠、洋地黄皂苷、二硫苏糖醇、苯甲基磺酰氟和蛋白酶抑制剂。本发明专利技术提供的提取方法操作简便，试剂温和、经济，可高效提取高质量的非变性蛋白质，为后续开展逆境植物蛋白质组学研究奠定基础和技术保障，并对在极端环境下生存的植物顽拗组织蛋白质提取具有一定指导意义。本发明专利技术具有重大应用价值。

A non denatured protein extraction method and its special extraction solution

The invention discloses a method for extracting non denatured protein and a special extraction liquid thereof. The extraction method includes step A2): extracting the non denaturated protein from the sample, which contains sucrose, NaCl, L sodium ascorbate, digitalis saponins, two sorbitol, benzoyl sulfonyl fluoride and protease inhibitors. The extraction method of this invention is easy to operate, the reagent is mild and economical, and it can efficiently extract the high quality non denatured protein. It lays the foundation and technical guarantee for the subsequent research on proteomics of adversity plant, and has certain guiding significance for the extraction of protein in the recalcitrant plant of the extreme environment. The invention has great application value.

【技术实现步骤摘要】
一种非变性蛋白质的提取方法及其专用提取液
本专利技术属于生物
，具体涉及一种非变性蛋白质的提取方法及其专用提取液，尤其涉及一种非变性植物蛋白质的提取方法及其专用提取液。
技术介绍
蛋白质作为生命活动的主要承担者，在细胞中大多以蛋白质复合体及相互作用蛋白的形式存在，其结构和作用十分复杂。传统的双向电泳仅能区分从植物体中提取变性后的蛋白质，并非它们在细胞中承担功能时的状态，不利于对蛋白质间相互作用、蛋白质复合体的研究。蛋白质分离是电泳技术的核心，良好的蛋白质提取方法是获取直观蛋白质可视化信息的前提与保证。截至目前，提取非变性植物蛋白质的传统方法主要有咪唑法(HASHEMIA，GHARECHAHIJ，NEMATZADEHG，etal.Two-dimensionalbluenative/SDS-PAGEanalysisofwholecelllysateproteincomplexesofriceinresponsetosaltstress[J].Journalofplantphysiology，2016，20090-101.)、Tris-HCl法(PIROVANICP，CARVALHO本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种非变性蛋白质的提取方法，包括步骤a2)：采用提取液提取样品中的非变性蛋白质；所述提取液中含有蔗糖、NaCl、L‑抗坏血酸钠、洋地黄皂苷、二硫苏糖醇、苯甲基磺酰氟和蛋白酶抑制剂。

【技术特征摘要】
1.一种非变性蛋白质的提取方法，包括步骤a2)：采用提取液提取样品中的非变性蛋白质；所述提取液中含有蔗糖、NaCl、L-抗坏血酸钠、洋地黄皂苷、二硫苏糖醇、苯甲基磺酰氟和蛋白酶抑制剂。2.如权利要求1所述的提取方法，其特征在于：所述提取液中含有0.3-0.5mol/L蔗糖、0.05-0.15mol/LNaCl、0.01-0.03mol/LL-抗坏血酸钠、0.8-1.2mg/100mL洋地黄皂苷、0.003-0.007mol/L二硫苏糖醇、0.0008-0.0012mol/L苯甲基磺酰氟和8-12mg/100mL蛋白酶抑制剂。3.如权利要求1或2所述的提取方法，其特征在于：所述提取液为含有0.3-0.5mol/L蔗糖、0.05-0.15mol/LNaCl、0.01-0.03mol/LL-抗坏血酸钠、0.8-1.2mg/100mL洋地黄皂苷、0.003-0.007mol/L二硫苏糖醇、0.0008-0.0012mol/L苯甲基磺酰氟和8-12mg/100mL蛋白酶抑制剂的0.008-0.012mol/L的Tris缓冲液；所述提取液的pH值为6.8-7.2。4.如权利要求1至3任一所述的提取方法，其特征在于：所述步骤a2)为：取样品，加入用于去除叶绿素的化合物和提取液，匀浆，收集...

【专利技术属性】
技术研发人员：王晓东，冯金朝，石莎，韩航，
申请(专利权)人：中央民族大学，
类型：发明
国别省市：北京,11