用于治疗和/或预防肿瘤的沙粒病毒和用于制备具有（改善的）肿瘤消退性能的沙粒病毒的方法技术

本发明专利技术涉及用于治疗和/或预防肿瘤的沙粒病毒以及用于制备具有（改善的）肿瘤消退性能的沙粒病毒的方法。

Sand virus for treatment and / or prevention of cancer and method for preparing sand virus with (improved) tumor extinction property

The invention relates to a sand virus for treating and / or preventing tumors and a method for preparing a sand virus with (improved) tumor extinction properties.

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】用于治疗和/或预防肿瘤的沙粒病毒和用于制备具有（改善的）肿瘤消退性能的沙粒病毒的方法应用领域和
技术介绍
本专利技术涉及用于治疗和/或预防肿瘤的沙粒病毒以及用于制备具有（改善的）肿瘤消退性能的沙粒病毒的方法。沙粒病毒属于人病原性多形RNA病毒家族。由于它们在动物（主要是啮齿类动物）中的自然储宿（Reservoir），具有这些病毒的疾病属于人畜共患病。人畜共患病表示可以从动物传递给人类、反之亦然从人类传递给动物的疾病。已知至少八种沙粒病毒，其在人类中造成疾病。典型的是无菌性脑膜炎和出血热。已知的可以在人类中引起疾病的病毒是淋巴细胞性脉络丛脑膜炎病毒（LCMV）、瓜纳瑞托病毒（GTOV）、胡宁病毒（JUNV）、拉沙病毒（LASV）、Lujo病毒（LUJV）马丘波病毒（MACV）、沙比亚（Sabia）病毒（SABV）和白水河病毒（WWAV）。沙粒病毒通常分成两组，即旧大陆沙粒病毒和新大陆沙粒病毒。这些组在地理上和在遗传上不同。已经在东半球的国家，诸如欧洲、亚洲和非洲国家发现了旧大陆沙粒病毒，诸如淋巴细胞性脉络丛脑膜炎病毒。相反，已经在西半球的国家，诸如阿根廷、玻利维亚、委内瑞拉、巴西和美国发现了新大陆沙粒病毒。该病毒家族的名称源自拉丁文arenosus（沙样）或arena（沙），以描述病毒粒子内的沙样核糖体结构。沙粒病毒的病毒粒子具有圆形至不规则形状，且根据物种和试验材料制品而具有50nm至300nm、经常110nm至130nm的直径。8nm至10nm长的棒形糖蛋白刺突嵌入在病毒包膜中。各个刺突由病毒包膜蛋白的四聚体组成。病毒粒子还包含两个具有螺旋对称的闭环衣壳。衣壳的长度在450nm至1300nm之间变化。一个病毒RNA（核糖核酸）聚合酶（L-蛋白）分子附着于它们中的每一个。每个衣壳包含一个具有混合（即双义，±）极性的单链RNA分子。两个单链RNA分子代表病毒基因组。它们被称作L（大）和S（小），且是约7.5kb（千碱基）和3.5kb（千碱基）大。尽管所述衣壳是闭环形状，这些RNA链是直链的且因而不是圆形的。在RNA的3’末端处的19-30碱基长序列存在于两条链上且在该病毒家族中也是保守的。在形态学上非常罕见的是在病毒粒子内存在交替数目的细胞核糖体，这给病毒颗粒提供它们的“沙样”外观。同样地，在经纯化的病毒制品中，发现了许多不同的细胞RNA（也包括核糖体RNA）以及病毒RNA的复制形式、不同的病毒mRNA（与核糖体结合的信使核糖核酸）和病毒基因组的完全互补链。这些非基因组RNA以变化的量都位于上述衣壳外面。沙粒病毒作为疫苗载体的应用是已知的。一个显著的例子是针对阿根廷出血热使用的疫苗病毒Candid#1。这是胡宁病毒的疫苗变体。从WO2009/083210A1已知复制缺陷型（即遗传修饰的）沙粒病毒颗粒（病毒粒子）尤其用于治疗肿瘤疾病，例如黑素瘤、前列腺癌、乳腺癌和肺癌的用途。在出版物“Developmentofreplication-defectivelymphocyticchoriomeningitisvirusvectorsfortheinductionofpotentCD8+Tcellimmunity”(NatureMedicine,第16卷,第3期,2010年3月,第339-345页;doi:10.1038/Nm.2104)中，提及癌症免疫疗法作为这样的病毒颗粒的潜在应用领域。此外，WO2006/008074A1公开了包装细胞（其产生用沙粒病毒糖蛋白假型化的逆转录病毒病毒粒子）用于实体瘤的基因治疗的用途。在现有技术中描述的用于治疗肿瘤的方法是基于通过遗传工程非常复杂地产生的病毒颗粒的应用。此外在基因疗法的治疗方法的情况下，通常不可能实现经遗传工程制备的病毒粒子或产生病毒粒子的包装细胞对肿瘤组织的充分且在治疗上有效的转导。目的和解决方案因此，本专利技术是基于如下目的：提供与现有技术相比更简单、且特别是更有效的用于肿瘤、特别是癌和肉瘤的治疗方案。该目的根据本专利技术通过根据独立权利要求1的沙粒病毒、根据权利要求14的药物以及根据独立权利要求15的体外方法实现。在从属权利要求中定义了优选的实施方案。所有权利要求的表述特此通过引用并入说明书的内容中。在说明书中公开了本专利技术的另一个主题，其实现本专利技术的目的。根据第一方面，本专利技术涉及用于治疗和/或预防人类或动物中的肿瘤、优选恶性肿瘤的沙粒病毒。所述沙粒病毒的特征优选地在于，它不含有基因组外来RNA，即它不包含基因组外来RNA。换而言之，该沙粒病毒的基因组（遗传物质）优选地不含外来RNA或优选地不包含外来RNA。在本专利技术的上下文中，表述“基因组外来RNA”应被理解为是指这样的RNA（核糖核酸）或RNA序列：其不发生在或不存在于野生型沙粒病毒的基因组中或野生型沙粒病毒的突变体（突变的沙粒病毒）的基因组中，尤其是野生型沙粒病毒的天然突变体（天然地突变的沙粒病毒）的基因组中。外来RNA的例子是人工的或合成的RNA分子、生物体的RNA和其它病毒的RNA。在本专利技术的上下文中（与本领域技术人员的理解相一致），表述“野生型沙粒病毒”应被理解为是指这样的沙粒病毒：其基因组是在自然界中存在的遗传上正常的形式。在本专利技术的上下文中（与本领域技术人员的理解相一致），表述“野生型沙粒病毒的突变体”或“突变的沙粒病毒”应被理解为是指这样的沙粒病毒：其基因组与野生型基因组相比包含自发的，即天然地造成的或由诱变剂诱导的修饰。因此，在本专利技术的上下文中（与本领域技术人员的理解相一致），表述“野生型沙粒病毒的天然突变体”或“天然地突变的沙粒病毒”应被理解为是指这样的沙粒病毒：其基因组与野生型基因组相比包含自发的，即天然地造成的修饰。天然地突变的沙粒病毒可以优选地通过传代、特别是连续传代制备，这将在下面更详细地讨论。本专利技术是基于以下惊人发现：没有基因组外来RNA的沙粒病毒能够实现肿瘤消退。肿瘤消退是由于由沙粒病毒造成的先天性和适应性免疫细胞的活化或刺激。活化的免疫细胞分泌增加的抗肿瘤细胞因子，诸如干扰素-α和干扰素-γ，由此对抗或摆脱肿瘤。另一个惊人发现是，在肿瘤表现的情况下，沙粒病毒造成抗肿瘤细胞因子的分泌显著增加。没有基因组外来RNA的沙粒病毒因而适合用在肿瘤治疗中。这已经由申请人借助于动物实验成功地验证。为此目的，使用了尤其是小鼠，人肿瘤在其中的生长是可能的。在另一个实施方案中，所述沙粒病毒也不含有非基因组外来RNA。在本专利技术的上下文中，表述“非基因组外来RNA”应被理解为是指这样的在沙粒病毒基因组外的RNA或RNA序列：其不发生在或不存在于野生型沙粒病毒或野生型沙粒病毒的突变体（突变的沙粒病毒）中，尤其是野生型沙粒病毒的天然突变体（天然地突变的沙粒病毒）中。换而言之，在该实施方案中，所述沙粒病毒在整体上不包含外来RNA，也就是说既不包含基因组外来RNA也不包含非基因组外来RNA。在一个优选的实施方案中，所述沙粒病毒是野生型沙粒病毒。在另一个实施方案中，所述沙粒病毒是野生型沙粒病毒的天然突变体，即天然地突变的沙粒病毒。所述天然突变体或所述天然地突变的沙粒病毒优选地通过在宿主动物和/或宿主细胞中传代、尤其是多次传代制备。所述天然突变体或所述天然地突变的沙粒病毒特别优选地通过在宿主动物和/或宿主细胞本文档来自技高网...

【技术保护点】
用于治疗和/或预防肿瘤的沙粒病毒，其特征在于，所述沙粒病毒不含有基因组外来RNA。

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】2015.04.17 DE 102015207036.01.用于治疗和/或预防肿瘤的沙粒病毒，其特征在于，所述沙粒病毒不含有基因组外来RNA。2.根据权利要求1中所述的沙粒病毒，其特征在于，所述沙粒病毒是野生型沙粒病毒。3.根据权利要求1中所述的沙粒病毒，其特征在于，所述沙粒病毒是天然突变体。4.根据前述权利要求中的任一项中所述的沙粒病毒，其特征在于，所述沙粒病毒从它的野生型形式开始通过在宿主动物和/或宿主细胞中连续传代来制备。5.根据前述权利要求中的任一项中所述的沙粒病毒，其特征在于，所述肿瘤选自包含癌、黑素瘤、母细胞瘤、淋巴瘤或肉瘤或由它们组成的组。6.根据权利要求5中所述的沙粒病毒，其特征在于，所述癌选自包含肛门癌、支气管癌、肺癌、子宫内膜癌、胆囊癌、肝细胞癌、睾丸癌、结肠直肠癌、喉癌、食管癌、胃癌、乳腺癌、肾癌、卵巢癌、胰腺肿瘤、咽癌、前列腺癌、甲状腺癌、黑素瘤和宫颈癌或由它们组成的组。7.根据权利要求5中所述的沙粒病毒，其特征在于，所述肉瘤选自包含血管肉瘤、软骨肉瘤、尤文肉瘤、纤维肉瘤、卡波西肉瘤、脂肪肉瘤、平滑肌肉瘤、恶性纤维组织细胞瘤、神经源性肉瘤、骨肉瘤和横纹肌肉瘤或由它们组成的组。8.根据前述权利要求中的任一项中所述的沙粒病毒，其特征在于，所述沙粒病毒是旧大陆沙粒病毒，其优选地选自包含伊派病毒、拉沙病毒、淋巴细胞性脉络丛脑膜炎病毒、莫巴拉病毒和莫佩亚病毒或由它们组成的组。9.根据前述权利要求中的任一项中所述的沙粒病毒，其特征在于，所述沙粒病毒是淋巴细胞性脉络丛脑膜炎病毒。10.根据权利要求1-7中的任一项中所述的沙粒病毒，其特征在于，所述沙粒病毒是新大陆沙粒病毒，其优选地选自包含奥尔帕瓦约病毒、阿马帕里病毒、熊峡谷病毒、Chapare病毒、库皮科斯病毒、Flexal病毒、瓜纳瑞托病毒、胡宁病毒、...

【专利技术属性】
技术研发人员：卡尔·塞班斯坦·兰，H卡尔卡万，
申请(专利权)人：卡尔·塞班斯坦·兰，
类型：发明
国别省市：德国,DE