一种测定万寿菊提取物中叶黄素含量的方法技术

本发明专利技术公开了一种测定万寿菊提取物中叶黄素含量的方法，包括以下步骤：标准曲线的制备；流动相：A相由乙腈、乙醇、乙酸乙酯混合所得，重量之比依次是1000‑800：500‑450：300‑100；B相由水、丙酮、三乙胺混合所得，重量之比依次是800‑650：450‑100：3‑0.5；梯度洗脱：记录叶黄素标准溶液每个浓度的峰面积，制作叶黄素的线性回归方程；将万寿菊提取物溶解于有机溶剂中，膜过滤，得到叶黄素待测样品，对叶黄素待测样品进行测定，记录叶黄素待测样品的峰面积，把该峰面积代入叶黄素的线性回归方程中，计算得到叶黄素待测样品中叶黄素的含量。优点：测定时间短，流动相成分的科学配比使流动相流动性好，提高测定的准确性和可重复性。

【技术实现步骤摘要】
一种测定万寿菊提取物中叶黄素含量的方法
本专利技术涉及叶黄素含量测量
，尤其是万寿菊提取物中叶黄素含量测量技术。
技术介绍
万寿菊又称臭菊花、臭芙蓉，一年生草本植物。万寿菊中的叶黄素是人眼视网膜中一种必要成分，主要起过滤蓝光的作用，抑制蓝光产生的自由基，对老年型黄斑色素退化、白内障具有抑制作用，在保护眼睛方面起到重大作用。因万寿菊中叶黄素含量较高，从万寿菊提取叶黄素的工艺逐渐发展起来，对原料的叶黄素含量是否丰富，制备后的叶黄素纯度等都是叶黄素类产品制备过程需要明确掌控的因素，专利技术一种测定万寿菊提取物中叶黄素的含量方法对提高叶黄素含量测定的可靠性、准确性、可重复性是相当重要的。
技术实现思路
本专利技术的目的在于提供一种万寿菊提取叶黄素制备工艺。为了达到上述目的本专利技术采用如下技术方案：一种测定万寿菊提取物中叶黄素含量的方法，包括以下步骤：(1)标准曲线的制备；用有机溶剂把叶黄素标准品制备成一系列标准液，进行高效液相色谱测试：C30高效液相色谱柱；流动相：A相由乙腈、乙醇、乙酸乙酯混合所得，重量之比依次是1000-800：500-450：300-100；B相由水、丙酮、三乙胺混合所得，重量之比依次是800-650：450-100：3-0.5；梯度洗脱：0-1min：流动相A的体积分数是100％，流动相B的体积分数是0；1-10min：流动相A的体积分数是70％，流动相B的体积分数是30％；10-17min：流动相A的体积分数是50％，流动相B的体积分数是50％；17-20min：流动相A的体积分数是0％，流动相B的体积分数是100％；20-23min：流动相A的体积分数是100％，流动相B的体积分数是0；(2)记录叶黄素标准溶液每个浓度的峰面积，以叶黄素的峰面积为纵坐标，以叶黄素的浓度为横坐标，制作叶黄素的线性回归方程；(3)万寿菊提取物中叶黄素含量测定：将万寿菊提取物溶解于有机溶剂中，膜过滤，得到叶黄素待测样品，按照步骤(1)的色谱条件对叶黄素待测样品进行测定，记录叶黄素待测样品的峰面积，把该峰面积代入叶黄素的线性回归方程中，计算得到叶黄素待测样品中叶黄素的含量。进一步地，所述步骤(1)和步骤(3)的有机溶剂是丙酮和甲醇，两者的体积之比是4-2：1-3。进一步地，所述步骤(3)的膜过滤是采用膜孔为0.30-0.40微米的膜。进一步地，所述步骤(3)中把万寿菊提取物溶解于有机溶剂中，经过超声震荡，再进行膜处理。进一步地，所述超声功率是100-200W，超声频率是15-35KHz，震荡时长15-20min。进一步地，所述高效液相色谱测试中使用的高效液相色谱柱规格是4.6mm*100mm，填料直径是2.0um。进一步地，所述高效液相色谱柱的柱温是32℃，进样体积是6ul，流动相流速是0.3-0.35ml/min。本专利技术的优点主要在于：测定时间短，高效液相色谱测定过程不超过23min；流动相成分的科学配比使流动相流动性好，不会在测试过程中把样品附在高效液相色谱柱上，提高类测定的准确性和可重复性。具体实施方式下面将结合具体实施例来详细说明本专利技术，在此以本专利技术的示意性实施例及说明用来解释本专利技术，但并不作为对本专利技术的限定。实施例一一种测定万寿菊提取物中叶黄素含量的方法，包括以下步骤：(1)标准曲线的制备；用有机溶剂把叶黄素标准品制备成一系列标准液，进行高效液相色谱测试：C30高效液相色谱柱；流动相：A相由乙腈、乙醇、乙酸乙酯混合所得，重量之比依次是1000：500：300；B相由水、丙酮、三乙胺混合所得，重量之比依次是800：450：3；梯度洗脱：0-1min：流动相A的体积分数是100％，流动相B的体积分数是0；1-10min：流动相A的体积分数是70％，流动相B的体积分数是30％；10-17min：流动相A的体积分数是50％，流动相B的体积分数是50％；17-20min：流动相A的体积分数是0％，流动相B的体积分数是100％；20-23min：流动相A的体积分数是100％，流动相B的体积分数是0；(2)记录叶黄素标准溶液每个浓度的峰面积，以叶黄素的峰面积为纵坐标，以叶黄素的浓度为横坐标，制作叶黄素的线性回归方程；(3)万寿菊提取物中叶黄素含量测定：将万寿菊提取物溶解于有机溶剂中，膜过滤，得到叶黄素待测样品，按照步骤(1)的色谱条件对叶黄素待测样品进行测定，记录叶黄素待测样品的峰面积，把该峰面积代入叶黄素的线性回归方程中，计算得到叶黄素待测样品中叶黄素的含量。所述步骤(1)和步骤(3)的有机溶剂是丙酮和甲醇，两者的体积之比是4：1。所述步骤(3)的膜过滤是采用膜孔为0.30微米的膜。所述步骤(3)中把万寿菊提取物溶解于有机溶剂中，经过超声震荡，再进行膜处理。所述超声功率是100W，超声频率是15KHz，震荡时长15min。所述高效液相色谱测试中使用的高效液相色谱柱规格是4.6mm*100mm，填料直径是2.0um。所述高效液相色谱柱的柱温是32℃，进样体积是6ul，流动相流速是0.3ml/min。实施例二一种测定万寿菊提取物中叶黄素含量的方法，包括以下步骤：(1)标准曲线的制备；用有机溶剂把叶黄素标准品制备成一系列标准液，进行高效液相色谱测试：C30高效液相色谱柱；流动相：A相由乙腈、乙醇、乙酸乙酯混合所得，重量之比依次是900：450：150；B相由水、丙酮、三乙胺混合所得，重量之比依次是750：300：2；梯度洗脱：0-1min：流动相A的体积分数是100％，流动相B的体积分数是0；1-10min：流动相A的体积分数是70％，流动相B的体积分数是30％；10-17min：流动相A的体积分数是50％，流动相B的体积分数是50％；17-20min：流动相A的体积分数是0％，流动相B的体积分数是100％；20-23min：流动相A的体积分数是100％，流动相B的体积分数是0；(2)记录叶黄素标准溶液每个浓度的峰面积，以叶黄素的峰面积为纵坐标，以叶黄素的浓度为横坐标，制作叶黄素的线性回归方程；(3)万寿菊提取物中叶黄素含量测定：将万寿菊提取物溶解于有机溶剂中，膜过滤，得到叶黄素待测样品，按照步骤(1)的色谱条件对叶黄素待测样品进行测定，记录叶黄素待测样品的峰面积，把该峰面积代入叶黄素的线性回归方程中，计算得到叶黄素待测样品中叶黄素的含量。所述步骤(1)和步骤(3)的有机溶剂是丙酮和甲醇，两者的体积之比是3：2。所述步骤(3)的膜过滤是采用膜孔为0.35微米的膜。所述步骤(3)中把万寿菊提取物溶解于有机溶剂中，经过超声震荡，再进行膜处理。所述超声功率是150W，超声频率是30KHz，震荡时长20min。所述高效液相色谱测试中使用的高效液相色谱柱规格是4.6mm*100mm，填料直径是2.0um。所述高效液相色谱柱的柱温是32℃，进样体积是6ul，流动相流速是0.35ml/min。实施例三一种测定万寿菊提取物中叶黄素含量的方法，包括以下步骤：(1)标准曲线的制备；用有机溶剂把叶黄素标准品制备成一系列标准液，进行高效液相色谱测试：C30高效液相色谱柱；流动相：A相由乙腈、乙醇、乙酸乙酯混合所得，重量之比依次是800：450：100；B相由水、丙酮、三乙胺混合所得，重量之比依次是650：100：0.5；梯度洗脱：0-1本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种测定万寿菊提取物中叶黄素含量的方法，其特征在于：包括以下步骤：(1)标准曲线的制备；用有机溶剂把叶黄素标准品制备成一系列标准液，进行高效液相色谱测试：C30高效液相色谱柱；流动相：A相由乙腈、乙醇、乙酸乙酯混合所得，重量之比依次是1000‑800：500‑450：300‑100；B相由水、丙酮、三乙胺混合所得，重量之比依次是800‑650：450‑100：3‑0.5；梯度洗脱：0‑1min：流动相A的体积分数是100％，流动相B的体积分数是0；1‑10min：流动相A的体积分数是70％，流动相B的体积分数是30％；10‑17min：流动相A的体积分数是50％，流动相B的体积分数是50％；17‑20min：流动相A的体积分数是0％，流动相B的体积分数是100％；20‑23min：流动相A的体积分数是100％，流动相B的体积分数是0；(2)记录叶黄素标准溶液每个浓度的峰面积，以叶黄素的峰面积为纵坐标，以叶黄素的浓度为横坐标，制作叶黄素的线性回归方程；(3)万寿菊提取物中叶黄素含量测定：将万寿菊提取物溶解于有机溶剂中，膜过滤，得到叶黄素待测样品，按照步骤(1)的色谱条件对叶黄素待测样品进行测定，记录叶黄素待测样品的峰面积，把该峰面积代入叶黄素的线性回归方程中，计算得到叶黄素待测样品中叶黄素的含量。...

【技术特征摘要】
1.一种测定万寿菊提取物中叶黄素含量的方法，其特征在于：包括以下步骤：(1)标准曲线的制备；用有机溶剂把叶黄素标准品制备成一系列标准液，进行高效液相色谱测试：C30高效液相色谱柱；流动相：A相由乙腈、乙醇、乙酸乙酯混合所得，重量之比依次是1000-800：500-450：300-100；B相由水、丙酮、三乙胺混合所得，重量之比依次是800-650：450-100：3-0.5；梯度洗脱：0-1min：流动相A的体积分数是100％，流动相B的体积分数是0；1-10min：流动相A的体积分数是70％，流动相B的体积分数是30％；10-17min：流动相A的体积分数是50％，流动相B的体积分数是50％；17-20min：流动相A的体积分数是0％，流动相B的体积分数是100％；20-23min：流动相A的体积分数是100％，流动相B的体积分数是0；(2)记录叶黄素标准溶液每个浓度的峰面积，以叶黄素的峰面积为纵坐标，以叶黄素的浓度为横坐标，制作叶黄素的线性回归方程；(3)万寿菊提取物中叶黄素含量测定：将万寿菊提取物溶解于有机溶剂中，膜过滤，得到叶黄素待测样品，按照步骤(1)的色谱条件对叶黄素待测样品进行测定，记录叶黄素待测样品的...

【专利技术属性】
技术研发人员：常月红，
申请(专利权)人：广州市辉乐医药科技有限公司，
类型：发明
国别省市：广东,44