利用近红外光谱检测血浆灭活袋中亚甲蓝释放量的方法技术

本发明专利技术涉及一种近红外光谱检测仪，包括一透射平台，透射平台包括一基板，基板上竖直设有两块相互平行的竖板，两块竖板上各开设有相对应的透射窗，透射窗覆盖有透明的光学窗片，两块竖板之间设有一载物台，待测物位于两个光学窗片之间，至少一个竖板可沿基板的表面滑动，使得待测物夹持在两个光学窗片之间。本发明专利技术还涉及一种利用近红外光谱检测血浆灭活袋中亚甲蓝释放量的方法，包括：将两个光学窗片之间的光程固定为2.0‑5.0mm；将血浆灭活袋放在载物台上，对多个血浆标准溶液进行近红外光谱检测，利用PLS法建立亚甲蓝释放量的多变量分析模型；对未知样品进行近红外光谱检测，利用分析模型分析亚甲蓝的释放量。

【技术实现步骤摘要】
利用近红外光谱检测血浆灭活袋中亚甲蓝释放量的方法
本专利技术涉及生物检测领域，尤其涉及一种利用近红外光谱检测血浆灭活袋中亚甲蓝释放量的方法。
技术介绍
为了防止输血感染病毒，临床用血浆广泛采用亚甲蓝光照法对血浆病毒进行灭活，这是我国唯一获准在临床使用的单人份血液成分病毒灭活技术。灭活过程在血浆灭活袋中进行，而血浆灭活袋中灭活剂亚甲蓝的释放，是在无菌条件下血浆流经亚甲蓝存贮器时通过逐渐溶解而与血浆一同进入灭活袋，该过程即为亚甲蓝的释放过程，其释放量是决定病毒灭活程度的关键参量。然而，该释放量与多种因素有关，包括流速、环境温度、亚甲蓝的吸湿程度、以及存贮器中固载亚甲蓝的材料、生产工艺等等。若血浆灭活袋中亚甲蓝的释放量过高，则血浆中亚甲蓝残留量过大，易于导致累积毒性；若释放量过低，又不能保证其病毒灭活效果。大量数据表明，病毒灭活剂亚甲蓝必须保证在一个很窄的释放量范围，我国规定为0.9-1.3μmol/L。为了尽可能方便、快速、灵敏地检测释放量，已经出现了大量的基于取样检测的方法，包括固相提取—分光光度法、增敏荧光光谱法、HPLC、化学发光法、共振瑞利散射光谱法。取样检测需要使用抽取装置从血浆灭活袋中抽取样品进行检测，由于抽取操作将对血浆灭活袋造成损伤，这种有损检测方法在取样时极易导致血浆二次污染，包括细菌、化学污染物、以及颗粒物，造成血浆灭活袋中的血浆不能再用于人体，造成了血浆的浪费。也正是基于此，经释放量检测的血浆也就不能再用于临床。因此，对于每一袋应用于临床的血浆，不可能均进行这样的基于有损检测的灭活质量控制。事实上，血浆灭活袋中血浆的质量可靠与否仅仅是一个统计结果。对灭活袋中亚甲蓝释放量的无损检测，即是实现每一袋血浆灭活质量控制的关键问题。目前，通常利用近红外光谱法进行样品的无损快速检测，以适用于生产过程的质量控制。其中，漫反射近红外光谱进行样品的无损检测是应该最为广泛的，但是这种方法有一定的局限性：首先该方法一般适用于固体、粉末、膏状体，对于液体样品则难以适用，由于光照射入液体以后只产生极弱的漫反射光，大部分甚至全部为透射光，因此难以根据其漫反射近红外光谱进行液体中的某种物质的定量检测。对于现有的对液体中的物质进行快速定量的近红外光谱检测法，通常需要从被检容器中取样进行检测，主要包括两种方式。第一种，将取得的液体样品置于比色皿中，然后放入仪器的比色皿架进行检测；第二种，将具有狭缝的液体光纤探头插入被检容器的液体之中，被检液体直接流入作为比色皿的光纤探头的狭缝之中，以实现取样操作，而光纤将信号再传输进行光谱仪，以实现快速检测。无论是两种之中的哪一种方式，均为有损检测方法，这种方法的缺陷在上文中已经详述。而使用现有的红外光谱仪对血浆袋直接进行检测会遇到很大的难题，首先，血浆灭活袋中含有较多气泡，这些气泡若处于检测区域会使得测量结果产生很大的误差；其次，血浆灭活袋直接检测时，由于袋体较软，其形状不规则，光谱检测的光程难以固定，利用定量公式难以计算待测物的含量。当然，灭活袋中的血浆含有大量的生物大分子，其中的碳氢键会产生大量的近红外光谱信号，也将干扰检测结果，对检测方法带来一定困难。
技术实现思路
为解决上述技术问题，本专利技术的目的是提供一种利用近红外光谱检测血浆灭活袋中亚甲蓝释放量的方法，该方法克服了现有技术难以准确对形状不规则的样品进行近红外定量的缺陷，实现了血浆灭活袋中的亚甲蓝释放量的无损、快速、准确分析。在一方面，本专利技术提供了一种近红外光谱检测仪，包括光源、单色器、检测器和计算机处理信息系统，还包括一透射平台，透射平台包括一基板，基板上竖直设有两块相互平行的第一竖板和第二竖板，第一竖板和第二竖板上各开设有相对应的透射窗，透射窗覆盖有透明的光学窗片，且光学窗片位于两块竖板相对的侧面上，第一竖板和第二竖板之间设有一载物台，用于承载盛有待测物的软袋，且该载物台位于光学窗片下沿的下方，盛有待测物的软袋位于两个光学窗片之间，至少一个竖板可沿所述基板的表面水平移动，使得盛有待测物的软袋夹持在两个光学窗片之间且两个光学窗片之间的光程可以调整。进一步地，载物台位于光学窗片下沿以下至少2cm。进一步地，第一竖板与基板固定连接，载物台与第一竖板固定连接，第二竖板上开设有正对载物台的条形孔，条形孔与载物台的形状相适配，载物台可滑动插入条形孔中。进一步地，基板上固定连接有导轨，第二竖板可沿导轨水平滑动并可锁定于导轨的任一位置，从而固定两个光学窗片之间距离(即光程)。进一步地，第二竖板远离第一竖板的一面上固定连接有一定位台，第二竖板通过定位台与导轨滑动连接，定位台螺纹连接有一螺杆，螺杆的轴向与第二竖板相垂直，导轨上固定连接有一固定挡板，固定挡板开设一通孔，螺杆穿设于通孔内。进一步地，光学窗片的材质为石英或光学玻璃。进一步地，透射窗呈矩形。进一步地，光学窗片的面积大于透射窗的面积。在另一方面，本专利技术还提供了一种利用近红外光谱检测血浆灭活袋中亚甲蓝释放量的方法，采用上述近红外光谱检测仪，包括以下步骤：(1)调整第一竖板和第二竖板之间的距离，使两个光学窗片之间的光程固定为2.0-5.0mm；优选地，光程为3.5mm；(2)将血浆灭活袋放在近红外光谱检测仪的载物台上并使其位于两个光学窗片之间，并在袋的上方轻微用力挤压，使血浆灭活袋紧密地与两个光学窗片接触，且血浆灭活袋的被挤压后形成规则的平面并将其表面压成平面，其中血浆灭活袋中盛有已知亚甲蓝含量的血浆标准溶液；(3)在波数4000-10000cm-1的条件下对血浆标准溶液进行近红外光谱检测，重复测试多个样本，根据多个样本的近红外光谱检测结果，利用PLS法建立亚甲蓝释放量的多变量分析模型；(4)将待测的含亚甲蓝的血浆灭活袋放在所述载物台上，并在袋的上方轻微用力挤压，使血浆灭活袋紧密地与两个光学窗片接触，且血浆灭活袋被挤压后形成规则的平面；(5)在波数4000-10000cm-1的条件下进行近红外光谱检测，利用所述亚甲蓝释放量的多变量分析模型确定血浆灭活袋中亚甲蓝的释放量。进一步地，在步骤(2)中，血浆标准溶液中亚甲蓝的浓度为0.312μmol/L-2.959μmol/L。进一步地，在步骤(3)中，血浆标准溶液的个数为52个。进一步地，在步骤(3)和步骤(5)中，近红外光谱检测的近红外光扫描分辨率为8cm-1，扫描次数为32次，扫描速度为0.3165。进一步地，在步骤(3)和步骤(5)中，近红外光谱检测的扫描光圈为22，增益为1。进一步地，在步骤(3)和步骤(5)中，近红外光谱检测后，选择3999.7-4265.8cm-1区间的吸光度均值作为漂移量，对检测的近红外光谱进行漂移消除。进一步地，在步骤(3)和步骤(5)中，近红外光谱检测后，选择5350-6600cm-1和7200-10001cm-1两个区间的吸光度作为富信息光谱。优选地，近红外检测后，选择5827.9-6464.3cm-1和7467.1-9009.9cm-1两个区间的吸光度作为富信息光谱。进一步地，在步骤(3)中，选择主成分数为11，按浓度的高低分布随机选择11个样本为预测集，以剩余的41个样本为校正集，利用PLS法建立亚甲蓝释放量的多变量分析模型。进一步地，亚甲蓝释放量的多变量分析模型的公式为：c＝k1A1+k2A2+本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种近红外光谱检测仪，包括光源、单色器、检测器和计算机处理信息系统，其特征在于：所述红外光谱仪还包括一透射平台，所述透射平台包括一基板，所述基板上竖直设有两块相互平行的第一竖板和第二竖板，所述第一竖板和第二竖板上各开设有相对应的透射窗，所述透射窗覆盖有透明的光学窗片，且所述光学窗片位于两块竖板相对的侧面上，所述第一竖板和第二竖板之间设有一载物台，用于承载盛有待测物的软袋，所述载物台位于光学窗片下沿的下方，所述盛有待测物的软袋位于两个光学窗片之间，至少一个竖板可沿所述基板的表面水平移动，使所述盛有待测物的软袋夹持在两个光学窗片之间且两个光学窗片之间的光程可以调整。

【技术特征摘要】
1.一种近红外光谱检测仪，包括光源、单色器、检测器和计算机处理信息系统，其特征在于：所述红外光谱仪还包括一透射平台，所述透射平台包括一基板，所述基板上竖直设有两块相互平行的第一竖板和第二竖板，所述第一竖板和第二竖板上各开设有相对应的透射窗，所述透射窗覆盖有透明的光学窗片，且所述光学窗片位于两块竖板相对的侧面上，所述第一竖板和第二竖板之间设有一载物台，用于承载盛有待测物的软袋，所述载物台位于光学窗片下沿的下方，所述盛有待测物的软袋位于两个光学窗片之间，至少一个竖板可沿所述基板的表面水平移动，使所述盛有待测物的软袋夹持在两个光学窗片之间且两个光学窗片之间的光程可以调整。2.根据权利要求1所述的近红外光谱检测仪，其特征在于：所述第一竖板与所述基板固定连接，所述载物台与所述第一竖板固定连接，所述第二竖板上开设有正对所述载物台的条形孔，所述条形孔与所述载物台的形状相适配，所述载物台可滑动插入所述条形孔中。3.根据权利要求1所述的近红外光谱检测仪，其特征在于：所述基板上固定连接有导轨，所述第二竖板可沿所述导轨水平滑动并可锁定于导轨的任一位置。4.根据权利要求1所述的近红外光谱检测仪，其特征在于：所述光学窗片的材质为石英或光学玻璃。5.一种利用近红外光谱检测血浆灭活袋中亚甲蓝释放量的方法，其特征在于，采用权利要求1-4中任一项所述的近红外光谱检测仪，包括以下步骤：(1)调整所述第一竖板和第二竖板之间的距离，使两个光学窗片之间的光程固定为2.0-5.0mm；(2)将血浆灭活袋放在所述近红外光谱检测仪的载物台上并使其位于两个光学窗片之间，使血浆灭活袋紧密地与两个光学窗片接触，其中所述血浆灭活袋中盛有已知亚甲蓝含量的血浆标准溶液；(3)...

【专利技术属性】
技术研发人员：徐军，周群刚，谢莲，谢洪平，王明元，郑然，曹燕，沈湘君，
申请(专利权)人：苏州市中心血站，苏州大学，
类型：发明
国别省市：江苏,32