银杏内酯组合物的医药用途制造技术

本发明专利技术提供了银杏内酯组合物在制备预防/治疗额颞叶失智症药物中的应用。通过实验证明银杏内酯组合物剂量依赖性抑制额颞叶失智症患者外周血淋巴细胞的活力，抑制淋巴细胞中TDP‑43蛋白的磷酸化，从而可通过抑制TDP‑3蛋白磷酸化促进活化的TDP‑43蛋白由胞浆到胞核移位，减少胞浆中TDP‑43蛋白的积累，以及通过降低淋巴细胞中CDK6蛋白的表达从而抑制细胞增殖。同时实验还证明银杏内酯组合物剂量依赖性抑制依他尼酸EA诱导损伤的人神经母细胞瘤细胞的增殖，抑制细胞中TDP‑43蛋白的磷酸化和降低细胞中CDK6蛋白的表达。因此，银杏内酯组合物具有制备成缓解额颞叶失智症药物的作用与应用价值。

The pharmaceutical use of ginkgolide composition

The invention provides ginkgolide compositions for the preparation of drugs for preventing and treating frontotemporal dementia. The experiment shows that ginkgolide composition can inhibit the activity of peripheral blood lymphocytes in the patients with temporal lobe dementia and inhibit the phosphorylation of TDP 43 protein in the lymphocytes, which can reduce the TDP protein 43 protein in the cytoplasm by inhibiting the phosphorylation of the TDP protein protein to promote the activation of the activated TDP 43 protein from the cytoplasm to the nucleus. Accumulation and inhibition of cell proliferation by decreasing the expression of CDK6 protein in lymphocytes. At the same time, the experiment also proved that the dose dependent inhibition of ginkgolide composition on the proliferation of human neuroblastoma cells induced by EA, inhibited the phosphorylation of TDP 43 protein in the cells and reduced the expression of CDK6 protein in the cells. Therefore, ginkgolide composition has the function and application value in preparing drugs for alleviating frontotemporal dementia.

【技术实现步骤摘要】
银杏内酯组合物的医药用途
本专利技术属于涉及医药
，特别是涉及银杏内酯组合物在治疗/预防额颞叶失智症中的应用。
技术介绍
额颞叶失智症(frontotemporallobardegeneration，FTLD)是一种隐匿起病、进行性的神经退行性疾病，是仅次于阿尔茨海默病(Alzheimer’sdisease，AD)的第二大常见的早发型痴呆类型，临床上以进行性行为改变、额叶执行功能损害和(或)语言障碍为主要特点。FTLD分为三种主要的临床综合征：行为变异型FTLD、语义性痴呆和进行性非流利型失语。而依据脑中沉积的蛋白包涵体的主要成分进行划分，50％患者属于泛素阳性包涵体额颞叶变性(ubiquitin-positive，tau-，andα-synuclein-negativefrontotemporaldementia，FTLD-UnowreferredtoasFTLD-TDP)，其蛋白包涵体中的主要病理蛋白是反式激活-反应性DNA结合蛋白-43(transactiveresponseDNA-bindingproteinof43kuTDP-43)。FTLD发病年龄相对较早，在60岁和70岁达到高峰，且进展较快，迄今无治疗FTLD的特异性药物，给患者家属及照料者增加了很多负担。TDP-43是由TARDBP编码的高度保守的核蛋白，具有DNA/RNA结合能力的多功能蛋白，参与转录抑制、RNA剪接和应激反应过程中的RNA代谢。TDP-43是肌萎缩性侧索硬化症(amyotrophiclateralsclerosis，ALS)和泛素阳性包涵体额颞叶变性中细胞内泛素化包涵体的主要蛋白质。除了ALS和FTLD-TDP外，病理性TDP-43被发现还存在于其他多种神经退行性疾病中，包括路易体病、Guam-帕金森综合征、皮质基底节变性、AD、佩里综合征和海马硬化症(hippocampalsclerosis，HS)等，因此，目前认为TDP-43是神经退行性疾病的主要病理学标志蛋白。神经病理学和遗传学的证据表明，TDP-43是额颞叶变性病理中泛素化胞浆包涵体的主要蛋白，也是与生长因子颗粒蛋白前体(progranulin，GRN)基因突变有关的的神经病理学标志。生理状态下TDP-43主要定位于胞核，在FTLD病理情况下，TDP-43在Ser409/410位点被过度磷酸化，且由胞核移位至胞质。磷酸化的TDP-43蛋白可调节依赖细胞周期蛋白的激酶6(CDK-6)的表达，改变细胞周期，导致细胞的增殖活化，最终引起细胞损伤。同时，已有研究报道表明，激活的CDK-6通路可通过降低细胞中线粒体的通透性，抑制细胞色素C由线粒体到胞浆的释放以及降低凋亡执行蛋白的活性等途径抑制FTLD-TDP患者外周血淋巴细胞的凋亡从而刺激淋巴细胞的增殖活化。因此，FTLD-TDP患者外周血淋巴细胞模型成为深入研究FTLD疾病病理机制以及评价治疗FTLD的新型药物药效活性的简单且可靠的平台。有大量证据表明，活性氧(ROS)和氧化应激与许多神经退行性疾病包括ALS有关，且谷胱甘肽耗竭增强细胞的氧化应激谷胱甘肽耗竭诱导的氧化应激能够导致TDP-43C-末端在Ser403/404和409/410位点的磷酸化，C-末端片段，在NSC34细胞和原代皮层神经元胞浆中分布。有研究表明EA能够通过上述机制诱导TDP-43病理改变。银杏叶提取物是目前国际上使用最为广泛的中药提取物之一，其中银杏内酯是银杏叶提取物及其制剂主要的药效活性成分，具有拮抗血小板活化聚集、降脂、抗炎、抗过敏、抗肿瘤、保护神经系统等广泛的药理作用。目前还未见银杏叶提取物能对额颞叶失智症具有治疗或预防作用的相关报道。
技术实现思路
本专利技术以在两种细胞模型上进行验证的方式对银杏内酯组合物进行研究，旨在得到一种具有治疗或预防额颞叶失智症的银杏内酯组合物。由此，本专利技术提出了银杏内酯组合物在制备治疗或预防额颞叶失智症药物中的应用。具体地，额颞叶失智症包括行为变异型额颞叶失智症、语义性痴呆和/或进行性非流利型失语等情形。本专利技术还提出了一种银杏内酯组合物在改善p-TDP-43蛋白过表达引起的神经细胞退行性疾病药物中的应用。过表达是指，TDP-43在Ser409/410位点被过度磷酸化转移至胞浆中聚集造成细胞损伤。具体地，该银杏内酯组合物包括银杏内酯A、B、K，其中，以重量比计，银杏内酯A：银杏内酯B：银杏内酯K＝(20～40)：(50～75):(0.2～5)。进一步地，以重量比计，银杏内酯A：银杏内酯B：银杏内酯K＝(20～35)：(50～70):(0.5～4)。更进一步地，以重量比计，银杏内酯A：银杏内酯B：银杏内酯K＝(20～30)：(50～65):(0.8～4)。进一步地，上述额颞叶失智症药物或TDP-43蛋白活化引起的神经细胞退行性疾病药物中，银杏内酯组合物静脉滴注注射治疗有效量推荐为0.2-0.8mg/kg/d以上。需要注意的是，该治疗有效量作为推荐剂量并不对剂量范围产生严格限制。本领域人员能理解，实际给药的用量可能低于上述剂量范围。针对某一对象的治疗有效量和具体治疗方案可受诸多因素的影响，包括给药对象的年龄、体重、性别、饮食、给药时间、疾病易感性、疾病进程、医生的判断。此外，本专利技术所述银杏内酯组合物可用于相关疾病的单一用药或联合用药治疗。具体地，银杏内酯组合物可以使用各种药学上可接受的辅料制备成口服给药剂型、注射给药剂型、外用给药制剂。进一步地，银杏内酯组合物可以制备成胶囊剂、片剂、粉针剂、透皮剂等等。本专利技术通过分离培养额颞叶失智症患者外周血淋巴细胞，给予银杏内酯组合物药物干预后发现银杏内酯组合物剂量依赖性抑制额颞叶失智症患者外周血淋巴细胞的增殖，抑制淋巴细胞中TDP-43蛋白的磷酸化，从而可促进活化的TDP-43蛋白由胞浆到胞核移位，减少胞浆中TDP-43蛋白的积累，以及降低淋巴细胞中CDK6蛋白的表达。同时实验还证明银杏内酯组合物剂量依赖性抑制依他尼酸(ethacrynicacid，EA)诱导损伤的人神经母细胞瘤细胞的增殖，抑制细胞中TDP-43蛋白的磷酸化和降低细胞中CDK6蛋白的表达。因此，由对于非神经细胞的细胞模型和神经细胞的细胞模型的药效均证实银杏内酯组合物具有治疗额颞叶失智症的作用。具体实施方式以下通过具体实施方式对本专利技术进行更加详细的说明，以便能够更好地理解本专利技术的方案及其各个方面的优点。然而，以下描述的具体实施方式的内容仅是说明的目的，而不是对本专利技术的限制。需要注意的是，如未注明具体条件者，均按照常规条件或制造商建议的条件进行，所用原料药或辅料，以及所用试剂或仪器未注明生产厂商者，均为可以通过市购获得的常规产品。除非另外说明，否则所有的百分数、比率、比例或份数按重量计。除非另行定义，文中所使用的所有专业与科学用语与本领域熟练人员所熟悉的意义相同。此外，任何与所记载内容相似或均等的方法及材料皆可应用与本专利技术。银杏内酯组合物对额颞叶失智症患者外周血淋巴细胞中TDP-43活性的抑制作用1、实验材料1.1药物及试剂原料银杏内酯A(GA)、银杏内酯B(GB)、银杏内酯K(GK)以及银杏内酯组合物1-4由江苏康缘药业股份有限公司自制，具体如下；人外周血淋巴细胞分离液试剂盒购自北京索莱宝科技有限公司本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种银杏内酯组合物在制备治疗或预防额颞叶失智症药物中的应用。

【技术特征摘要】
1.一种银杏内酯组合物在制备治疗或预防额颞叶失智症药物中的应用。2.根据权利要求1所述的应用，所述银杏内酯组合物包括银杏内酯A、B、K，其特征在于，以重量比计，银杏内酯A：银杏内酯B：银杏内酯K比例为(20～40)：(50～75):(0.2～5)。3.根据权利要求1所述的应用，所述银杏内酯组合物包括银杏内酯A、B、K，其特征在于，以重量比计，银杏内酯A：银杏内酯B：银杏内酯K比例为(20～35)：(50～70):(0.5～4)。4.根据权利要求1所述的应用，所述银杏内酯组合物包括银杏内酯A、B、K，其特征在于，以重量比计，银杏内酯A：银杏内酯B：银杏内酯K比例为(20～30)：(50～65):(0.8～4)。5.根据权利要求1-4任一所述的应用，其特征在于，所述额颞叶失智症包括行为变异型额颞叶失智症、语义性痴呆和/或进行性非流利型失语。...

【专利技术属性】
技术研发人员：萧伟，刘秋，王振中，许治良，周军，周建明，李芳，章晨峰，王团结，胡晗绯，
申请(专利权)人：江苏康缘药业股份有限公司，
类型：发明
国别省市：江苏,32