The present invention relates to the field of biotechnology, in particular to a Polygonatum leaf regeneration in vitro culture methods, including explant selection, adventitious bud induction, shoot proliferation, rooting and transplanting; in the technical scheme of the invention, selection of explants in tissue culture seedlings growth stage is in a bar or fine needle bud as explants, through preparation of new medium, can realize the rapid propagation of polygonatum, high repeatability, easy to obtain material, simple operation, high efficiency of reproduction, which greatly exceeded the recycled materials used in tissue culture of Polygonatum rhizome and bud single bottleneck of reproduction, can fundamentally solve the degradation cycle Polygonatum germplasm and conventional breeding, breeding rate is low, in order to meet the market demand, to alleviate the ecological pressure and factory, standardized production of seedlings.
【技术实现步骤摘要】
一种黄精叶片的离体再生培养方法
本专利技术涉及生物
,具体来一种黄精叶片的离体再生培养方法。
技术介绍
黄精系百合科黄精属多年生草本植物滇黄精(P.kingianumColl.etHemsl)、黄精(PolygonatumsibiricumRed.)或多花黄精(PolygonatumcyrtonemaHua)的干燥根茎,为名贵中药,具有宽中益气、益肾填精、滋阴润肺、生津补脾之功效。主治肺燥干咳、体虚乏力、心悸气短、久病津亏口干、糖尿病、高血压等病症。对治疗心血管疾病、结核病、慢性肝炎以及在抗菌、解毒、抗疲劳、抗衰老、降血糖、降血脂、抗肿瘤等方面均有较好的作用。黄精既可入药,又可作为保健食品,是延年益寿的佳品,在食品领域具有很大的发展前景,其需求量越来越大,野生黄精的数量远不能满足市场需求,人工种植已成为黄精发展的一个主要内容。在自然条件下,黄精靠种子和根茎进行繁殖,由于种子不易采收,发芽率低,根茎繁殖成本高,于是植物组培技术在黄精规模化育苗方面有了很好的应用。目前,在黄精组织培养领域公开了许多专利,大多集中于以黄精根茎和种子为外植体的诱导方法,所采用激素包括6-BA、TDZ、2,4-D、NAA和IAA等,为黄精组培苗的生产提供了很多依据。但是不管是采用种子或者根茎等繁殖的方法,均存在周期长,成本高等问题。
技术实现思路
本专利技术的目的是针对上述技术存在的问题,提供一种黄精叶片的离体再生培养方法,利用叶片作为材料实现黄精的快繁繁殖。为实现上述目的,本专利技术采用的技术方案是:一种黄精叶片的离体再生培养方法,步骤包括:(1)外植体选择:选择组培中处于增殖阶 ...
【技术保护点】
一种黄精叶片的离体再生培养方法,其特征在于,步骤包括:(1)外植体选择:选择组培中处于增殖阶段的丛苗,挑选长条形大苗或细针形小芽作为培养材料;(2)不定芽诱导:将步骤(1)选择的外植体材料的叶片从基部切下,接入不定芽培养基,接种时叶片横放,使基部切口的一半接入培养基中,另一半露在培养基外面,培养30‑60天;所述不定芽培养基为:MS、CPPU 0.5‑4 mg/L、2,4‑D 0‑1 mg/L、蔗糖30 g/L、琼脂4.5 g/L,pH为5.8;(3)丛生芽增殖:将上一步诱导的不定芽进行切分,单个接入增殖培养基中,培养30‑35天;所述增殖培养基为:MS、CPPU 0‑2 mg/L、2,4‑D 0‑0.5 mg/L、蔗糖30 g/L 、琼脂4.5g/L,pH为5.8;(4)生根培养:将增殖的丛芽2‑3个为一组切下,接种至生根培养基,进行生根培养13‑15天;所述生根培养基为:1/2MS、NAA 0‑1 mg/L、IBA 0‑1 mg/L、蔗糖30 g/L、琼脂4.5g/L,pH为5.8;(5)炼苗移栽:待组培苗根长2‑4 cm,根数3‑6根时,将瓶子放置在炼苗棚中培养1周后打开瓶盖,适 ...
【技术特征摘要】
1.一种黄精叶片的离体再生培养方法,其特征在于,步骤包括:(1)外植体选择:选择组培中处于增殖阶段的丛苗,挑选长条形大苗或细针形小芽作为培养材料;(2)不定芽诱导:将步骤(1)选择的外植体材料的叶片从基部切下,接入不定芽培养基,接种时叶片横放,使基部切口的一半接入培养基中,另一半露在培养基外面,培养30-60天;所述不定芽培养基为:MS、CPPU0.5-4mg/L、2,4-D0-1mg/L、蔗糖30g/L、琼脂4.5g/L,pH为5.8;(3)丛生芽增殖:将上一步诱导的不定芽进行切分,单个接入增殖培养基中,培养30-35天;所述增殖培养基为:MS、CPPU0-2mg/L、2,4-D0-0.5mg/L、蔗糖30g/L、琼脂4.5g/L,pH为5.8;(4)生根培养:将增殖的丛芽2-3个为一组切下,接种至生根培养基,进行生根培养13-15天;所述生根培养基为:1/2MS、NAA0-1mg/L、IBA0-1mg/L、蔗糖30g/L、琼脂4.5g/...
【专利技术属性】
技术研发人员:张金渝,邓清,杨维泽,杨绍兵,曾祥飞,邓先能,左应梅,杨天梅,杨美权,李纪潮,尹进超,赵露琴,
申请(专利权)人:云南省农业科学院药用植物研究所,云南澈川生物科技有限公司,
类型:发明
国别省市:云南,53
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