一种新型表面展示质粒制造技术

技术编号：1768217 阅读：308 留言：0更新日期：2012-04-11 18:40

本发明专利技术构建了可以用于解脂耶罗维亚酵母菌表面展示外源蛋白的表面展示质粒ｐＩＮＡ１３１７－１３０，大小为５７２９ｂｐ，该表面展示质粒碱基序列见附图，携带有尿嘧啶正常基因（ｕｒａ３ｄ１）、多克隆位点（Ｓｆｉ１，ＨｉｎｄⅢ，ＢａｍＨＩ和Ａｏｒ１３）和用于表面展示的ＤＮＡ插入片段ＹｌＣＷＰ１３０；在解脂耶罗维亚酵母菌细胞中该表面展示质粒是利用正常培养基成分进行诱导的表达质粒；重组质粒在每个细胞中具有多拷贝；这种质粒是整合型的，可以把目的基因插入到宿主染色体上；最终整合到染色体中的ＤＮＡ片段不含有抗生素抗性基因；该表面展示质粒可以在海洋解脂耶罗维亚酵母菌中表达和进行外源蛋白表面展示。该质粒转化到大肠埃希氏菌中，大肠埃希氏菌保藏单位简称ＣＧＭＣＣ，保藏号为ＣＧＭＣＣＮｏ．２１９０。