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一种用于Wnt反应元件的体外迷你报告基因及其应用制造技术

技术编号:17665692 阅读:64 留言:0更新日期:2018-04-11 03:28
本发明专利技术公开了一种用于Wnt反应元件(Wnt Response Elements,WREs)的体外迷你报告基因及应用。该体外迷你报告基因序列如SEQ ID NO.7所示。Wnt配体通过调控Wnt靶基因的转录,直接决定了表达Wnt配体的肿瘤的治疗后抵抗或复发转移;在此基础上,选取Wnt靶基因的多段反应元件序列,通过基因克隆构建迷你报告基因;一方面,该迷你报告基因用于预测结肠癌等Wnt相关肿瘤的复发及转移的高度危险因子;另一方面,通过该迷你报告基因,可以能够直观和高效、准确的验证和阻断该特异性目标基因位点的表达及作用。

An in vitro Mini report gene for Wnt reaction components and its application

The invention discloses a method for Wnt response element (Wnt Response Elements, WREs) in the mini gene and application. The in vitro Mini gene sequence as shown in SEQ ID NO.7. Wnt ligand through transcriptional regulation of target genes of Wnt, directly determines the treatment of expression of Wnt ligands on tumor recurrence or metastasis after resistance; on this basis, multi segment selection response element sequence of Wnt target genes by gene cloning Mini reporter gene; on the one hand, the mini report gene for high risk factors of recurrence and metastasis. Prediction of colon cancer Wnt related tumor; on the other hand, the mini gene can be intuitive and efficient, accurate verification and blocking the expression and function of the specific target gene loci.

【技术实现步骤摘要】
一种用于Wnt反应元件的体外迷你报告基因及其应用
本专利技术属于分子生物学
,具体涉及一种用于Wnt反应元件的体外迷你报告基因及其应用。
技术介绍
癌症占人类死亡病因的近1/4,在过去的几十年里肿瘤复发和转移仍是改善整体存活率的主要障碍,这可能主要归因于人们对于癌症生物学仍然缺乏全面的了解。如何及时检测癌症的发生发展成为医学领域的一个焦点问题。而Wnt信号通路与多种肿瘤的发生的发展相关。Wnt信号通路的抑制受到广泛关注的重要原因之一是很多癌症与Wnt信号的异常激活关系密切。Wnt信号通路在信号通路的各个层面均受到多种负调控因子的作用,因此Wnt信号通路的强弱是诸多蛋白因子综合作用的结果(Nusse&Clevers,2017)。哺乳动物的研究发现,在细胞外,除了Wnt信号分子本身的分泌和表达之外,还受到多种分泌蛋白的抑制。令人感兴趣的是,负反馈抑制,这一调控细胞稳态的基本机制之一,也适用于信号转导通路包括Wnt通路(Barolo&Posakony,2002)。例如,表达Dkk-1,部分SFRP和Axin的基因均直接受Wnt信号通路的调控,这些Wnt直接靶基因的调控本文档来自技高网...
一种用于Wnt反应元件的体外迷你报告基因及其应用

【技术保护点】
一种用于Wnt反应元件的体外迷你报告基因,其特征在于:其核苷酸序列如SEQ ID NO.7所示。

【技术特征摘要】
1.一种用于Wnt反应元件的体外迷你报告基因,其特征在于:其核苷酸序列如SEQIDNO.7所示。2.一种用于Wnt反应元件的体外迷你报告基因质粒,其特征在于:该质粒整合了权利要求1所述的SEQIDNO.7所示的核苷酸序列。3.权利要求2所述的用于Wnt反应元件的体外迷你报告基因质粒的构建方法,其特征在于:包括以下步骤:步骤1,以SEQIDNO.1及SEQIDNO.3所示的序列作为引物,以人类基因组DNA为模板扩增nkd的内含子序列;步骤2,以SEQIDNO.2及SEQIDNO.4所示的序列作为引物,退火形成如SEQIDNO.8所示的串联TCF结合位点序列;步骤3,以SEQIDNO.5及SEQIDNO.6所示的序列作为引物,扩增EGFP、RFP、C...

【专利技术属性】
技术研发人员:谢浩方明汪锐毕彩丽吴红燕程乾
申请(专利权)人:东南大学
类型:发明
国别省市:江苏,32

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