采用反迁移高亲和性嵌入染料通过电泳分离和检测核酸制造技术

技术编号:1765556 阅读:232 留言:0更新日期:2012-04-11 18:40
本发明专利技术提供了新的高分辨率分离和高灵敏度检测核酸的电泳方法。所述方法包括在电泳系统中采用高分辨率缓冲液和反迁移高亲和性嵌入染料以实现优良的分离和检测核酸。本发明专利技术还提供了通过电泳从样品中分离和检测核酸的试剂盒。所述试剂盒包括含高分辨率嵌入染料的凝胶缓冲液,所述嵌入染料的分辨率在271bp和282bpφχ171HAⅢ核酸片段之间至少为2.0,并且包括高亲和性嵌入染料,其具有正电荷以及DNA亲和常数至少为10↑[6]M↑[-1]。(*该技术在2023年保护过期,可自由使用*)

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】
本专利技术总体上涉及通过电泳分离和检测核酸。具体而言,本专利技术涉及采用反迁移嵌入染料进行的电泳。
技术介绍
从液体生物样品中分离和检测脱氧核糖核酸(DNA)的各种各样的方法在本领域是公知的。其中一种技术为电泳,包括当带电物质溶解或悬浮于有电流通过的电解液中时,其发生迁移。已知电泳的各种常规形式,包括自由区带电泳,凝胶电泳,等电聚焦,等速电泳,和毛细管电泳。按照惯例,核酸的分离和识别已通过凝胶电泳在诸如琼脂糖凝胶或聚丙烯酰胺凝胶的聚合物凝胶上完成。聚合物凝胶的制备类型和大小多种多样,而且孔隙度也是千变万化,因此聚合物凝胶具有广泛用途。然而,由于时间上缺乏稳定性,聚合方法的难再现性,介质的易碎性以及分离后的检测等缺陷,凝胶电泳通常不适于大规模和高速应用方面(H.-T.Chang和E.S.Yeung,J.Chromatogr.B(1995)669,113)。毛细管电泳(CE)在电泳分析核酸中代表了重要改进。例如,因为CE是在直径非常小的管(通常50-100μm)中进行的,导致局部焦耳热减少,因此可以施加比常规电泳系统大10-100倍的电场。这使电泳速度,分辨率和再现性都得以提高。此外,本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种通过电泳分离和检测样品中所含的核酸的方法,包括:(a)提供具有阳极端和阴极端的电泳系统;(b)将样品上样到系统的阴极端;(c)通过电极两端施加电压,让核酸在高分辨率缓冲液存在下从阴极端向阳极端迁移,从而分离样品中 所含的核酸,其中高分辨率缓冲液的分辨率在271bp和282bpφχ171HAⅢ核酸片段之间至少为2.0;(d)将高亲和性嵌入染料上样到系统的阳极端,其中嵌入染料具有正电荷,以及DNA亲和常数至少为10↑[6]M↑[-1],以及其中嵌 入染料在电极两端施加的电压下从阳极端向阴极端迁移,并且与分离的核酸形成复合物;以及(e)...

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】...

【专利技术属性】
技术研发人员:刘明孙陈夫泰
申请(专利权)人:贝克曼考尔特公司
类型:发明
国别省市:US[美国]

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