一种粉防己种苗的组培方法技术

本发明专利技术公开了一种粉防己种苗的组培方法，包括选取粉防己带腋芽茎段作为外植体，灭菌后接种到MS培养基中进行培养，然后进行诱导培养、继代培养、生根培养和炼苗。本发明专利技术通过诱导培养、继代培养和生根培养几个阶段的培养的组织培养方法及各组织培养阶段选择适宜的培养基，有效缩短粉防己育苗时间，提高粉防己种苗质量，在短时间内获得大量优质粉防己种苗，且该方法有效解决了粉防己繁育对块根需求量大、种子育苗发芽率低的问题。

A method of tissue culture of a kind of powder of tetrandrine

The invention discloses a tissue culture method for tetrandrine seedlings, which includes selecting the stem segments of the pink bud and the axillary bud as explants. After sterilization, it is inoculated into MS medium for culture, and then induced culture, subculture, rooting culture and seedling hardening. The present invention by inducing culture, subculture and rooting culture of several stages of tissue culture method and tissue culture selection of suitable medium, shorten the breeding time of tetrandrine, improve the seedling quality of tetrandrine, get a large number of high-quality powder in a short period of time has anti seedlings, and this method effectively solves the problem of tetrandrine the breeding of roots of high demand, low germination rate of seed seedling.

【技术实现步骤摘要】
一种粉防己种苗的组培方法
本专利技术涉及中药材栽培
，具体而言，涉及一种粉防己种苗的组培方法。
技术介绍
粉防己，又名汉防己、白木香，为防己科，千金藤属植物，多年生落叶缠绕藤本，茎纤细，有纵条纹。粉防己药用部分为粉防己干燥块茎，粉防己性寒，味苦，利水消肿，祛风止痛，用于水肿脚气、小便不利、风湿痹痛、湿疹疮毒、高血压症。目前粉防己主要以野生采集为主，由于粉防己的药用价值较高，需求量越来越大，过度采挖以及野生环境的破坏，野生资源储量越来越少，只靠野生资源难以满足市场需求。粉防己生长周期长，种子发芽率低，分根繁殖对块根需求量大，且容易造成品种退化、病虫害加重，经济效益差，难以形成大规模种植。粉防己种苗问题成为制约粉防己规模化种植的瓶颈。
技术实现思路
有鉴于此，本专利技术提供的一种粉防己种苗的组培方法，更好的克服了上述现有技术存在的问题和缺陷，该方法有效解决了粉防己繁育对块根需求量大、种子育苗发芽率低的问题，有效缩短粉防己育苗时间，提高粉防己种苗质量，在短时间内获得大量优质粉防己种苗。一种粉防己种苗的组培方法，包括以下步骤：(1)选择粉防己带腋芽茎段作为外植体，进行灭菌处理，然后将灭菌后的所述外植体接种到MS培养基中进行培养；(2)将无菌的所述无菌外植体转接到诱导培养基中进行诱导培养；(3)将经所述诱导培养的外植体转接到继代培养基中进行继代培养，得到粉防己丛生芽；(5)将所述粉防己丛生芽转接至生根培养基中进行生根培养，得到粉防己生根苗；(5)将所述粉防己生根苗进行炼苗。进一步地，步骤(1)中，在进行所述培养之前，先后进行清洗和灭菌，再切下茎段得到长度为1.5～2cm的带腋芽茎段。进一步地，所述清洗包括：用水清洗30～45min；所述灭菌包括：先用75％酒精浸泡20～40s，再用混有1～2滴土温80的0.1％升汞摇晃灭菌6～8min，最后用无菌水清洗3～5次。进一步地，步骤(1)中，所述培养采用暗培养，所述培养的温度为23～27℃，所述培养的湿度为50～55％，所述培养的时间为2～3天。进一步地，步骤(2)中，步骤(2)中，所述诱导培养基包括MS培养基、苄氨基腺嘌呤、吲哚丁酸、蔗糖和琼脂；所述苄氨基腺嘌呤的浓度为0.3～0.5mg/L，所述吲哚丁酸的浓度为0.05～0.1mg/L，所述蔗糖的浓度为25～35g/L，所述琼脂的浓度为5～7g/L；所述诱导培养包括：先暗培养7天，再在光照强度为1500～2000lx的条件下光照培养20～30天，光照时间为8～10h/d；所述诱导培养的温度为23～27℃，所述诱导培养的湿度为50～55％。进一步地，步骤(3)中，所述继代培养基包括MS培养基、苄氨基腺嘌呤、萘乙酸、蔗糖和琼脂；所述苄氨基腺嘌呤的浓度为0.3-0.5mg/L，所述萘乙酸的浓度为0.05～0.1mg/L，所述蔗糖的浓度为25～30g/L，所述琼脂的浓度为5～7g/L；所述继代培养包括：先暗培养7天，再在光照强度为1500～2000lx的条件下光照培养25～35天，光照时间为8～10h/d；所述继代培养的温度为23～27℃，所述继代培养的湿度为50～55％。进一步地，步骤(4)中，所述生根培养基包括1/2MS培养基、苄氨基腺嘌呤、萘乙酸、吲哚丁酸、蔗糖、琼脂和活性炭；所述苄氨基腺嘌呤的浓度为0.03mg/L，所述萘乙酸的浓度为0.05mg/L，所述吲哚丁酸的浓度为3.0～6.0mg/L，所述蔗糖的浓度为25～30g/L，所述琼脂的浓度为4～6g/L，所述活性炭的浓度为0.2g/L；所述生根培养包括：先暗培养15天，再在光照强度为1500～2000lx的条件下光照培养30～45天，光照时间为8～10h/d；所述生根培养的温度为23～27℃，所述生根培养的湿度为50～55％。进一步地，所述诱导培养基、继代培养基和生根培养基的pH值为5.8～6.2。进一步地，步骤(5)中，所述炼苗包括：将所述粉防己生根苗在营养杯中进行培养10～15天，所述培养的温度为25～30℃，所述培养的湿度为75～90％。进一步地，所述营养杯中的基质组分按质量百分比包括：酒精渣20～30％，蛭石35～45％，珍珠岩20～30％，鸡粪15～20％。与现有技术相比，本专利技术的一种粉防己种苗的组培方法的有益效果是：(1)本专利技术通过诱导培养、继代培养和生根培养几个阶段的培养的组织培养方法及各组织培养阶段选择适宜的培养基，有效缩短粉防己育苗时间，提高粉防己种苗质量，在短时间内获得大量优质粉防己种苗，且该方法有效解决了粉防己繁育对块根需求量大、种子育苗发芽率低的问题。为使本专利技术的上述目的、特征和优点能更明显易懂，下文特举较佳实施例，作详细说明如下。具体实施方式为了便于理解本专利技术，下面结合实施例的方式对本专利技术的技术方案做详细说明，在下面的描述中阐述了很多具体细节以便于充分理解本专利技术。但是本专利技术能够以很多不同于在此描述的其它方式来实施，本领域技术人员可以在不违背本专利技术内涵的情况下做类似改进，因此本专利技术不受下面公开的具体实施的限制。除非另有限定，本文使用的所有技术以及科学术语具有与本专利技术所属领域普通技术人员通常理解的相同的含义。当存在矛盾时，以本说明书中的定义为准。如本文所用之术语：本文中所用的术语“包含”、“包括”、“具有”、“含有”或其任何其它变形，意在覆盖非排它性的包括。例如，包含所列要素的组合物、步骤、方法、制品或装置不必仅限于那些要素，而是可以包括未明确列出的其它要素或此种组合物、步骤、方法、制品或装置所固有的要素。连接词“由……组成”排除任何未指出的要素、步骤或组分。如果用于权利要求中，此短语将使权利要求为封闭式，使其不包含除那些描述的材料以外的材料，但与其相关的常规杂质除外。当短语“由……组成”出现在权利要求主体的子句中而不是紧接在主题之后时，其仅限定在该子句中描述的要素；其它要素并不被排除在作为整体的所述权利要求之外。当量、浓度、或者其它值或参数以范围、优选范围、或一系列上限优选值和下限优选值限定的范围表示时，这应当被理解为具体公开了由任何范围上限或优选值与任何范围下限或优选值的任一配对所形成的所有范围，而不论该范围是否单独公开了。例如，当公开了范围“1～5”时，所描述的范围应被解释为包括范围“1～4”、“1～3”、“1～2”、“1～2和4～5”、“1～3和5”等。当数值范围在本文中被描述时，除非另外说明，否则该范围意图包括其端值和在该范围内的所有整数和分数。“和/或”用于表示所说明的情况的一者或两者均可能发生，例如，A和/或B包括(A和B)和(A或B)。一种粉防己种苗的组培方法，包括以下步骤：(1)选择粉防己带腋芽茎段作为外植体，进行灭菌处理，然后将灭菌后的所述外植体接种到MS培养基中进行培养；(2)将无菌的所述无菌外植体转接到诱导培养基中进行诱导培养；(3)将经所述诱导培养的外植体转接到继代培养基中进行继代培养，得到粉防己丛生芽；(5)将所述粉防己丛生芽转接至生根培养基中进行生根培养，得到粉防己生根苗；(5)将所述粉防己生根苗进行炼苗。优选地，步骤(1)中，在进行所述培养之前，先后进行清洗和灭菌，再切下茎段得到长度为1.5～2cm的带腋芽茎段。上述选取粉防己外植体具体包括：选择生长健壮、无病虫害的粉防己，于3月初取新长出的茎段中选择本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种粉防己种苗的组培方法，其特征在于：包括以下步骤：(1)选择粉防己带腋芽茎段作为外植体，进行灭菌处理，然后将灭菌后的所述外植体接种到MS培养基中进行培养；(2)将无菌的所述无菌外植体转接到诱导培养基中进行诱导培养；(3)将经所述诱导培养的外植体转接到继代培养基中进行继代培养，得到粉防己丛生芽；(5)将所述粉防己丛生芽转接至生根培养基中进行生根培养，得到粉防己生根苗；(5)将所述粉防己生根苗进行炼苗。

【技术特征摘要】
1.一种粉防己种苗的组培方法，其特征在于：包括以下步骤：(1)选择粉防己带腋芽茎段作为外植体，进行灭菌处理，然后将灭菌后的所述外植体接种到MS培养基中进行培养；(2)将无菌的所述无菌外植体转接到诱导培养基中进行诱导培养；(3)将经所述诱导培养的外植体转接到继代培养基中进行继代培养，得到粉防己丛生芽；(5)将所述粉防己丛生芽转接至生根培养基中进行生根培养，得到粉防己生根苗；(5)将所述粉防己生根苗进行炼苗。2.根据权利要求1所述的粉防己种苗的组培方法，其特征在于：步骤(1)中，在进行所述培养之前，先后进行清洗和灭菌，再切下茎段得到长度为1.5～2cm的带腋芽茎段。3.根据权利要求2所述的粉防己种苗的组培方法，其特征在于：所述清洗包括：用水清洗30～45min；所述灭菌包括：先用75％酒精浸泡20～40s，再用混有1～2滴土温80的0.1％升汞摇晃灭菌6～8min，最后用无菌水清洗3～5次。4.根据权利要求1所述的粉防己种苗的组培方法，其特征在于：步骤(1)中，所述培养采用暗培养，所述培养的温度为23～27℃，所述培养的湿度为50～55％，所述培养的时间为2～3天。5.根据权利要求1所述的粉防己种苗的组培方法，其特征在于：步骤(2)中，所述诱导培养基包括MS培养基、苄氨基腺嘌呤、吲哚丁酸、蔗糖和琼脂；所述苄氨基腺嘌呤的浓度为0.3～0.5mg/L，所述吲哚丁酸的浓度为0.05～0.1mg/L，所述蔗糖的浓度为25～35g/L，所述琼脂的浓度为5～7g/L；所述诱导培养包括：先暗培养7天，再在光照强度为1500～2000lx的条件下光照培养20～30天，光照时间为8～10h/d；所述诱导培养的温度为23～27℃，所述诱导培养的湿度为50～55％。6.根据权利要求1所述的粉防己种苗的组培方...

【专利技术属性】
技术研发人员：韦祥意，
申请(专利权)人：桂林亦元生现代生物技术有限公司，
类型：发明
国别省市：广西,45