一种固定化脂肪酶及其制备方法技术

本发明专利技术公开了一种固定化脂肪酶及其制备方法。它是将海藻酸钠和脂肪酶分别溶于缓冲液中，得到海藻酸钠溶液和脂肪酶液，按照海藻酸钠：脂肪酶＝(15～35)mg：(400～1600)U的比例将海藻酸钠溶液和脂肪酶液混合均匀，得到海藻酸钠/脂肪酶混合液，然后将海藻酸钠/脂肪酶混合液滴加到质量分数2％～6％的氯化钙溶液中，形成凝胶小球后再固定，然后过滤将凝胶小球加入到交联剂水溶液中，20℃～50℃下震荡交联0.5～3.5h，经洗涤、抽滤后得到固定化脂肪酶。本发明专利技术制备的固定化脂肪酶的酶活达84.9U/g，具有较高的热稳定性和操作稳定性，重复利用率高，符合工业应用的需要。

A immobilized lipase and its preparation method

The invention discloses a immobilized lipase and a preparation method. It is sodium alginate and lipase were dissolved in buffer, sodium alginate solution and lipase by liquid, in accordance with the sodium alginate: lipase = (15~35) mg: (400~1600) U ratio of sodium alginate solution and lipase mixed evenly, get fat sodium alginate / enzyme mixture, then the mixture of sodium alginate / lipase adding mass fraction 2% ~ 6% calcium chloride solution, the formation of gel beads and then fixed, and then filtering will be added to the gel beads of crosslinking agent in aqueous solution is 20 to 50 DEG C under the shock of crosslinking of 0.5 ~ 3.5H, the immobilized lipase obtained after washing and filtration. The immobilized lipase prepared by the invention has an enzyme activity of 84.9U/g, which has high thermal stability and operation stability, and high repetition utilization rate, which is in line with the needs of industrial application.

【技术实现步骤摘要】
一种固定化脂肪酶及其制备方法
：本专利技术属于生物化工和生物
，具体涉及一种固定化脂肪酶及其制备方法。
技术介绍
：脂肪酶(Lipase，EC3.1.1.3)是一类能催化脂肪水解的酰基水解酶的总称，能在油水界面上催化酯水解、醇解、酯合成、酯交换、立体异构体拆分等有机合成反应，其在食品、制革、洗涤、制药和环境治理等工业领域有着较为广泛的应用。作为一种新兴的可再生清洁能源，生物柴油一直是研究热点，它可以由脂肪酶催化动植物油脂、与短链脂肪醇发生酯交换反应而制备。利用脂肪酶催化生产生物柴油时，其使用成本是主要的限制因素，严重地制约着基于动植物油脂生产生物柴油的工业化进程。由于游离的脂肪酶稳定性差，相对容易受到温度、pH、离子浓度等因素的影响而失活和变性，对反应条件要求较高，且使用后分离纯化较困难，使用效率低导致成本较高，在一定程度上制约了脂肪酶的工业化使用。相较于游离酶而言，固定化酶不但与其具有相同的催化特征，且稳定性、使用效率均大幅度提高，同时又可实现连续反应和分离回收，有效降低了生物柴油等化工产品制备中脂肪酶的使用成本。因此，研究脂肪酶的固定化技术对于降低催化动植物油脂制备生物柴油本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种固定化脂肪酶的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：将海藻酸钠和脂肪酶分别溶于pH 6.0～8.5的缓冲液中，得到海藻酸钠溶液和脂肪酶液，按照海藻酸钠：脂肪酶＝(15～35)mg：(400～1600)U的比例将海藻酸钠溶液和脂肪酶液混合均匀，得到海藻酸钠/脂肪酶混合液，所述的海藻酸钠/脂肪酶混合液中海藻酸钠的含量为7.5～17.5mg/mL，然后将海藻酸钠/脂肪酶混合液滴加到质量分数2％～6％的氯化钙溶液中，形成凝胶小球后再固定，然后过滤将凝胶小球加入到体积分数0.2％～0.8％的交联剂水溶液中，20℃～50℃下震荡交联0.5～3.5h，经洗涤、抽滤后得到固定化脂肪酶；所述的交联剂为乙二醇缩...

【技术特征摘要】
1.一种固定化脂肪酶的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：将海藻酸钠和脂肪酶分别溶于pH6.0～8.5的缓冲液中，得到海藻酸钠溶液和脂肪酶液，按照海藻酸钠：脂肪酶＝(15～35)mg：(400～1600)U的比例将海藻酸钠溶液和脂肪酶液混合均匀，得到海藻酸钠/脂肪酶混合液，所述的海藻酸钠/脂肪酶混合液中海藻酸钠的含量为7.5～17.5mg/mL，然后将海藻酸钠/脂肪酶混合液滴加到质量分数2％～6％的氯化钙溶液中，形成凝胶小球后再固定，然后过滤将凝胶小球加入到体积分数0.2％～0.8％的交联剂水溶液中，20℃～50℃下震荡交联0.5～3.5h，经洗涤、抽滤后得到固定化脂肪酶；所述的交联剂为乙二醇缩水甘油醚。2.根据权利要求1所述的固定化脂肪酶的制备方法，其特征在于，所述的缓冲液为磷酸缓冲液、Tris-HCl缓冲液或巴比妥钠-盐酸缓冲液。3.根据权利要求1所述的固定化脂肪酶的制备方法，其特征在于，所述的缓冲液为pH7.0的磷酸缓冲液。4.根据权利要求1所述的固定化脂肪酶的制备方法，其特征在于，所述的海藻酸钠溶液为...

【专利技术属性】
技术研发人员：胡云峰，徐珊，李任强，郑振华，张云，孙爱君，
申请(专利权)人：中国科学院南海海洋研究所，
类型：发明
国别省市：广东,44