适合用于美容和药物用途的外用透皮糖胺聚糖制剂制造技术

本发明专利技术涉及适合用于美容和药物用途的外用透皮糖胺聚糖制剂。本发明专利技术涉及外用糖胺聚糖组合物，特别是透明质酸组合物，所述组合物促进修饰的糖胺聚糖穿透皮肤屏障进入皮肤的表皮层和真皮层，从而允许诸如透明质酸的糖胺聚糖的真皮施用，而无需注射。通过它们将透明质酸递送至表皮层和真皮层的能力，本制剂因此适合用于真皮年轻化、增强、透明质酸补充和保护治疗。所述糖胺聚糖组合物也可用作递送装置，以促进美容和药学活性物质（包括药物、多肽、蛋白和类似大小的生物大分子）穿过皮肤屏障的真皮和透皮递送。

Suitable for topical cosmetic and pharmaceutical use through skin chitosan preparation

The present invention relates to suitable for topical cosmetic and pharmaceutical use through skin chitosan preparation. The present invention relates to topical glycosaminoglycan composition, especially hyaluronic acid composition, the composition is to promote the modification of glycosaminoglycans to penetrate the skin barrier into the skin epidermis and dermis, allowing the dermal application such as glycosaminoglycan hyaluronic acid, without injection. By delivering hyaluronic acid to the epidermis and dermis, the preparation is suitable for derma, enhancements, hyaluronic acid supplementation and protection. The glycosaminoglycan composition can also be used as a delivery device to promote cosmetic and pharmaceutical active substances (including drugs, peptides, proteins and similar large biological molecules) passing through the skin barrier and deliver skin and skin.

【技术实现步骤摘要】
适合用于美容和药物用途的外用透皮糖胺聚糖制剂本申请是申请日为2011年5月4日、申请号为201180034053.X、专利技术名称为“适合用于美容和药物用途的外用透皮糖胺聚糖制剂”的专利技术专利申请的分案申请。
本专利技术涉及外用（topical）糖胺聚糖制剂，所述制剂促进糖胺聚糖（其通过脂质部分与1-10%的二糖单体单元的共价连接而修饰）穿透皮肤屏障进入皮肤的表皮层和真皮层中，由此无需注射地实现糖胺聚糖的真皮施用。具体地，通过它们的将透明质酸（hyaluronan）递送至表皮层和真皮层的能力（所述透明质酸在皮肤中保留比外部地递送的透明质酸更长时间段），本制剂因此适合用于真皮年轻化、增强、透明质酸补充和保护疗法。所述组合物也可以用作治疗化合物（包括多肽、蛋白和其它类似大小的生物大分子）的递送装置，从而促进它们穿过皮肤屏障。也提供了一种产生所述组合物的方法，其中通过使用活化剂作为限制试剂来控制脂质部分与糖胺聚糖的共价连接程度。
技术介绍
面部老化过程发生在一系列可预测的事件中，表现为皮肤体积和弹性（elastictone）的损失。皮肤体积损失（其源自许多因素，包括胶原分解）导致皮肤的皮下脂肪层、基础肌肉层和筋膜层的萎缩，促进鼻唇沟、下巴线清晰度损失和皮肤粗化。皮肤弹性损失导致松弛的、下垂的面部组织。为了抵抗这些效应，年轻化手术尝试修正体积损失和组织品质，以导致处理过的皮肤的天然外观。这些手术可能涉及组织填充剂的使用（例如，胶原注射）、或由“提升”外科手术提供的紧绷以及其它选择，它们单独使用或联合使用。许多暂时性的组织填充剂（诸如胶原、透明质酸和羟磷灰石）目前是可得到的，但是，这些填充剂通过一系列注射来施用，且仅提供暂时效应，在胶原和透明质酸的情况下，通常不能延续超过12个月。更长期的解决方案诸如羟磷灰石（其可以持续2-5年）也包括脂肪自身移植术（持续1-3年），其使用皮下脂肪细胞来修正面部体积损失和下垂，以恢复面部皮肤的更年轻的外观1,2,3。注射处理的后效应（其可以持续多达1周）可以包括：肿胀、发红、疼痛、伤痕和压痛。另外，所述处理需要通过多次注射来熟练地应用，并带来在注射部位处感染的风险。在提供皮肤的年轻外观中，角质形成细胞可能是最重要的细胞类型。因而，它们是维持皮肤水合所必需的，且对环境因素（诸如紫外线辐射）的老化效应特别敏感，因为它们比其它皮肤细胞类型更经常地暴露于这些因素。此外，新近的证据提示，遗传上确定的角质形成细胞因子也可以促进固有的老化过程。因为角质形成细胞产生影响成纤维细胞和其它真皮细胞的健康/功能的旁分泌因子，因此，对角质形成细胞功能有害的因子对真皮细胞功能也是有害的6。透明质酸（也称作透明质酸盐和透明质酸）是一种大的、带负电荷的糖胺聚糖多糖，其普遍存在于体内，且以特别大的量存在于皮肤中4。真皮和表皮皮肤层都富含透明质酸，所述透明质酸作为包围的细胞外基质（其也含有胶原和其它蛋白）的一部分存在，在所述细胞外基质处，它包围细胞（例如，表皮的角质形成细胞和真皮的成纤维细胞）5。尽管年轻皮肤在角质形成细胞层和真皮层中都富含细胞外周透明质酸，在老化皮肤的这2个层中的量减少，其中角质形成细胞层中的透明质酸损失比在真皮层中的损失远远更显著6。在年轻皮肤中，透明质酸有效地包围表皮中的角质形成细胞和真皮中的成纤维细胞，呈胶冻样被膜（细胞外被），其为细胞提供适当的生长因子和营养因子，所述因子促进年轻外观皮肤特有的胶原和弹性蛋白产生。除了透明质酸以外，细胞被膜或外被的主要组分也发现是细胞外蛋白和其它物质，诸如胶原、蛋白聚糖（PG）诸如TSG-6和其它糖胺聚糖。透明质酸的三维结构是可以缠绕自身的浅螺旋（高分子量形式可检测为长直链），从而提供在细胞周围装配基质的理想模板。这些被膜或外被通常通过透明质酸与细胞受体（例如，CD44、RHAMM、LYVE1和其它受体）的结合而保持在细胞周围。随着皮肤老化，真皮成纤维细胞和角质形成细胞的维持它们的透明质酸被膜的能力减少，从而导致老化皮肤的脱水的和下垂的外观5,7。另外，当皮肤受到创伤（例如，通过暴露于过量的紫外线辐射（晒伤））时，真皮中细胞的透明质酸产生减少，从而导致透明质酸降解的增加和透明质酸降解产物在皮肤中的增加的存在。透明质酸被膜含有：水合和保护细胞的结构基质蛋白，以及维持细胞最佳代谢和分化状态所必需的营养物、细胞因子、激素和生长因子。提供结构基质的能力是透明质酸用于促进年轻皮肤的用途的一个重要基础因素。第二个因素是透明质酸的粘弹性性质，该性质影响营养物从血管供给的扩散和皮肤弹性；这些效应共同地提供年轻皮肤特有的纹理和光滑。第三个因素是，细胞外周的透明质酸提供针对活性氧（ROS）的靶标的能力，所述活性氧可以在暴露于UVA/B辐射以后生成，可以攻击和片段化透明质酸，进而保护其它细胞因子免于ROS诱发的损伤。最后一个因素与透明质酸对角质形成细胞和成纤维细胞的直接生物学效应有关。透明质酸促进角质形成细胞的增殖和分化。例如，增强角质形成细胞分化的因子（诸如视黄酸）也增加细胞外周的透明质酸外被。此外，在体外或在体内添加至角质形成细胞的透明质酸促进角质形成细胞层的厚度，并增强角质形成细胞分化，如通过CD44和角蛋白表达检测5。透明质酸也通过阻断转分化成肌成纤维细胞而影响成纤维细胞分化，所述肌成纤维细胞是产生高水平胶原I的真皮细胞，且具有固有的收缩性质，这二者都促进皱纹形成。细胞的透明质酸外被随着时间而降解（片段化），并逐渐被细胞吸收，作为老化过程的一部分。该降解部分地归因于：随着时间产生的氧自由基的积累，和改变遗传调节的发育程序（例如，老化），所述改变促进透明质酸酶的释放，所述透明质酸酶分解或片段化透明质酸外被。形成的片段刺激细胞的吸收机制，从而导致细胞溶菌酶对透明质酸外被的分解和破坏。除了从老化皮肤（特别是从角质形成细胞周围）逐渐减少以外，还已经发现，由于暴露于UVA/UVB辐射、类固醇使用或炎症，透明质酸从年轻的皱纹皮肤区域中减少5,6,8,9。透明质酸受体CD44在皮肤中的角质形成细胞和其它细胞上组成性地表达，且被认为是称作“细胞外被”的层中的细胞周围的透明质酸保留所必需的，和皮肤中的适当的透明质酸代谢所必需的5,10,11,12。在老化过程中，和在暴露于老化因素诸如紫外线辐射或造成皮肤萎缩的疾病/因素之后，皮肤损失CD44受体5,9。相比而言，在暴露于UVA/B和其它损伤因素以后，RHAMM（即另一种透明质酸受体，其在正常皮肤中通常不高度表达）的表达增加。认为RHAMM促进CD44内化/代谢透明质酸的能力。在包围真皮细胞的透明质酸细胞外被的产生和保留中，不完整的细胞外透明质酸结合蛋白诸如TSG-6也是重要的13。尽管已知透明质酸在年轻皮肤性质的恢复中具有用作组织填充剂的理想性质，唯一目前可利用的产品（其在皮肤屏障下面发挥它们的作用，而不是在皮肤表面上）是交联形式的透明质酸，它们被注射以使面部皱纹光滑和增加面部区域诸如唇的体积。尽管透明质酸的交联确实增强它在注射部位处的保留，这些注射不是持久性的，如果要保持年轻效果，必须定期（6-12个月）重复。但是，认为透明质酸与自身的交联减少它的结合细胞-表面受体蛋白的能力，该能力是透明质酸外被包围细胞所必需的一种关键性质。本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种非微粒糖胺聚糖组合物，所述组合物包含通过脂质部分与糖胺聚糖的1‑15%的重复二糖单体单元的共价连接而修饰的糖胺聚糖，其中：所述待修饰的糖胺聚糖是透明质酸、透明质酸衍生物、包含与己糖胺连接的糖醛酸或己糖的重复二糖单元的多糖、或它们的衍生物；所述待修饰的糖胺聚糖具有在50 kDa至约2,500kDa范围内的分子量；所述脂质部分包含一种或多种天然存在的或合成地衍生的脂肪酸、甘油脂、磷脂、鞘脂、甾醇脂质、异戊烯醇脂质或它们的衍生物，条件是，所述脂质部分含有在它的极性首基上的官能团，以允许所述脂质与所述糖胺聚糖的共价连接；且所述被修饰的糖胺聚糖在应用于皮肤屏障或粘膜时能够穿透所述皮肤屏障或粘膜并包被真皮成纤维细胞，由此，通过所述糖胺聚糖与所述脂质部分的反应，形成所述被修饰的糖胺聚糖。

【技术特征摘要】
2010.05.10 CA 27035321.一种非微粒糖胺聚糖组合物，所述组合物包含通过脂质部分与糖胺聚糖的1-15%的重复二糖单体单元的共价连接而修饰的糖胺聚糖，其中：所述待修饰的糖胺聚糖是透明质酸、透明质酸衍生物、包含与己糖胺连接的糖醛酸或己糖的重复二糖单元的多糖、或它们的衍生物；所述待修饰的糖胺聚糖具有在50kDa至约2,500kDa范围内的分子量；所述脂质部分包含一种或多种天然存在的或合成地衍生的脂肪酸、甘油脂、磷脂、鞘脂、甾醇脂质、异戊烯醇脂质或它们的衍生物，条件是，所述脂质部分含有在它的极性首基上的官能团，以允许所述脂质与所述糖胺聚糖的共价连接；且所述被修饰的糖胺聚糖在应用于皮肤屏障或粘膜时能够穿透所述皮肤屏障或粘膜并包被真皮成纤维细胞，由此，通过所述糖胺聚糖与所述脂质部分的反应，形成所述被修饰的糖胺聚糖。2.根据权利要求1所述的非微粒糖胺聚糖组合物，其中通过脂质部分与糖胺聚糖的2-6%的重复二糖单体单元的共价连接，修饰所述糖胺聚糖。3.根据权利要求1所述的非微粒糖胺聚糖组合物，其中所述脂质部分含有在它的极性首基上的氨基，且通过与糖胺聚糖上的羧酸基团形成酰胺键而与糖胺聚糖共价地结合。4.根据权利要求1-3中的任一项所述的非微粒糖胺聚糖组合物，其中所述糖胺聚糖具有在350kDa至1,500kDa范围内的分子量。5.根据权利要求1-3中的任一项所述的非微粒糖胺聚糖组合物，其中所述待修饰的糖胺聚糖是透明质酸。6.根据权利要求1-3...

【专利技术属性】
技术研发人员：伊娃·特利，
申请(专利权)人：伦敦保健科学研究中心股份公司，
类型：发明
国别省市：加拿大,CA