适合用于美容和药物用途的外用透皮糖胺聚糖制剂制造技术

本发明专利技术涉及外用糖胺聚糖组合物，特别是乙酰透明质酸组合物，所述组合物促进修饰的糖胺聚糖穿透皮肤屏障进入皮肤的表皮层和真皮层，从而允许诸如乙酰透明质酸的糖胺聚糖的真皮施用，而无需注射。通过它们将乙酰透明质酸递送至表皮层和真皮层的能力，本制剂因此适合用于真皮年轻化、增强、乙酰透明质酸补充和保护治疗。所述糖胺聚糖组合物也可用作递送装置，以促进美容和药学活性物质（包括药物、多肽、蛋白和类似大小的生物大分子）穿过皮肤屏障的真皮和透皮递送。

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】
本专利技术涉及外用(topical)糖胺聚糖制剂，所述制剂促进糖胺聚糖(其通过脂质部分与1-10%的二糖单体单元的共价连接而修饰)穿透皮肤屏障进入皮肤的表皮层和真皮层中，由此无需注射地实现糖胺聚糖的真皮施用。具体地，通过它们的将乙酰透明质酸(hyaluronan)递送至表皮层和真皮层的能力(所述乙酰透明质酸在皮肤中保留比外部地递送的乙酰透明质酸更长时间段)，本制剂因此适合用于真皮年轻化、增强、乙酰透明质酸补充和保护疗法。所述组合物也可以用作治疗化合物(包括多肽、蛋白和其它类似大小的生物大分子)的递送装置，从而促进它们穿过皮肤屏障。也提供了一种产生所述组合物的方法，其中通过使用活化剂作为限制试剂来控制脂质部分与糖胺聚糖的共价连接程度。
技术介绍
面部老化过程发生在一系列可预测的事件中，表现为皮肤体积和弹性(elastictone)的损失。皮肤体积损失( 其源自许多因素，包括胶原分解)导致皮肤的皮下脂肪层、基础肌肉层和筋膜层的萎缩，促进鼻唇沟、下巴线清晰度损失和皮肤粗化。皮肤弹性损失导致松弛的、下垂的面部组织。为了抵抗这些效应，年轻化手术尝试修正体积损失和组织品质，以导致处理过的皮肤的天然外观。这些手术可能涉及组织填充剂的使用(例如，胶原注射)、或由“提升”外科手术提供的紧绷以及其它选择，它们单独使用或联合使用。许多暂时性的组织填充剂(诸如胶原、乙酰透明质酸和羟磷灰石)目前是可得到的，但是，这些填充剂通过一系列注射来施用，且仅提供暂时效应，在胶原和乙酰透明质酸的情况下，通常不能延续超过12个月。更长期的解决方案诸如羟磷灰石(其可以持续2-5年)也包括脂肪自身移植术(持续1-3年)，其使用皮下脂肪细胞来修正面部体积损失和下垂，以恢复面部皮肤的更年轻的外观u，3。注射处理的后效应(其可以持续多达I周)可以包括:肿胀、发红、疼痛、伤痕和压痛。另外，所述处理需要通过多次注射来熟练地应用，并带来在注射部位处感染的风险。在提供皮肤的年轻外观中，角质形成细胞可能是最重要的细胞类型。因而，它们是维持皮肤水合所必需的，且对环境因素(诸如紫外线辐射)的老化效应特别敏感，因为它们比其它皮肤细胞类型更经常地暴露于这些因素。此外，新近的证据提示，遗传上确定的角质形成细胞因子也可以促进固有的老化过程。因为角质形成细胞产生影响成纤维细胞和其它真皮细胞的健康/功能的旁分泌因子，因此，对角质形成细胞功能有害的因子对真皮细胞功能也是有害的6。乙酰透明质酸(也称作透明质酸盐和透明质酸)是一种大的、带负电荷的糖胺聚糖多糖，其普遍存在于体内，且以特别大的量存在于皮肤中4。真皮和表皮皮肤层都富含乙酰透明质酸，所述乙酰透明质酸作为包围的细胞外基质(其也含有胶原和其它蛋白)的一部分存在，在所述细胞外基质处，它包围细胞(例如，表皮的角质形成细胞和真皮的成纤维细胞)5。尽管年轻皮肤在角质形成细胞层和真皮层中都富含细胞外周乙酰透明质酸，在老化皮肤的这2个层中的量减少，其中角质形成细胞层中的乙酰透明质酸损失比在真皮层中的损失远远更显著6。在年轻皮肤中，乙酰透明质酸有效地包围表皮中的角质形成细胞和真皮中的成纤维细胞，呈胶冻样被膜(细胞外被)，其为细胞提供适当的生长因子和营养因子，所述因子促进年轻外观皮肤特有的胶原和弹性蛋白产生。除了乙酰透明质酸以外，细胞被膜或外被的主要组分也发现是细胞外蛋白和其它物质，诸如胶原、蛋白聚糖(PG)诸如TSG-6和其它糖胺聚糖。乙酰透明质酸的三维结构是可以缠绕自身的浅螺旋(高分子量形式可检测为长直链)，从而提供在细胞周围装配基质的理想模板。这些被膜或外被通常通过乙酰透明质酸与细胞受体(例如，CD44、RHAMM、LYVE I和其它受体)的结合而保持在细胞周围。随着皮肤老化，真皮成纤维细胞和角质形成细胞的维持它们的乙酰透明质酸被膜的能力减少，从而导致老化皮肤的脱水的和下垂的外观5人另外，当皮肤受到创伤(例如，通过暴露于过量的紫外线辐射(晒伤))时，真皮中细胞的乙酰透明质酸产生减少，从而导致乙酰透明质酸降解的增加和乙酰透明质酸降解产物在皮肤中的增加的存在。乙酰透明质酸被膜含有:水合和保护细胞的结构基质蛋白，以及维持细胞最佳代谢和分化状态所必需的营养物、 细胞因子、激素和生长因子。提供结构基质的能力是乙酰透明质酸用于促进年轻皮肤的用途的一个重要基础因素。第二个因素是乙酰透明质酸的粘弹性性质，该性质影响营养物从血管供给的扩散和皮肤弹性；这些效应共同地提供年轻皮肤特有的纹理和光滑。第三个因素是，细胞外周的乙酰透明质酸提供针对活性氧(ROS)的靶标的能力，所述活性氧可以在暴露于UVA/B辐射以后生成，可以攻击和片段化乙酰透明质酸，进而保护其它细胞因子免于ROS诱发的损伤。最后一个因素与乙酰透明质酸对角质形成细胞和成纤维细胞的直接生物学效应有关。乙酰透明质酸促进角质形成细胞的增殖和分化。例如，增强角质形成细胞分化的因子(诸如视黄酸)也增加细胞外周的乙酰透明质酸外被。此外，在体外或在体内添加至角质形成细胞的乙酰透明质酸促进角质形成细胞层的厚度，并增强角质形成细胞分化，如通过CD44和角蛋白表达检测5。乙酰透明质酸也通过阻断转分化成肌成纤维细胞而影响成纤维细胞分化，所述肌成纤维细胞是产生高水平胶原I的真皮细胞，且具有固有的收缩性质，这二者都促进皱纹形成。细胞的乙酰透明质酸外被随着时间而降解(片段化)，并逐渐被细胞吸收，作为老化过程的一部分。该降解部分地归因于:随着时间产生的氧自由基的积累，和改变遗传调节的发育程序(例如，老化)，所述改变促进透明质酸酶的释放，所述透明质酸酶分解或片段化乙酰透明质酸外被。形成的片段刺激细胞的吸收机制，从而导致细胞溶菌酶对乙酰透明质酸外被的分解和破坏。除了从老化皮肤(特别是从角质形成细胞周围)逐渐减少以外，还已经发现，由于暴露于UVA/UVB辐射、类固醇使用或炎症，乙酰透明质酸从年轻的皱纹皮肤区域中减少5’6’8’9。乙酰透明质酸受体⑶44在皮肤中的角质形成细胞和其它细胞上组成性地表达，且被认为是称作“细胞外被”的层中的细胞周围的乙酰透明质酸保留所必需的，和皮肤中的适当的乙酰透明质酸代谢所必需的5’1(U1’12。在老化过程中，和在暴露于老化因素诸如紫外线辐射或造成皮肤萎缩的疾病/因素之后，皮肤损失⑶44受体5’9。相比而言，在暴露于UVA/B和其它损伤因素以后，RHAMM(即另一种乙酰透明质酸受体，其在正常皮肤中通常不高度表达)的表达增加。认为RHAMM促进⑶44内化/代谢乙酰透明质酸的能力。在包围真皮细胞的乙酰透明质酸细胞外被的产生和保留中，不完整的细胞外乙酰透明质酸结合蛋白诸如TSG-6也是重要的13。尽管已知乙酰透明质酸在年轻皮肤性质的恢复中具有用作组织填充剂的理想性质，唯一目前可利用的产品(其在皮肤屏障下面发挥它们的作用，而不是在皮肤表面上)是交联形式的乙酰透明质酸，它们被注射以使面部皱纹光滑和增加面部区域诸如唇的体积。尽管乙酰透明质酸的交联确实增强它在注射部位处的保留，这些注射不是持久性的，如果要保持年轻效果，必须定期(6-12个月)重复。但是，认为乙酰透明质酸与自身的交联减少它的结合细胞-表面受体蛋白的能力，该能力是乙酰透明质酸外被包围细胞所必需的一种关键性质。遇到的另一个困难包括:难以在皮肤本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】2010.05.10 CA 27035321.一种糖胺聚糖组合物，所述组合物包含通过脂质部分与糖胺聚糖的约1-15%的重复二糖单体单元的共价连接而修饰的糖胺聚糖，其中:所述待修饰的糖胺聚糖是乙酰透明质酸、乙酰透明质酸衍生物、包含与己糖胺连接的糖醛酸或己糖的重复二糖单元的多糖、或它们的衍生物；所述待修饰的糖胺聚糖具有在约2 kDa至约2，500 kDa范围内的分子量；所述脂质部分包含一种或多种天然存在的或合成地衍生的脂肪酸、甘油脂、磷脂、鞘月旨、甾醇脂质、异戊烯醇脂质或它们的衍生物，条件是，所述脂质部分含有在它的极性首基上的官能团，以允许所述脂质与所述糖胺聚糖的共价连接；且所述被修饰的糖胺聚糖在应用于皮肤屏障或粘膜时能够穿透所述皮肤屏障或粘膜，由此，通过所述糖胺聚糖与所述脂质部分的反应，形成所述被修饰的糖胺聚糖。2.根据权利要求1所述的糖胺聚糖组合物，其中通过脂质部分与糖胺聚糖的约1-12%的重复二糖单体单元的共价连接，修饰所述糖胺聚糖。3.根据权利要求1所述的糖胺聚糖组合物，其中通过脂质部分与糖胺聚糖的约1-10%的重复二糖单体单元的共价连接，修饰所述糖胺聚糖。4.根据权利要求1所述的糖胺聚糖组合物，其中通过脂质部分与糖胺聚糖的约1-7.5%的重复二糖单体单元的共价连接，修饰所述糖胺聚糖。5.根据权利要求1所述的糖胺聚糖组合物，其中通过脂质部分与糖胺聚糖的约2-6%的重复二糖单体单元的共价连接，修饰所述糖胺聚糖。6.根据权利要求1-5中的任一项所述的糖胺聚糖组合物，其中所述待修饰的糖胺聚糖具有在约50 kDa至约2， 500 kDa范围内的分子量。7.根据权利要求1-5中的任一项所述的糖胺聚糖组合物，其中所述糖胺聚糖具有在约100 kDa至约2，000 kDa范围内的分子量。8.根据权利要求1-5中的任一项所述的糖胺聚糖组合物，其中所述糖胺聚糖具有在约350 kDa至约1,500 kDa范围内的分子量。9.根据权利要求1-5中的任一项所述的糖胺聚糖组合物，其中所述糖胺聚糖具有在约500 kDa至约1,500 kDa范围内的分子量。10.根据权利要求1或9中的任一项所述的糖胺聚糖组合物，其中所述待修饰的糖胺聚糖是乙酰透明质酸或乙酰透明质酸衍生物。11.根据权利要求10所述的糖胺聚糖组合物，其中所述待修饰的糖胺聚糖是乙酰透明质酸。12.根据权利要求1-11中的任一项所述的糖胺聚糖组合物，其中所述脂质部分含有在它的极性首基上的氨基，且通过与糖胺聚糖上的羧酸基团形成酰胺键而与糖胺聚糖共价地彡口口 13.根据权利要求1-12中的任一项所述的糖胺聚糖组合物，其中所述脂质部分包含一种或多种磷脂酰乙醇胺或磷脂酰丝氨酸。14.根据权利要求1-13中的任一项所述的糖胺聚糖组合物，其中所述脂质部分包含一种或多种磷脂酰乙醇胺。15.根据权利要求1-14中的任一项所述的糖胺聚糖组合物，其中所述被修饰的糖胺聚糖能够穿透皮肤屏障。16.根据权利要求1-15中的任一项所述的糖胺聚糖组合物，其中当真皮地递送时，所述被修饰的糖胺聚糖在皮肤内具有比未修饰的糖胺聚糖更长的停留时间。17.根据权利要求16所述的糖胺聚糖组合物，其中所述待修饰的糖胺聚糖是乙酰透明质酸。18.一种适合施用于皮肤或粘膜的制剂，所述制剂包含与一种或多种美容或药学可接受的赋形剂或载体相混合的糖胺聚糖组合物，其中所述糖胺聚糖组合物包含:通过脂质部分与糖胺聚糖的1-15%的重复二糖单元单体单元的共价连接而修饰的糖胺聚糖；所述糖胺聚糖包括乙酰透明质酸、乙酰透明质酸衍生物、包含与己糖胺连接的糖醛酸或己糖的重复二糖单元的多糖、或它们的衍生物；所述待修饰的糖胺聚糖具有在约2 kDa至约2，500 kDa范围内的分子量；所述脂质部分包含一种或多种天然存在的或合成地衍生的脂肪酸、甘油脂、磷脂、鞘月旨、甾醇脂质、异戊烯醇脂质或它们的衍生物，条件是，所述脂质部分含有在它的极性首基上的官能团，以允许所述脂质与所述糖胺聚糖的共价连接；且所述被修饰的糖胺聚糖在应用于皮肤屏障或粘膜时能够穿透所述皮肤屏障或粘膜，由此，通过所述糖胺聚糖与所述脂质部分的反应，形成所述被修饰的糖胺聚糖。19.根据权利要求18所述的制剂，其中通过脂质部分与糖胺聚糖的约1-12%的重复二糖单体单元的共价连接，修饰所述糖胺聚糖。20.根据权利要求18 所述的制剂，其中通过脂质部分与糖胺聚糖的约1-10%的重复二糖单体单元的共价连接，修饰所述糖胺聚糖。21.根据权利要求18所述的制剂，其中通过脂质部分与糖胺聚糖的约1-7.5%的重复二糖单体单元的共价连接，修饰所述糖胺聚糖。22.根据权利要求18所述的制剂，其中通过脂质部分与糖胺聚糖的约2-6%的重复二糖单体单元的共价连接，修饰所述糖胺聚糖。23.根据权利要求18-22中的任一项所述的制剂，其中所述待修饰的糖胺聚糖具有在约50 kDa至约2，500 kDa范围内的分子量。24.根据权利要求18-22中的任一项所述的制剂，其中所述待修饰的糖胺聚糖具有在约100 kDa至约2，000 kDa范围内的分子量。25.根据权利要求18-22中的任一项所述的制剂，其中所述待修饰的糖胺聚糖具有在约350 kDa至约1，500 kDa范围内的分子量。26.根据权利要求18-22中的任一项所述的制剂，其中所述待修饰的糖胺聚糖具有在约500 kDa至约1，500 kDa范围内的分子量。27.根据权利要求18-26中的任一项所述的制剂，其中所述糖胺聚糖是乙酰透明质酸或乙酰透明质酸衍生物。28.根据权利要求27所述的制剂，其中所述糖胺聚糖是乙酰透明质酸。29.根据权利要求18-28中的任一项所述的制剂，其中所述脂质部分含有在它的极性首基上的氨基，且通过与糖胺聚糖上的羧酸基团形成酰胺键而与糖胺聚糖共价地结合。30.根据权利要求18-29中的任一项所述的制剂，其中所述脂质部分包含一种或多种磷脂酰乙醇胺或磷脂酰丝氨酸。31.根据权利要求18-30中的任一项所述的制剂，其中所述脂质部分包含磷脂酰乙醇胺。32.根据权利要求18-31中的任一项所述的制剂，其中所述制剂适合用于递送修饰的糖胺聚糖穿过皮肤屏障。33.根据权利要求18-32中的任一项所述的制剂，其中当真皮地递送时，所述被修饰的糖胺聚糖在皮肤内具有比未修饰的糖胺聚糖更长的停留时间。34.根据权利要求18-33中的任一项所述的制剂，所述制剂另外包含由糖胺聚糖组合物运输穿过皮肤屏障或粘膜的一种或多种成分。35.根据权利要求34所述的制剂，其中所述另外一种或多种成分被运输穿过皮肤屏障。36.根据权利要求35所述的制剂，其中所述另外一种或多种成分包括抗氧化剂、维生素、精油、紫外线阻断剂或已知其施用为皮肤的健康或外观提供有益效果的其它营养物。37.根据权利要求34或35中的任一项所述的制剂，其中所述另外一种或多种成分是药物。38.根据权利要求37所述的制剂，其中所述另外一种或多种成分包括治疗剂，所述治疗剂适合用于治疗炎症、皮肤癌或皮肤病症，其穿过皮肤屏障进行递送。39.根据权利要求38所述的制剂，其中所述另外一种或多种成分适合用于治疗皮肤癌。40.根据权利要求38所述的制剂，其中所述另外一种或多种成分适合用于治疗皮肤病症。41.根据权...

【专利技术属性】
技术研发人员：伊娃·特利，
申请(专利权)人：伦敦保健科学研究中心股份公司，
类型：
国别省市：