用于药物输送的脂质体制造技术

本发明专利技术提供了含有取代的铵和/或聚阴离子、和任选地带有期望的治疗实体或成像实体的脂质体组合物。本发明专利技术也提供了制备本发明专利技术提供的脂质体组合物的方法。

Liposomes for drug delivery

The present invention provides a liposome composition containing substituted ammonium and / or polyanions, and a desired therapeutic entity or imaging entity. The invention also provides a method for preparing the liposome composition provided by the present invention.

【技术实现步骤摘要】
用于药物输送的脂质体本申请是申请日为2005年5月2日、申请号为200580022391.6、题为“用于药物输送的脂质体”的专利申请的分案申请(其申请日为2005年5月2日、申请号为201410025888.4、题为“用于药物输送的脂质体”)的分案申请。优先权声明本申请要求2004年5月3日提交的美国临时专利申请第60/567,921号的优先权，该临时申请以参考方式整体并入本文，用于所有目的。专利
本专利技术总体上涉及脂质体领域，更具体地涉及用于输送治疗实体或诊断实体的脂质体组合物。专利技术背景脂质体或脂双层小泡已经用于或被提议用于各种研究、工业和医疗的应用中，特别是体内用作诊断化合物或治疗化合物的载体。参见例如：Lasic,D.Liposomes:fromphysicstoapplications.Elsevier,Amsterdam,1993；Lasic,D和Papahadjopoulos,D.,eds.MedicalApplicationsofLiposomes.Elsevier,Amsterdam,1998。脂质体的通常特征是具有通过一个或多个双层组成的膜与外部介质隔开的内部空间，形成显微囊或小泡。脂质体的双层膜典型地由包含空间上隔开的亲水性区域和疏性区域的脂质，即合成的或天然来源的两亲性分子形成，参见LasicD.,1993,见上文。脂质体的双层膜也可以由两亲性聚合物和表面活性剂(polymerosomes、niosomes(非离子表面活性剂囊泡))形成。脂质体通常充当能够拥有有用特性或发挥有用活性的各种实体的载体，这些实体不受限制地，例如是化学化合物、化合物的组合、合成或天然来源的超分子复合体、遗传物质、活生物体、其部分、或其衍生物。为了实现这一目的，制备脂质体，以便以掺入脂质体的形式(liposome-incorporatedform)包含期望的实体。将期望的实体掺入脂质体的过程常常称为“装载”。掺入脂质体的实体可以完全或部分地位于脂质体的内部空间，在脂质体的双层膜内，或与脂质体膜的外表面结合。实体掺入脂质体的过程也称为包囊或包载。这三个术语在本文中可替换使用，具有相同的意思。用脂质体包囊实体的目的常常是为了保护实体免遭环境破坏，同时使包囊的实体主要在实体活性有利的位置或环境中发挥其活性，而在这种活性可能无用或不利的其他位置不大发挥其活性。该现象称为输送(delivery)。例如，脂质体内的药物物质可免遭体内酶的破坏，但在疾病位置由脂质体释放出来并进行治疗。理想地，这样的脂质体可以被制备用于包含期望的化合物，具有下述特性：(i)高装载效率，即与被带入包囊过程的量相比，具有高百分比的包囊的实体；(ii)每单位脂质体双层物质具有大量包囊的实体；(iii)高浓度的包囊实体，和(iv)稳定的形式，即当储存或通常在脂质体出现在期盼脂质体包埋的实体发挥其预期活性的位置或环境之前仅仅少量的包囊实体释放(渗漏)。因此，本领域要求提供可用于输送各种化合物，尤其是治疗实体、诊断实体或成像实体的各种脂质体组合物。专利技术概述本专利技术基于这样的发现，取代的铵和聚阴离子可用于将实体装入并保持在脂质体中。因此，本专利技术提供了用于输送各种实体的方法和脂质体组合物，尤其是治疗实体，即在活生物体如人、植物或动物中诊断、预后、测试、筛选、治疗或预防不利状态如疾病中有用的实体。在一种实施方案中，本专利技术提供了含有处于介质中的脂质体的组合物，其中脂质体里面含有取代的铵，其中R1、R2、R3和R4中的每一个独立地是氢或有机基团，具有总计达18个的碳原子，包括18个在内，其中R1、R2、R3和R4中的至少一个是有机基团，其中该有机基团独立地是具有可达8个碳原子的烃基，并且是烷基、亚烷基、杂环烷基、环烷基、芳基、烯基或环烯基基团或其羟基-取代的衍生物，任选地，在它的烃链中包括S、O或N原子，形成醚、酯、硫醚、胺或酰胺键，其中R1、R2、R3和R4中的至少三个是有机基团，或取代的铵是位阻铵(stericallyhinderedammonium)，如，例如，其中有机基团中的至少一个具有直接连接到铵氮原子的仲碳原子或叔碳原子。优选地，包囊入脂质体的取代的铵化合物的酸性(去质子化)解离常数的负对数(pKa)，至少约8.0、至少约8.5、至少约9.0、至少约9.5或至少约10.0，这是在环境温度下于含水溶液中测定的。在另一实施方案中，本专利技术提供了含有处于介质中的脂质体的组合物，其中脂质体的内部空间含有聚阴离子，其中聚阴离子是聚阴离子化的多元醇或聚阴离子化的糖。脂质体优选地含有能够将实体装载入脂质体的跨膜梯度。在一种实施方案中，跨膜梯度是由铵、季铵、或取代的伯铵、仲铵或叔铵化合物构成的梯度，所述取代的伯铵、仲铵或叔铵化合物在环境温度下在稀释的含水溶液中的酸性(去质子化)解离常数(pKa)的负对数至少约8.0、至少约8.5、至少约9.0、至少约9.5或至少约10.0。脂质体任选地含有包埋的实体，例如治疗剂、可检测标记、或球形阳离子有机分子。在还有另一实施方案中，本专利技术提供的组合物还包含包囊入本专利技术脂质体的实体。优选地，实体包囊入脂质体的内部空间内。例如，脂质体的内部空间还包含抗肿瘤治疗剂，其中组合物对对象的毒性水平至少等于或小于在不用组合物的情况下给予对象的抗肿瘤治疗剂的毒性水平。在还有另一实施方案中，本专利技术提供的组合物是包含喜树碱化合物的脂质体组合物。该组合物的抗癌活性比在组合物不存在下同样给药的喜树碱化合物的抗癌活性高至少2倍、4倍、或10倍，同时组合物的毒性不超过在组合物不存在下同样给药的喜树碱化合物的毒性，要低至少2倍、或低至少4倍。在一种实施方案中，喜树碱化合物是药物前体，并以每1mg脂质体膜物质例如脂类，至少0.1mg、至少0.2mg、至少0.3mg、0.5mg或至少1mg的量包含在脂质体中。喜树碱化合物优选包囊在脂质体中，实质上包囊在脂质体的内部空间。在一个例子中，喜树碱化合物是伊立替康(irinotecan(CPT-11))。在还有另一实施方案中，本专利技术提供的组合物是长春花碱(vincaalkaliod)或其衍生物的脂质体组合物。在体内暴露于哺乳动物血液24小时后，该组合物在脂质体内24-小时时的药物保持量为原始药物装载量的至少50％、至少60％或至少70％。长春花碱或其衍生物优选包囊在脂质体中，实质上包囊在脂质体的内部空间。哺乳动物的例子是大鼠。示例性长春花碱及其衍生物是长春新碱(vincristine)、长春碱(vinblastine)、长春瑞滨(vinorelbine)。在还有另一实施方案中，本专利技术提供了将实体包囊入脂质体的方法。该方法包括将本专利技术的脂质体与实体，例如治疗实体或可检测实体接触。优选地，在本专利技术取代的铵或聚阴离子在介质中的浓度低于在脂质体内部空间中的浓度的条件下进行接触。在一种实施方案中，脂质体组合物与实体在含水介质中接触。在还有另一实施方案中，本专利技术提供了将实体包囊入脂质体的方法。该方法包括将本专利技术含脂质体的组合物与实体前体(pre-entity)接触，其中实体前体能够在一定条件下转化为实体，并在脂质体内部提供将实体前体在脂质体内转化为实体的条件。在一种情况下，实体是有机化合物，实体前体是其碱性衍生物。在还有本文档来自技高网...

【技术保护点】
组合物，包含介质中的脂质体，其中所述脂质体包含摩尔比为3:2的1,2‑二硬脂酰‑SN‑磷脂酰胆碱和胆固醇，并且被包载在所述脂质体内部的是伊立替康和选自六硫酸蔗糖、七硫酸蔗糖、八硫酸蔗糖、六磷酸肌醇、聚磷酸盐、三磷酸盐和焦磷酸盐的聚阴离子。

【技术特征摘要】
2004.05.03 US 60/567,9211.组合物，包含介质中的脂质体，其中所述脂质体包含摩尔比为3:2的1,2-二硬脂酰-SN-磷脂酰胆碱和胆固醇，并且被包载在所述脂质体内部的是伊立替康和选自六硫酸蔗糖、七硫酸蔗糖、八硫酸蔗糖、六磷酸肌醇、聚磷酸盐、三磷酸盐和焦磷酸盐的聚阴离子。2.权利要求1所述的组合物，其中铵离子也被包载在所述脂质体内部。3.权利要求1所述的组合物，其中所述铵离子是三乙铵或二乙铵。4.药物组合物，其包含权利要求1-3任一项所述的组合物、药学上可接受的载体和缓冲物质。5.根据权利要求...

【专利技术属性】
技术研发人员：K·洪，D·C·德拉蒙德，D·B·基尔波京，
申请(专利权)人：益普生生物制药公司，
类型：发明
国别省市：英国,GB