治疗血凝过快状态或获得性C蛋白不足的方法技术

一种治疗具有获得性血凝过快状态或获得性蛋白Ｃ不足人类患者的方法，其中的状态与不足是与脓毒症、暴发性紫癜、脑膜炎双球菌脓毒症、骨髓与其它移植、严重烧伤、妊娠、大型手术、严重创伤或ＡＲＤＳ伴随产生的，该方法包括施用活化的蛋白Ｃ从而提供一种高度选择性的治疗剂，使出血并发病发生的可能性低。（*该技术在2018年保护过期，可自由使用*）

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及医学，尤其是用活化的C蛋白剂治血凝过快状态或获得性C蛋白不足。C蛋白是一种丝氨酸蛋白酶和自然存在的抗凝剂，其通过失活凝血级联系统中的因子Va和VIIIa而阻止凝血酶产生的能力而在止血调节中发挥作用。人类C蛋白主要在体内肝脏中作为461个氨基酸的单个多肽而得到制备。该前体分子经历多次翻译后修饰，包括1)切割42个氨基酸的信号序列；2)从一条链酶原的位置155蛋白水解去除赖氨酸残基并在位置156去除精氨酸残基从而制备双链形式的分子，(即，通过二硫桥附着到262个氨基酸残基含有丝氨酸蛋白酶重链上的155个氨基酸残基的轻链)；3)集中在该轻链头42个氨基酸中的九个谷氨酸残基的维生素K-依赖性羧化作用，得到9个γ-羧基谷氨酸残基；和4)在四个位点的碳水化合物附着(其中一个位于轻链且另三个位于重链上)。该重链含有良好确立的Asp257，His211和Ser360丝氨酸蛋白酶三联体。最后，该循环的双链酶原在钙离子存在下于磷脂表面由凝血酶在体内活化。活化是由于去除该重链N-末端的十二肽，产生具有酶促活性的活化C蛋白(aPC)。与其它蛋白一起，aPC可能与导致阻止凝血的大多数重要的血液凝固下调因子一样而发挥作用。除了其抗凝血功能外，aPC还通过其抑制细胞因子(例如，TNF和IL-1)的产生而具有抗炎效应并且也发挥促进凝血块裂解的纤溶酶水解特性。因此，C蛋白酶系统代表抗凝、抗炎和纤维蛋白溶解的主要生理机制。脓毒症脓毒症定义为一种对感染的系统性炎症反应，该反应与许多宿主防御机制包括细胞因子网络、白细胞、和补体及凝血/纤维蛋白溶解系统的活化有关并由此所介导。。在各种器官的微血管中具有广泛血纤蛋白储积的弥漫性血管内凝血是脓毒/脓毒性休克的早期表现。DIC是多器官衰竭综合症形成中重要的中间因素并且导致脓毒性休克患者不良的预后。。已经报导了数例用C蛋白在各种脓毒症动物模型中令人鼓舞的临床前研究。Taylor等的狒狒脓毒症模型研究使用了来源于血浆的人活化C蛋白。动物进行防御性治疗(即，在灌注LD100大肠杆菌开始前的2小时施以aPC)。5只动物中的5只均存活7天并应是对该实验方法的永久存活者。在接受相同大肠杆菌灌注的对照动物中，5只动物中的5只在24到32小时死亡。有效剂量为7到8mg/kg。在大鼠的脂多糖(LPS；大肠杆菌)脓毒病模型中，由LPS诱导的肺血管损伤受100μg/kg剂量的人血浆来源的活化蛋白C所抑制。此外，在Okamoto等的免连接和穿刺脓毒症模型中，显示9小时的12μg/kg/小时剂量的血浆来源的人活化C蛋白在保护动物免受凝血病和器官衰竭中是有效的。由于aPC的种特异性，故在这些动物中获得的结果对于人类的治疗不一定具有预见性。依据选定的动物模型，人类活化C蛋白的有效剂量水平是极其多变且不可预计的。例如，在人类中人活化的C蛋白血清半寿期为30到40分钟，相比之下在狒狒中为8到10分钟且在兔中为90分钟。近来有许多尝试来治疗人类脓毒症，其中大部分使用阻滞与该疾病病生理学有关的炎症介质的药物。然而，用各种阻滞炎症介质药物的临床研究已是不成功的。由于参与炎症介质中的许多具有补偿反应，且因素具有治疗效应，有些研究人员提出阻滞它们的作用可能是不适当的。最近，已提出阻滞DIC作为脓毒症临床测试中的一个新的靶向。然而，简单地阻滞脓毒病中的凝血不足可能是不充分的。正如Esmon所综述的，，数种抗血栓剂在狒狒的脓毒症模型中没有显示出效率，其中包括封闭活性位点的因子Xa，蛭素和蛭素类似物(hirulog)。这些抗血栓剂中的每种能够阻断动物中的消耗性凝血病但不能够提高其存活。此外，日本研究人员提出用血浆来源的活化C蛋白治疗与肝衰竭相伴的有可能形成DIC样综合症的凝血病。到目前为止，血浆来源的人C蛋白酶原已在25名具有细菌性脓毒症的暴发性紫癜患者处理中用作是进攻性传统治疗中的成功的辅助手段，其中22名患者存活(Gerson等，儿科学91418-422，1993；Smith等，Thromh.Haemost，PS1709，p419，1997；Rintala等，柳叶刀3471767，1996；Rivard等，儿科杂志126646-652，1995)。Gerson等，描述了一例未能对进攻性传统治疗作出反应的格兰氏阳性菌血病和暴发性紫癜患儿的治疗研究。该患者用血浆来源的人C蛋白酶原加以治疗(280μg/kg大丸剂+40μg/kg/hr灌注)，导致凝血病和DIC有关的校正和脓毒性休克有关的暴发性紫癜形成临床迹象的终止。Rintala等，报导了治疗2名表现出爆发性紫癜的脑膜炎双球菌败血症成年患者。这些患者用血浆来源的C蛋白酶原从每6小时400μg/kg大丸剂治疗8-10天。一名患者死亡且另一名存活下来。Rivard等，报导了用人C蛋白酶原治疗后同样表现为爆发性紫癜的4名脑膜炎球菌血症患者均存活下来。这些患者用每6小时400μg/kg大丸剂的剂量加以治疗。尽管这些研究的样品量小，但是与表现出爆发性紫癜的脑膜炎球菌血症有关的死亡率高于50％。然而，因为这些研究用人类C蛋白酶原进行，所以它们对建立用活化C蛋白治疗的剂量和时间几乎没提供什么提示。除了脑膜炎球菌血症外，爆发性紫癜和/或DIC也与众多的细菌、病毒或原生动物感染有关，这些感染包括但不限于由立克次体(Rickettsia)所导致的感染(落矶山斑疹热、蜱咬热、斑疹伤寒等)；由沙门氏菌导致的感染(斑疹伤寒、鼠咬热)；肺炎球菌所致的感染；由鼠疫杆菌所致的感染(腹股沟淋巴结炎(Bubonic plague))；由侵肺军团菌(Legionellapneumophila)所致的感染(军团病(Legionaires Disease))；Plasmodium falciparum所致的感染(脑型疟)；类鼻疽假单胞菌(Burkholderia pseudomallei)所致的感染(类鼻疽)；类鼻疽假单胞菌所致的感染(Melioidosis)；链球菌所致的感染(牙原性感染)；带状疱疹病毒所致的感染；炭疽杆菌所致的感染(炭疽)；问号钩端螺旋体所致的感染(钩端螺旋体病)；葡萄球菌所致的感染；埃及嗜血菌所致的感染(巴西紫癜热)；奈瑟氏球菌所致的感染(淋球菌血症，脑膜炎球菌血症)；和结核分枝杆菌所致的感染(粟粒性结核)。尽管爆发性紫癜、DIC或脓毒症/脓毒性休克或其它感染中的获得性C蛋白不足状态已如上述进行了详细记录，但几乎没有数据是关于如何用活化的C蛋白治疗这些患者。由于C蛋白生物学作用的物种特异性特性，故用活化的人C蛋白在动物模型中治疗而产生的临床前药理数据确立人的剂量水平是困难的。移植多种移植有关的血栓栓塞并发症在骨髓移植(BMT)、肝脏、肾脏或其它器官移植后可能会出现。已报导循环C蛋白水平的下降在BMT后，肾脏移植后和肝脏移植后出现。C蛋白的这种不足促进了血凝过快的状态，从而将病者置于血栓栓塞并发症的风险中。例如，肝静脉闭塞(VOD)是BMT移植前治疗方案的主要剂量限制性并发症。VOD可能是由于纤维蛋白在血管内的储积而造成肝脏内少部分小静脉丢失的结果。。此外，VOD导致BMT后相当多的发病率和致死率。已报导C蛋白水平的下降与VOD峰值发生率同步并且可能是该疾病发生的促进因子。BMT后包括肺本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种治疗具有获得性血凝过快状态或获得性Ｃ蛋白不足人类患者的方法，包括通过连续灌注大约２４到大约１４４小时施用至所述患者大约２０μｇ／ｋｇ／ｈｒ到大约５０μｇ／ｋｇ／ｈｒ剂量的人活化Ｃ蛋白。

【技术特征摘要】
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【专利技术属性】
技术研发人员：BW格林尼尔，DL哈特曼，SCB颜，
申请(专利权)人：伊莱利利公司，
类型：发明
国别省市：US[美国]