一种虾青素的提取方法技术

本发明专利技术提供一种虾青素的提取方法，该方法主要包括低温研磨、酶法低温破壁、有机溶剂多级提取和组合型大孔树脂纯化等技术手段，首先利用低温研磨的方法对雨生红球藻进行初级破壁，然后结合纤维素酶和果胶酶进行二次破壁，并且二次破壁时的温度为0～4℃，突破了常规的破壁温度选择思路，避免高温对雨生红球藻有效成分的破坏作用，从而实现细胞的充分破壁，为后续的虾青素提取提供良好的基础。通过多级提取的方式，条件温和，不会对虾青素产生破坏，同时采用了组合型大孔树脂进行纯化，大大提高了虾青素的提取率和纯度，从而提高了雨生红球藻的利用价值，增加经济效益，为工业化生产奠定坚实基础。

A method for extracting astaxanthin

The invention provides a method for extracting astaxanthin, this method mainly includes cryogenic grinding, enzymatic treatment, low organic solvent extraction and combination of multi type macroporous resin purification technology, firstly, using the method of cryogenic grinding alge haematococcuspluvialis primary wall and then combined with cellulase and pectinase for two times and two times of the wall, when the wall temperature is 0~4 DEG C, the choice of wall temperature break the conventional thinking, to avoid damaging effects of high temperature on the effective components of Haematococcus pluvialis, so as to realize the fully broken cells, provide a good foundation for subsequent astaxanthin extraction. Through the multistage extraction method under mild conditions, no astaxanthin damage, while using a combination of macroporous resin for purification, greatly improving the extraction rate and purity of astaxanthin, which improves the utilization value of haematoccuspluvialis, increase economic efficiency, to lay a solid foundation for industrial production.

【技术实现步骤摘要】
一种虾青素的提取方法
本专利技术涉及天然产物的提取
，具体涉及一种虾青素的提取方法。
技术介绍
虾青素，又称变胞藻黄素或虾红素，是一种类胡萝卜素，是一种较强的抗氧化剂，在虾、蟹、藻类、酵母中存在，目前已知的天然虾青素含量较高的是雨生红球藻和法拉酵母，雨生红球藻含有的主要是酯化的虾青素，酯化的虾青素是存储在体内的更为稳定的未被氧化过的虾青素，因此被公认为是自然界中生产虾青素最好的生物。虾青素为为长链不饱和双键结构体系，因此，性质不稳定，易异构化和降解，对热、氧、光、酸、碱等较为敏感。目前虾青素的提取率、纯度均较低，生产成本高，因此需要更为全面的开发提取方法，提高虾青素的提取率和纯度，增加其经济效益。
技术实现思路
针对以上现有技术的不足之处，本专利技术提供一种虾青素的提取方法。本专利技术采取的技术方案如下：一种虾青素的提取方法，包括以下步骤：S1：取雨生红球藻藻粉3～5g，进行低温研磨，加入0.3～0.6mg/mL的纤维素酶和0.1～0.3mg/mL的果胶酶共200～300mL进行破壁，破壁温度0～4℃、破壁时间45～60min、酶反应pH3.5～5.0，加入0.5～2g/mL的氯化钠溶液，混合5～10min，分离上清和沉淀；S2：取步骤S1中的沉淀，按料液比1：2～3，加入含2～3％氢氧化钠的甲醇溶液，反应1～2h，加入食用油-丙酮-乙酸乙酯进行提取，分离，得到提取液a和滤渣X；取滤渣X分别用不同体积比的丙酮-甲醇溶液依次进行提取，分离，合并后得到滤渣Y和提取液b；取滤渣Y以乙醇提取，分离，得到提取液c；S3：将提取液a、提取液b和提取液c混合，冷冻干燥，选择用三种大孔树脂材料混合而成的组合型大孔树脂进行纯化，得到本专利技术虾青素。优选的，所述步骤S1中氯化钠的加入量为20～50ml，离心参数为：2000～3000rpm离心5～10min。优选的，所述步骤S2中食用油-丙酮-乙酸乙酯的体积比为50～52∶25～29∶19～25，丙酮-甲醇的体积比分别为99∶1、75～88∶12～25、50～60∶40～50、0∶100。优选的，所述步骤S3中三种大孔树脂材料分别为XDA-1、XDA-6和XAD-16。与现有技术相比，本专利技术的有益效果是：1、本专利技术首先利用低温研磨的方法对雨生红球藻进行初级破壁，然后结合纤维素酶和果胶酶进行二次破壁，从而实现细胞的充分破壁，并且二次破壁时的温度为0～4℃，突破了常规的破壁温度选择思路，避免高温对雨生红球藻有效成分的破坏作用，为后续的虾青素提取提供良好的基础。2、本专利技术通过多级提取的方式，条件温和，不会对虾青素产生破坏，同时采用了组合型大孔树脂进行纯化，大大提高了虾青素的提取率和纯度，从而提高了雨生红球藻的利用价值，增加经济效益，为工业化生产奠定坚实基础。具体实施方式下面结合具体实施例来进一步描述本专利技术，本专利技术的优点和特点将会随着描述而更为清楚，但本专利技术的保护范围不限于以下实施例。实施例1：一种虾青素的提取方法，包括以下步骤：S1：取雨生红球藻藻粉3g，进行低温研磨，加入0.4mg/mL的纤维素酶和0.1mg/mL的果胶酶共300mL进行破壁，破壁温度0℃、破壁时间60min、酶反应pH4，加入0.7g/mL的氯化钠溶液50ml，混合10min，2000rpm离心5min，分离上清和沉淀；S2：取步骤S1中的沉淀，按料液比1∶2，加入含3％氢氧化钠的甲醇溶液，反应1h，加入食用油-丙酮-乙酸乙酯(体积比为52∶29∶19)进行提取，分离，得到提取液a和滤渣X；取滤渣X分别用体积比为99∶1、88∶12、60∶40、0∶100的丙酮-甲醇溶液依次进行提取，分离，合并后得到滤渣Y和提取液b；取滤渣Y以乙醇提取，分离，得到提取液c；S3：将提取液a、提取液b和提取液c混合，冷冻干燥，选择用三种大孔树脂材料混合而成的组合型大孔树脂进行纯化，所述三种大孔树脂材料为XDA-1，XDA-6和XAD-16，得到本专利技术虾青素。实施例2：一种虾青素的提取方法，包括以下步骤：S1：取雨生红球藻藻粉5g，进行低温研磨，加入0.3mg/mL的纤维素酶和0.1mg/mL的果胶酶共200mL进行破壁，破壁温度4℃、破壁时间45min、酶反应pH3.5，加入2g/mL的氯化钠溶液50ml，混合10min，2000rpm离心10min，分离上清和沉淀；S2：取步骤S1中的沉淀，按料液比1∶3，加入含2％氢氧化钠的甲醇溶液，反应2h，加入食用油-丙酮-乙酸乙酯(体积比为50∶25∶25)进行提取，分离，得到提取液a和滤渣X；取滤渣X分别用体积比为99∶1、75∶25、60∶40、0∶100的丙酮-甲醇溶液依次进行提取，分离，合并后得到滤渣Y和提取液b；取滤渣Y以乙醇提取，分离，得到提取液c；S3：将提取液a、提取液b和提取液c混合，冷冻干燥，选择用三种大孔树脂材料混合而成的组合型大孔树脂进行纯化，所述三种大孔树脂材料为XDA-1，XDA-6和XAD-16，得到本专利技术虾青素。实施例3：一种虾青素的提取方法，包括以下步骤：S1：取雨生红球藻藻粉3g，进行低温研磨，加入0.6mg/mL的纤维素酶和0.3mg/mL的果胶酶共300mL进行破壁，破壁温度0℃、破壁时间45min、酶反应pH5.0，加入0.5g/mL的氯化钠溶液20ml，混合5min，3000rpm离心5min，分离上清和沉淀；S2：取步骤S1中的沉淀，按料液比1∶3，加入含3％氢氧化钠的甲醇溶液，反应1h，加入食用油-丙酮-乙酸乙酯(体积比为52∶29∶19)进行提取，分离，得到提取液a和滤渣X；取滤渣X分别用体积比为99∶1、88∶12、50∶50、0∶100的丙酮-甲醇溶液依次进行提取，分离，合并后得到滤渣Y和提取液b；取滤渣Y以乙醇提取，分离，得到提取液c；S3：将提取液a、提取液b和提取液c混合，冷冻干燥，选择用三种大孔树脂材料混合而成的组合型大孔树脂进行纯化，所述三种大孔树脂材料为XDA-1，XDA-6和XAD-16，得到本专利技术虾青素。实施例4：一种虾青素的提取方法，包括以下步骤：S1：取雨生红球藻藻粉4g，进行低温研磨，加入0.5mg/mL的纤维素酶和0.2mg/mL的果胶酶共250mL进行破壁，破壁温度2℃、破壁时间50min、酶反应pH4.5，加入1.5g/mL的氯化钠溶液25ml，混合5min，2000rpm离心5min，分离上清和沉淀；S2：取步骤S1中的沉淀，按料液比1∶3，加入含3％氢氧化钠的甲醇溶液，反应1h，加入食用油-丙酮-乙酸乙酯(体积比为52∶29∶19)进行提取，分离，得到提取液a和滤渣X；取滤渣X分别用体积比为99∶1、80∶20、55∶45、0∶100的丙酮-甲醇溶液依次进行提取，分离，合并后得到滤渣Y和提取液b；取滤渣Y以乙醇提取，分离，得到提取液c；S3：将提取液a、提取液b和提取液c混合，冷冻干燥，选择用三种大孔树脂材料混合而成的组合型大孔树脂进行纯化，所述三种大孔树脂材料为XDA-1，XDA-6和XAD-16，得到本专利技术虾青素。对比例1：一种虾青素的提取方法，包括以下步骤：S1：取雨生红球藻藻粉3g，进行低温研磨，加入0.1mg/mL的纤维素酶和0.1mg/mL的果胶酶共100mL进行破壁，破壁温度0℃、本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种虾青素的提取方法，其特征在于，包括以下步骤：S1：取雨生红球藻藻粉3～5g，进行低温研磨，加入0.3～0.6mg/mL的纤维素酶和0.1～0.3mg/mL的果胶酶共200～300mL进行破壁，破壁温度0～4℃、破壁时间45～60min、酶反应pH 3.5～5.0，加入0.5～2g/mL的氯化钠溶液，混合5～10min，分离上清和沉淀；S2：取步骤S1中的沉淀，按料液比1∶2～3，加入含2～3％氢氧化钠的甲醇溶液，反应1～2h，加入食用油‑丙酮‑乙酸乙酯进行提取，分离，得到提取液a和滤渣X；取滤渣X分别用不同体积比的丙酮‑甲醇溶液依次进行提取，分离，合并后得到滤渣Y和提取液b；取滤渣Y以乙醇提取，分离，得到提取液c；S3：将提取液a、提取液b和提取液c混合，冷冻干燥，选择用三种大孔树脂材料混合而成的组合型大孔树脂进行纯化，得到本专利技术虾青素。

【技术特征摘要】
1.一种虾青素的提取方法，其特征在于，包括以下步骤：S1：取雨生红球藻藻粉3～5g，进行低温研磨，加入0.3～0.6mg/mL的纤维素酶和0.1～0.3mg/mL的果胶酶共200～300mL进行破壁，破壁温度0～4℃、破壁时间45～60min、酶反应pH3.5～5.0，加入0.5～2g/mL的氯化钠溶液，混合5～10min，分离上清和沉淀；S2：取步骤S1中的沉淀，按料液比1∶2～3，加入含2～3％氢氧化钠的甲醇溶液，反应1～2h，加入食用油-丙酮-乙酸乙酯进行提取，分离，得到提取液a和滤渣X；取滤渣X分别用不同体积比的丙酮-甲醇溶液依次进行提取，分离，合并后得到滤渣Y和提取液b；取滤渣Y以乙醇提取，分离，得到提取液c；S3：将提取...

【专利技术属性】
技术研发人员：郭红星，周尽学，
申请(专利权)人：海南三元星生物科技股份有限公司，
类型：发明
国别省市：海南,46