基于PPARγ信号通路的药物筛选模型的构建和应用制造技术

本发明专利技术涉及基于PPARγ信号通路的药物筛选模型的构建和应用。具体而言，本发明专利技术提供一种多核苷酸序列，选自：N1‑(AGGTCA‑N‑AGGTCA)m‑N2和其互补序列，其中N1、N、N2和m如文中所述。本发明专利技术还提供含所述多核苷酸序列和荧光素酶报告基因的报告载体，含该报告载体的试剂盒，转入了该报告载体的细胞，该细胞的制备方法，以及所述多核苷酸、试剂盒和细胞的用途等。本发明专利技术筛选系统稳定，操作简便，缩短了筛选的周期，更适用于高通量药物筛选。

Construction and application of a drug screening model based on PPAR gamma signaling pathway

The invention relates to the construction and application of a drug screening model based on the PPAR gamma signaling pathway. Specifically, the present invention provides a polynucleotide sequence from N1 (AGGTCA N AGGTCA m) N2 and its complementary sequence, including N1, N, N2 and m as described in the text. The invention also provides a report carrier containing the polynucleotide sequence and luciferase report gene, a kit containing the report carrier, a cell transferred to the report carrier, a preparation method of the cell, and the use of the polynucleotide, reagent kit and cell. The screening system of the invention is stable, easy to operate, shorten the period of screening, and is more suitable for high throughput drug screening.

【技术实现步骤摘要】
基于PPARγ信号通路的药物筛选模型的构建和应用
本专利技术属于生物医药领域，涉及一种基于PPARγ信号通路的药物筛选模型的构建和应用。
技术介绍
近年来，随着生活水平的提高，人们的饮食结构和习惯在不断变化，而由此引发的高血压、高血脂、糖尿病、动脉粥样硬化、冠心病、肥胖症和癌症也正困扰着越来越多的人，与此同时随着科学研究的不断深入，也发现上述疾病的相关性十分的密切。PPARs(过氧化物酶体增殖物激活受体，Peroxisomeproliferator-activatedreceptors)，是调节目标基因表达的核内受体转录因子超家族成员(Zhu，Kan等，2000)。根据结构的不同，PPARs可分为PPARα、β、γ三种亚型(Berger和Moller，2002)。现已发现PPARs可调节基因的表达，在细胞分化、发育、代谢和肿瘤发生上都起着至关重要的调节作用，其中对PPARγ的研究最为深入，其主要表达于脂肪组织及免疫系统，与脂肪细胞分化、机体免疫及胰岛素抵抗关系密切(Michalik等，2006)。PPARγ与许多疾病的发病机理有关，比如糖尿病、肥胖、动脉粥样硬化和癌症等(Berger本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种多核苷酸序列，选自：(1)N1‑(AGGTCA‑N‑AGGTCA)m‑N2；和(2)(1)所示序列的互补序列；其中，N1表示粘性末端序列，或不存在；N2表示粘性末端序列，或不存在；N为接头序列，长1－25个碱基，由选自A、G、T和C的碱基组成；m为1－50、优选3－25的整数。

【技术特征摘要】
1.一种多核苷酸序列，选自：(1)N1-(AGGTCA-N-AGGTCA)m-N2；和(2)(1)所示序列的互补序列；其中，N1表示粘性末端序列，或不存在；N2表示粘性末端序列，或不存在；N为接头序列，长1－25个碱基，由选自A、G、T和C的碱基组成；m为1－50、优选3－25的整数。2.如权利要求1所述的多核苷酸序列，其特征在于，所述多核苷酸序列如SEQIDNO:2所示。3.一种载体，该载体含有权利要求1－2中任一项所述的多核苷酸序列和荧光素酶报告基因，优选地，权利要求1－2中任一项所述的多核苷酸序列位于所述荧光素酶报告基因的上游。4.一种试剂盒，所述试剂盒含有权利要求3所述的载体，和任选的含PPARγ表达元件的慢病毒表达载体以及任选的将所述表达载体转入细胞所需的试剂；优选地，所述PPARγ表达元件的序列如SEQIDNO:1所示。5.一种细胞，所述细胞具有组成型PPARγ活性，转入了权利要求3所述的载体，并稳定表达荧光素酶；优选地，所述细胞还转入了含PPARγ表达元件的慢病毒表达载体；优选地，所述PPARγ表达元件的序列如SEQIDNO:1所示。6.如权利要求5所述的细胞，其特征在于，所述细胞为肝脏细胞、单核巨噬细胞和脂肪细胞，优选为人单核巨噬细胞THP-1细胞、人脂肪细胞3T3-L1、人肝癌细胞HepG2或人肝脏Cha...

【专利技术属性】
技术研发人员：杨金波，
申请(专利权)人：上海米络凯生物科技有限公司，
类型：发明
国别省市：上海,31