产生多核苷酸分子的方法技术

本发明专利技术涉及产生具有改变特性的多核苷酸分子的方法，该方法包括进行包括下述步骤的至少一个循环：（ａ）提供一种双链多核苷酸分子或提供双链多核苷酸分子的群体，其中所述群体中单独的多核苷酸具有至少一个同源序列部分和至少一个异源序列部分，（ｂ）在所述双链多核苷酸分子中产生单链缺口，（ｃ）从所述单链缺口开始进行５’－３’核酸酶降解，同时在所述单链缺口的３’端进行５’－３’从头合成和移动，（ｄ）制备单链多核苷酸分子，（ｅ）制备步骤（ｄ）提供的单链多核苷酸分子的部分双链多核苷酸分子，（ｆ）从步骤（ｅ）制备的部分双链多核苷酸分子起始进行模板指导的核酸合成，可依次或同时实施步骤（ｂ）和（ｃ）。（*该技术在2023年保护过期，可自由使用*）

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及产生具有改变特性的多核苷酸分子的方法。如我们所了解的，生物分子，尤其是生物多聚体，如多核苷酸、多肽、多糖等，不但形成生物体的基础，而且也日益在整个工业应用中得到使用。新功能性生物分子的寻找、分离和制备、以及它们的工业应用是现代生物技术的主题。除了偶然发现自然界中以前未知的、具有所需特性的生物分子外(参考筛选天然物质)，最近出现了在实验室中模拟自然进化原则的方法。除了产生点突变(以碱基交换、缺失和插入的方式)的方法外，对多聚体内部的结构域、异源多聚体的亚单位、或者基因簇内部的基因变体或基因组内部的基因，序列部分的重组实质上是用于组合点突变非常成功的策略。同源重组，即来自不同变体对应序列部分的组合且保持方向和读码框不变，是特别重要的。在实验上，重组可以多种方式实现第一，体外通过使用单独的酶功能、或确定的混合物或序列的酶处理步骤；第二，体内通过使用细胞重组和/或修复程序。以前，在工业上体外方法主要使用基于PCR的方法。这里首先提到的是DNA改组(DNA shuffling)，也称为secual PCR(WO 95/22625；Stemmer，Nature 370(199本文档来自技高网...

【技术保护点】
产生具有改变特性的多核苷酸分子的方法，其包括进行至少一个包括下述步骤的循环：（ａ）提供一种双链多核苷酸分子或提供双链多核苷酸分子的群体，其中所述群体中单独的多核苷酸具有至少一个同源序列部分和至少一个异源序列部分，（ｂ）在所述 双链多核苷酸分子中产生单链缺口，（ｃ）从所述单链缺口开始进行５’－３’核酸酶降解，同时在所述单链缺口的３’端进行５’－３’从头合成和移动，（ｄ）制备单链多核苷酸分子，（ｅ）制备步骤（ｄ）提供的单链多核苷酸分子的部分双 链多核苷酸分子，（ｆ）从步骤（ｅ）制备的部分双链多核苷酸分子起始进行模板指导的核...

【技术特征摘要】
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【专利技术属性】
技术研发人员：M马图舍克，B豪尔，
申请(专利权)人：巴斯福股份公司，
类型：发明
国别省市：DE[德国]