重组人那希力肽的生产方法技术

本发明专利技术涉及一种生物活性多肽重组人那希力肽的生产方法，该方法包括以下步骤：ａ．人工合成人那希力肽氨基酸编码区相对应的基因；ｂ．步骤ａ得到的基因与适宜的表达载体上的细菌硫氧还蛋白基因３′端融合，中间含肠激酶或者凝血酶识别位点；ｃ．将含有步骤ｂ得到的融合蛋白编码基因的表达载体转化适宜的大肠杆菌获得基因工程菌；ｄ．该基因工程菌经发酵后，经提取，层析，纯化步骤，制备出人那希力肽－硫氧还蛋白融合蛋白；ｅ．步骤ｄ得到的融合蛋白经肠激酶或者凝血酶切割后，分离，纯化，获得重组人那希力肽。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及一种生物活性多肽的制备方法，特别涉及一种利用基因重组技术制备那希力肽的生物活性多肽的方法。
技术介绍
那希力肽(Nesiritide)又称脑钠素(Brain Natreuritic Peptide，BNP)，是由脑组织和心脏合成和分泌的生物活性物质。Sudoh等首先从猪脑中分离出那希力肽，随后发现其他动物和人心脏中也有那希力肽的分布，脑细胞中合成的那希力肽作为神经递质发挥生理功能；心肌细胞合成并分泌至血液循环中的那希力肽则作为心脏的内分泌物，对调节心血管功能和水盐代谢起重要作用。心力衰竭时血浆BNP含量增加，静脉滴注外源性BNP可以进一步改善心力衰竭时的心肾功能。因此，重组人那希力肽在临床上具有重要的使用价值。根据文献报道，人那希力肽(hBNP)由32个氨基酸残基所组成，其氨基酸序列如下Ser-Pro-Lys-Met-Val-Gln-Gly-Ser-Gly-Cys-Phe-Gly-Arg-Lys-Met-Asp-Arg-Ile-Ser-Ser-Ser-Ser-Gly-Leu-Gly-Cys-Lys-Val-Leu-Arg-Arg-His，其中第10位和第26位Cys残本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种人那希力肽的制备办法，包括以下步骤：ａ．人工合成人那希力肽氨基酸编码区相对应的基因；ｂ．步骤ａ得到的基因与表达载体上的细菌硫氧还蛋白基因３′端融合，中间含肠激酶或者凝血酶识别位点；ｃ．将含有步骤ｂ的克隆有融合蛋白 编码基因的表达载体重组质粒ＤＮＡ转化大肠杆菌获得基因工程菌；ｄ．该基因工程菌发酵后，经提取，层析，纯化步骤，制备出那希力肽－硫氧还蛋白融合蛋白；ｅ．步骤ｄ的融合蛋白，经肠激酶或者凝血酶切割后，经分离，纯化，得人那希力肽。

【技术特征摘要】

【专利技术属性】
技术研发人员：周裕程，赵斌，彭宏卫，杨伟，彭辉，
申请(专利权)人：成都西玛生物科技有限公司，
类型：发明
国别省市：90[中国|成都]