携带人β珠蛋白基因的βIVS-II-654转基因小鼠模型的制备方法技术

本发明专利技术公开了一种携带人β珠蛋白基因的β↑［ＩＶＳ－ＩＩ－６５４］地中海贫血转基因小鼠模型的制备方法。这种小鼠模型的基因组中稳定整合了慢病毒载体介导的人β珠蛋白基因，并且能持续稳定的表达，而且可以遗传给后代并能维持原表达水平，携带人β珠蛋白基因的β↑［ＩＶＳ－ＩＩ－６５４］地中海贫血模型小鼠的血液学以及病理学等表型得到改善。本发明专利技术制备的模型鼠可用于评价慢病毒载体介导人β珠蛋白基因治疗β↑［ＩＶＳ－ＩＩ－６５４］地中海贫血的有效性、稳定性和安全性。

【技术实现步骤摘要】

【技术保护点】
一种携带人β珠蛋白基因的β↑［ＩＶＳ－Ⅱ－６５４］转基因小鼠模型的制备方法，其特征在于包括以下步骤：　Ａ、人β珠蛋白基因片段的克隆；　Ｂ、人β珠蛋白基因启动子的克隆；　Ｃ、将人β珠蛋白基因、人β珠蛋白基因启动子克隆到载体质 粒，构建携带人β珠蛋白基因的慢病毒载体ＬＢＧ；　Ｄ、将慢病毒载体ＬＢＧ与包装质粒共转染细胞，培养后获得病毒颗粒；　Ｅ、将病毒颗粒进行β↑［ＩＶＳ－Ⅱ－６５４］小鼠受精卵的卵周间隙显微注射，得到携带人β珠蛋白基因的β↑［ＩＶＳ－Ⅱ －６５４］转基因小鼠。

【技术特征摘要】

【专利技术属性】
技术研发人员：曾溢滔，李伟，曾凡一，黄淑帧，
申请(专利权)人：上海市儿童医院，
类型：发明
国别省市：31[中国|上海]