带有氯霉素抗性的分泌高产戊二酰-7-氨基头孢烷酸酰化酶的菌株制造技术

本发明专利技术提供了一种从假单胞菌中克隆并经基因工程改造得到的长为２．５ｋｂ的重组ＧＬ－７ＡＣＡ酰化酶基因及其表达元件和信号肽的序列。构建了该基因的高分泌表达重组质粒ｐＳｕｐｅｒＣＡ１Ｓ，该质粒转化至大肠杆菌菌株ＴＧ１中，得到的基因工程菌株ＴＧ１／ｐＳｕｐｅｒＣＡ１Ｓ在普通的ＬＢ培养基中，无需添加诱导剂即能高效分泌表达ＧＬ－７ＡＣＡ酰化酶，比活力可达到每克菌体１２０个单位。（*该技术在2020年保护过期，可自由使用*）

【技术实现步骤摘要】

【技术保护点】
一种重组戊二酰－７－氨基头胞烷酸酰化酶基因，其特征在于它编码ＧＬ－７ＡＣＡ酰化酶的核苷酸序列以及相应的氨基酸序列如下： １ ＣＴＧＧＣＣＧＡＧＣＣＧＡＣＣＴＣＧＡＣＧＣＣＧＣＡＧＧＣＧＣＣＧＡＴＴＧＣＧＧＣＣＴＡＴＡＡＡＣＣＧＡＧＡＡＧＣＡＡＴＧＡＧＡＴＣＣＴＧ ６９ １ ＬｅｕＡｌａＧｌｕＰｒｏＴｈｒＳｅｒＴｈｒＰｒｏＧｌｎＡｌａＰｒｏＩｌｅＡｌａＡｌａＴｙｒＬｙｓＰｒｏＡｒｇＳｅｒＡｓｎＧｌｕＩｌｅＬｅｕ ２３ ７０ ＴＧＧＧＡＣＧＧＣＴＡＣＧＧＣＧＴＣＣＣＧＣＡＣＡＴＣＴＡＣＧＧＧＧＴＣＧＡＣＧＣＧＣＣＣＴＣＡＧＣＣＴＴＣＴＡＣＧＧＣＴＡＣＧＧＣＴＧＧ １３８ ２４ ＴｒｐＡｓｐＧｌｙＴｙｒＧｌｙＶａｌＰｒｏＨｉｓＩｌｅＴｙｒＧｌｙＶａｌＡｓｐＡｌａＰｒｏＳｅｒＡｌａＰｈｅＴｙｒＧｌｙＴｙｒＧｌｙＴｒｐ ４６ １３９ ＧＣＣＣＡＧＧＣＧＣＧＣＡＧＣＣＡＣＧＧＣＧＡＣＡＡＴＡＴＣＣＴＧＣＧＣＣＴＧＴＡＴＧＧＡＧＡＡＧＣＧＣＧＧＧＧＣＡＡＧＧＧＧＧＣＣＧＡＡ ２０７ ４７ ＡｌａＧｌｎＡｌａＡｒｇＳｅｒＨｉｓＧｌｙＡｓｐＡｓｎＩｌｅＬｅｕＡｒｇＬｅｕＴｙｒＧｌｙＧｌｕＡｌａＡｒｇＧｌｙＬｙｓＧｌｙＡｌａＧｌｕ ６９ ２０８ ＴＡＣＴＧＧＧＧＣＣＣＧＧＡＴＧＡＣＧＡＡＣＡＧＡＣＧＡＣＣＧＴＣＴＧＧＣＧＴＣＴＧＡＣＣＡＡＣＧＧＣＧＴＧＣＣＧＧＡＧＣＧＴＧＣＣＣＡＧ ２７６ ７０ ＴｙｒＴｒｐＧｌｙＰｒｏＡｓｐＡｓｐＧｌｕＧｌｎＴｈｒＴｈｒＶａｌＴｒｐＡｒｇＬｅｕＴｈｒＡｓｎＧｌｙＶａｌＰｒｏＧｌｕＡｒｇＡｌａＧｌｎ １３８ ２７７ ＣＡＧＴＧＧＴＡＴＧＣＧＣＡＧＣＡＧＴＣＧＣＣＴＧＡＴＴＴＣＣＧＣＧＣＣＡＡＣＣＴＣＧＡＣＧＣＣＴＴＣＧＣＧＧＣＧＧＧＣＡＴＣＡＡＣＧＣＣ ３４５ １３９ ＧｌｎＴｒｐＴｙｒＡｌａＧｌｎＧｌｎＳｅｒＰｒｏＡｓｐＰｈｅＡｒｇＡｌａＡｓｎＬｅｕＡｓｐＡｌａＰｈｅＡｌａＡｌａＧｌｙＩｌｅＡｓｎＡｌａ ２０７ ３４６ ＴＡＴＧＣＧＣＡＧＣＡＧＡＡＣＣＣＣＧＡＣＧＡＣＡＴＣＴＣＧＣＣＣＴＧＡＣＴＧＣＧＧＣＡＧＧＴＧＣＴＧＣＣＧＧＴＣＧＣＣＧＧＣＧＣＣＧＡＣ ４１４ ２０８ ＴｙｒＡｌａＧｌｎＧｌｎＡｓｐＰｒｏＡｓｐＡｓｐＩｌｅＳｅｒＰｒｏＡｓｐＶａｌＡｒｇＧｌｎＶａｌＬｅｕＰｒｏＶａｌＡｌａＧｌｙＡｌａＡｓｐ ２７６ ４１５ ＧＴＧＧＴＧＧＣＣＣＡＣＧＣＣＣＡＴＣＧＣＣ...

【技术特征摘要】

【专利技术属性】
技术研发人员：王恩多，李勇，郑勇刚，陈剑峰，姜卫红，赵国屏，杨蕴刘，
申请(专利权)人：中国科学院上海生物化学研究所，
类型：发明
国别省市：31[中国|上海]