制备包含人凝血因子蛋白和乳酸聚合物的粉末的方法技术

本发明专利技术涉及制备包含一种或多种人凝血因子蛋白和乳酸聚合物的粉末的方法，包括下述步骤：a)在水中混合和分散颗粒尺寸d50在0.1‑2μm范围内的乳酸聚合物和一种或多种人凝血因子蛋白，b)使分散体干燥，c)从分散体压制干燥团块，d)将从分散体压制的干燥团块研细为颗粒尺寸d50在大于0.5且多至5μm范围内的粉末。

A method for preparing powder containing human coagulation factor protein and lactic acid polymer

The present invention relates to a method for preparing contains one or more human coagulation factor protein and lactic acid polymer powder, which comprises the following steps of: a) in water and mixed lactic acid polymer dispersed particle size of D50 in the 0.1 2 m range and one or more human coagulation factor protein, b) of the dispersion drying. C) from the dispersion suppression of dry mass, d) will grind fine particle size for the D50 in more than 0.5 and up to 5 m range from dry powder mass dispersion suppression.

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】制备包含人凝血因子蛋白和乳酸聚合物的粉末的方法专利
本专利技术属于包含人凝血因子蛋白和乳酸聚合物的粉末领域。
技术介绍
EP1283699B1描述可注射的悬浮液，具有改善的可注射性特性。公开的组合物适于通过直径18-22号的针注射注入宿主。组合物可以公开基于聚乳酸的微粒，其中分散或溶解了活性剂。所述微粒的质量中值直径可以是20-150μm的范围。US2012/0004323A1描述植入物处理方法，用于热不稳定的和其它生物学活性的试剂，和由其制备的植入物。该方法包括：将包含生物可再吸收聚合物和生物学活性剂的组合物混合以形成混合物，和在不大于70℃的温度将混合物处理为植入物中。在实例中，将聚(丙交酯-co-乙交酯)聚合物颗粒在冷冻状态下研磨为粉末。将牛血清白蛋白(BSA)作为粉末加入聚合物粉末，用玻璃研钵和研棒混合。混合物在压片机中压制，产生植入物。混合和压制优选在室温或以下进行。植入物具有25lbs的最小硬度(破裂压力)。在释放试验中，植入物在2天内释放BSA至100％。事先在有机溶剂比如二氯甲烷中浸渍-包衣的植入物显著更慢地释放BSA，例如在7天之后仅50％。因子VIII和von-Willebrand-因子(vWF)的复合物由来自因子VIII和von-Willebrand-因子(vWF)的具有不同生理学功能的两种分子组成。如果注射因子VIII，则其在血液循环中结合至von-Willebrand-因子(vWF)，其活化因子VIII。活化因子VIII作为活化因子IX的辅助因子起作用并且加速从因子X产生活化因子X(因子Xa)。因子Xa将凝血酶原活化为凝血酶，其从纤维蛋白原释放纤维蛋白，其开始凝血程序。是可商购的德国BiotestAG，Dreieich生产的人因子VIII，其源自人类血液血清。公共信息可参见德国Paul-Ehrlich-Institut和德国卫生部的网站(例如http://www.pei.de/SharedDocs/arzneimittel/am-aus-blut/gerinnungsfaktor/16841-00-00.html)。是目前可获得的，分3种浓度SDH250、500和1000(是指因子VIII的国际单位(I.E.))。除了因子VIII，含有甘氨酸，氯化钠，枸橼酸钠，氯化钙和作为注射载体的水。适于治疗血友病A(遗传性因子VIII缺乏)。该产品含有非生理学浓度的von-Willebrand-因子(vWF)并因此不适于治疗von-Willebrand-疾病。目的和解决方案本专利技术目的是提供用乳酸聚合物制备人凝血因子蛋白配制剂的方法。粉末应适于悬浮在水中用于注射(优选用于静脉内注射)至人中。提供的粉末应适于治疗凝血有关的缺陷或疾病。方法应提供粉末，其在纳米结构化基质中携带一种或多种人凝血因子蛋白并以持续方式释放这些蛋白质。方法本身应是温和过程，其保持凝血因子蛋白的治疗或级联凝血活性，不损失或仅损失很少的活性。目的解决如下：制备包含一种或多种人凝血因子蛋白和乳酸聚合物的粉末的方法，包括下述步骤a)在水中混合和分散人凝血因子蛋白和颗粒尺寸d50在0.1-2μm范围内的乳酸聚合物和一种或多种人凝血因子蛋白，b)使分散体干燥，c)从分散体压制干燥团块，d)将从分散体压制的干燥团块研细为颗粒尺寸d50在大于0.5且多至5μm范围内的粉末。有利效果本文公开的方法提供包含一种或多种人凝血因子蛋白和乳酸聚合物的粉末，其能够悬浮于水中作为药物组合物，所述药物组合物适于注射(优选静脉内注射)，具有所包括的人凝血因子蛋白的出乎意料的增加的半衰期时间。专利技术详述颗粒尺寸测量本文公开的颗粒尺寸、特别是在步骤a)和步骤d)中的颗粒尺寸的确定可以根据美国药典36(USP)第<429>章和欧洲药典7.0(EP)第2.9.31章进行。颗粒尺度分布用激光散射设备(例如Fa.SympatecGmbH，型号HELOS，配有RODOS干燥散射单元)确定。激光衍射方法基于的现象是，颗粒在全部方向散射光的强度图谱取决于颗粒尺寸。使于适当浓度分散在适宜的液体或气体中的代表性样品通过通常来自激光的单色光源光束。光被颗粒在各种角度散射，通过多元件检测器测量，和然后记录散射图谱涉及的数值，用于随后分析。然后用适当光学模型和数学程序将数字散射值转化，产生总体积与尺寸类别离散数目的比例，形成体积颗粒尺度分布(例如d50或d(0.5)描述相应于50％的累积低尺度分布的颗粒直径；d90或d(0.9)描述相应于90％的累积低尺度分布的颗粒直径)。优选，颗粒尺度分布的确定可以通过BeckmanLS进行。定义术语"室温"在本专利技术意义中可以是20-25℃，约22℃或22℃。术语"水"优选意指脱矿质水或纯水。以水溶液比如生理学盐水或磷酸缓冲盐水(PBS)的形式使用"水"可以是可能的，但是较不优选，原因是可能的离子副作用风险。方法制备包含一种或多种人凝血因子蛋白和乳酸聚合物的粉末的方法包括步骤a)至d)。应避免使用能灭活或降低一种或多种人凝血因子蛋白的生物学活性的有机溶剂。因此，方法优选不包括加入能够灭活或降低一种或多种人凝血因子蛋白的生物学活性的浓度的有机溶剂，或者完全不包含有机溶剂。步骤a)在步骤a)中，将颗粒尺寸d50在0.1-2，0.2-1.5，0.3-1.2，0.6-1.0μm范围内的乳酸聚合物和人凝血因子蛋白混合和分散在水中。优选，人凝血因子蛋白包含在人血浆制备物中。优选，在包含人凝血因子蛋白的人血浆制备物与乳酸聚合物之间的比率是30:70至1:99，20:80至2:98，15-85至5:95重量份。人血浆制备物所含的因子VIII(形式)与丙交酯/乙交酯比率50:50的聚(丙交酯-co-乙交酯)的最佳比率是约10:90重量份。在该比率或其左右，在步骤b)中混合物的最佳均匀性(用EDX分析测量)和步骤d)粉末的最佳半衰期时间(用因子VIII的色原测试测量)被观察到(参见实例)。步骤b)在步骤b)中，干燥来自步骤a)的分散体，提供干燥团块。干燥步骤可以通过喷雾干燥，优选在不大于45、不大于40、不大于30℃或20至30℃的温度进行。最优选，干燥步骤可以通过冻干进行。所得中间体产品可以具有无规律粉末的形式。该步骤的EDX分析显示有利的均质分布，其条件是人凝血因子蛋白和乳酸聚合物相互混合并且分散在水中、然后通过冻干干燥。步骤c)在步骤c)中，压制得自步骤b)分散体的干燥团块。压制优选在压片机中用比较低的压力进行以避免或降低一种或多种人凝血因子蛋白的可能灭活。压制来自分散体的干燥团块可以在0.1至2或0.2至1.8，0.3至1.0，0.4至0.6kN的压力(78.54mm2截面积)进行。假定的是，该压制步骤是构成三维乳酸聚合物结构所必需的，所述结构具有人凝血因子蛋白以高载量水平附着的高内表面积。因此关键因素显得是使用乳酸聚合物，其具有在步骤a)中定义的纳米等级颗粒尺寸。由组分人凝血因子蛋白和乳酸聚合物的压制步骤所引起的假定相互作用借助经由衰减全反射红外光谱(ATR-IR)的分析变得明显，波长在酰胺I带范围，波数面积1500.000-1700.000[cm-1]。人凝血因子蛋白和乳酸聚合物单独的单个组分，与压制组分比较，显示明本文档来自技高网...

【技术保护点】
制备包含一种或多种人凝血因子蛋白和乳酸聚合物的粉末的方法，包括下述步骤a)在水中混合和分散颗粒尺寸d50在0.1‑2μm范围内的乳酸聚合物和一种或多种人凝血因子蛋白，b)使分散体干燥，c)从分散体压制干燥团块，d)将从分散体压制的干燥团块研细为颗粒尺寸d50在大于0.5且多至5μm范围内的粉末。

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】2015.06.10 US 62/173,7261.制备包含一种或多种人凝血因子蛋白和乳酸聚合物的粉末的方法，包括下述步骤a)在水中混合和分散颗粒尺寸d50在0.1-2μm范围内的乳酸聚合物和一种或多种人凝血因子蛋白，b)使分散体干燥，c)从分散体压制干燥团块，d)将从分散体压制的干燥团块研细为颗粒尺寸d50在大于0.5且多至5μm范围内的粉末。2.根据权利要求1的方法，其中乳酸聚合物是从丙交酯和乙交酯单元聚合的共聚物。3.根据权利要求1或2的方法，其中一种或多种人凝血因子蛋白选自因子I＝纤维蛋白原，因子II＝凝血酶原，因子III＝组织因子，因子V＝促凝血球蛋白原，因子VII＝前转化素，因子VIII＝抗血友病因子A，因子IX＝抗血友病因子B，因子X＝StuartPrower因子，因子XI＝血浆促凝血酶原激酶前体，因子XII＝Hageman因子，因子XIII＝纤维蛋白-稳定化因子，vonWillebrand因子，前激肽释放酶，抗凝血酶III，肝素辅助因子II，蛋白质C，蛋白质S，蛋白质Z，蛋白质Z-相关的蛋白酶抑制剂，纤溶酶原，α-血浆2-抗纤维蛋白溶酶，组织纤溶酶原活化剂，尿激酶，纤溶酶原活化剂抑制剂-1和纤溶酶原活化剂抑制剂-2或其任意组合。4.根据权利要求1至3中任一项的方法，其中人凝血因子蛋白包含在人血浆制备物中。5.根据权利要求4的方法，其中人凝血因子蛋白是因子VIII，因子IX或vonWillebrand因子或...

【专利技术属性】
技术研发人员：J·托米阿尔卡尔德，N·温德哈伯，M·莱夫克，A·贝内迪特，J·穆勒阿尔卑斯，T·泰斯，S·乌尔瑞其，A·恩格尔，M·吉尔梅，S·克斯特那，J·道分巴斯，
申请(专利权)人：赢创罗姆有限公司，
类型：发明
国别省市：德国,DE