海水鱼淋巴囊肿病毒的纯化方法技术

本发明专利技术涉及一种海水鱼淋巴囊肿病毒的纯化方法。它是采用微孔滤膜过滤法和蔗糖密度梯度离心法相结合的方法，并考虑到尽量减小污染和保证无菌操作条件制成。本发明专利技术的特点是可以获得高纯度和高得率的淋巴囊肿病毒，以满足制备疫苗或作为病毒基因学、致病基因筛选和克隆技术使用的病毒。（*该技术在2021年保护过期，可自由使用*）

【技术实现步骤摘要】

【技术保护点】
一种海水鱼淋巴囊肿病毒的纯化方法，其特征步骤是Ａ、 取病鱼体表囊肿物每２０ｇ左右，用无菌生理盐水多次洗净，再用组织研磨器研碎，然后加无菌ＴＥ缓冲液２００ｍｌ，在室温下、－２０℃冻融４次，之后将上述融液用孔径为８、３、０．８和０．３μｍ的 微孔滤膜从大到小依次抽滤，再将滤液移入透析袋中用聚乙二醇２０００浓度缩至７ｍｌ左右，便可取得该病毒悬液移入无菌的试管中，Ｂ、 将配制好浓度为５０％、４０％、３０％、２０％和１５％的蔗糖溶液，各取１ｍｌ，依次注入离心管中、并静静重层，然后 ，吸上述滤膜过滤的病毒悬液１ｍｌ，静静注于离心管内重层的蔗糖溶液上方２４００ｒｍｐ离心２小时，离心后即得纯度高的病毒。

【技术特征摘要】

【专利技术属性】
技术研发人员：孙修勤，曲凌云，张进兴，
申请(专利权)人：国家海洋局第一海洋研究所，
类型：发明
国别省市：95[中国|青岛]