一种动物组织细胞中形态汞的检测方法技术

本发明专利技术公开了一种动物组织细胞中形态汞的检测方法，包括以下步骤：(1)标准品溶液的配制；(2)样本前处理：使细胞壁破碎后，用提取剂提取，离心，取上清液过滤后上机；(3)采用超高效液相色谱‑电感耦合等离子体质谱联用法测定，仪器条件:超高效液相色谱的流动相采用乙酸铵、L‑半胱氨酸、甲醇体系，调节pH至2.0‑2.5。本发明专利技术具有能排除细胞培养液中的钠离子干扰，极大地提高了方法的稳定性和准确性。

A method for the detection of morphologic mercury in animal tissue cells

The invention discloses a mercury detection method in animal tissues and cells, which comprises the following steps: (1) the preparation of standard solution; (2) sample pretreatment: the cell wall broken, with extraction, centrifugation, the supernatant was filtered on; (3) by inductively coupled plasma mass spectrometry ultra high performance liquid chromatography determination instrument conditions: ultra high performance liquid chromatography with mobile phase methanol, ammonium acetate, L cysteine system, adjusting the pH to 2 2.5. The invention has the ability to eliminate the interference of sodium ion in cell culture fluid, and greatly improves the stability and accuracy of the method.

【技术实现步骤摘要】
一种动物组织细胞中形态汞的检测方法
本专利技术属于痕量金属检测领域，具体涉及一种超高效液相色谱-电感耦合等离子体质谱联用法测定动物组织细胞中的形态汞。
技术介绍
含Hg中药在我国传统中药中历史悠久，朱砂为含汞中药中一种，它具有清心镇惊、安神、明目、解毒的功效，临床多用于心悸易惊，失眠多梦，癫痫发狂，惊风，视物昏花，口疮喉痹，疮疡肿毒诸证等，被列为安神药之首，其主要成分为HgS。含汞物质均为有毒物质，因此服用朱砂存在中毒的风险，用药不当甚至可能导致死亡。目前关于朱砂主要成分HgS在人体内代谢后汞在细胞中的存在形式未见报道，因此分析研究朱砂在人体内代谢后细胞中汞的存在形式对含汞中药在临床上的应用具有指导意义。且目前关于形态汞的检测技术多基于食品内形态汞的测定，而人体细胞内形态汞的检测方法未见报道。研究这些都离不开离体细胞培养以及动物实验，现有技术都是在样品数量巨大的基础上进行的，对于离体细胞以及动物组织的样品量是非常少的，现有技术无法满足在这样的样品量下准确提取其中的汞，并进行检测，找到一种快速、高效、准确的检测方法，测定朱砂在人体内代谢后汞在细胞中形态及含量很有必要，就能更加清楚的了解本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种动物组织细胞中形态汞的检测方法，其特征在于：包括以下步骤：(1)标准品溶液的配制；(2)样本前处理：使破碎细胞壁后，用提取剂提取，离心，取上清液过滤后上机；(3)采用超高效液相色谱‑电感耦合等离子体质谱联用法测定，仪器条件:超高效液相色谱的流动相采用乙酸铵、L‑半胱氨酸、甲醇体系，调节pH至2.0‑2.5。

【技术特征摘要】
1.一种动物组织细胞中形态汞的检测方法，其特征在于：包括以下步骤：(1)标准品溶液的配制；(2)样本前处理：使破碎细胞壁后，用提取剂提取，离心，取上清液过滤后上机；(3)采用超高效液相色谱-电感耦合等离子体质谱联用法测定，仪器条件:超高效液相色谱的流动相采用乙酸铵、L-半胱氨酸、甲醇体系，调节pH至2.0-2.5。2.如权利要求1所述的一种动物组织细胞中形态汞的检测方法，其特征在于：具体技术参数如下：(1)无机汞、甲基汞、乙基汞标液逐级稀释到1000μg/L后混合,配制成各含100μg/L的汞的混合标液，再用提取液并添加适量D-hanks，保证其钠离子浓度与样本钠离子浓度一致，逐级稀释无机汞、甲基汞、乙基汞，其浓度梯度均为0.5μg/L、1μg/L、2μg/L、3μg/L、5μg/L，离心取上清检测；(2)样本前处理：用100μL0.3％的triton常温浸泡细胞样本15min破坏细胞膜后，加入提取剂500μL，超声60min，震荡摇匀，取100μL样本液，震荡摇匀，4℃下以12000r...

【专利技术属性】
技术研发人员：周绍均，陆远富，罗砚文，向丽萍，鲁艳柳，王奥，李露，刘桂岚，
申请(专利权)人：遵义市产品质量检验检测院，遵义医学院，
类型：发明
国别省市：贵州,52