一种治疗慢性咽炎的中药组合物的检测方法技术

本发明专利技术属于中药组合物技术领域，具体涉及一种治疗慢性咽炎的中药组合物的检测方法。一种治疗慢性咽炎的中药组合物的检测方法，是通过HPLC方法对该中药组合物中的射干苷，木犀草素，肉桂酸和鸢尾黄素的含量进行测定。本发明专利技术制定有效严格的新制剂质量标准，按“君臣佐使”关系对制剂中中药有效成分进行含量测定，并对制剂进行体外稳定性试验研究，为研发新药打好基础。

A method for the detection of traditional Chinese medicine composition for chronic pharyngitis

The invention belongs to the technical field of traditional Chinese medicine composition, and in particular relates to a method for the detection of Chinese traditional medicine composition for chronic pharyngitis. The detection method of the traditional Chinese medicine composition for treating chronic pharyngitis, is HPLC by the method of Belamcandin, the traditional Chinese medicine composition in the luteolin content of cinnamic acid and tectorigenin were determined. The development of new effective preparation quality standard strictly, according to the \monarch\ relationship of the effective components in Chinese traditional medicine content was measured, and the experimental study of in vitro stability of preparation, lay a good foundation for the development of new drugs.

【技术实现步骤摘要】
一种治疗慢性咽炎的中药组合物的检测方法
本专利技术属于中药组合物
，具体涉及一种治疗慢性咽炎的中药组合物的检测方法。
技术介绍
慢性咽炎，中医上称“慢喉痹”，部分书籍中也名为“阴虚喉痹”、“虚火喉痹”等。中医辨证分型分为：肺肾阴虚，虚火上炎；脾胃虚弱，咽喉失养；脾肾阳虚，咽失温煦；痰凝血瘀，结聚咽喉。慢性咽炎为咽部粘膜、粘膜下及淋巴组织的慢性炎症。本病根据病变的轻重程度不同，临床上分为慢性单纯性咽炎，表现为咽部粘膜慢性充血；慢性肥厚性咽炎，主要表现为咽部粘膜充血肥厚，粘膜下有广泛的结缔组织及淋巴组织增生；其主要病理改变为粘膜弥漫性充血肥厚，粘膜下有广泛的结缔组织及淋巴组织增生，咽后壁淋巴滤泡增生或毗连成片，咽侧束呈条索状隆起，是慢性单纯性咽炎病情发展的结果；慢性萎缩性咽炎，主要表现为粘膜层及粘膜下层萎缩变薄，咽后壁有痂皮附着，分泌减少。在症状上主要以声音嘶哑及紧缩感、异物感、干燥、发痒等为主。因人有异.一般有咽部不适感，如异物感、痒、灼热、干燥或微痛等.咽分泌物增多﹑粘稠，故常有清嗓动作，吐白色粘痰；部分也可无痰，或仅有颗粒状藕粉样分泌物咳出；有些出现刺激性干咳，易恶心。检查：咽部慢性充血，加重。呈暗红色，或树枝状充血；咽后壁淋巴滤泡增生，或咽侧索肿大；咽粘膜增生肥厚，或干燥、萎缩、变薄，有分泌物附着。目前中成药在咽喉科应用广泛，近年文献中涉及的就有几十种，在咽喉疾病的治疗中起到了积极作用。所用中成药主要有：金喉健喷雾剂、清咽滴丸、新癀片、蓝芩口服液、清开灵、双料喉风散、鼻咽清毒颗粒、金嗓散结丸、慢咽舒宁等，临床疗效观察取得良好疗效。其中效果尤为显著的治疗慢性咽炎的中药组合物，是由滨州医学院附属医院药学部制剂室自制(批号：161206、161212、161217)的颗粒剂，其临床疗效观察治疗慢性咽炎240例，总有效率97.9％。对照草珊瑚含片治疗慢性咽炎120例，总有效率96.6％。上述的颗粒剂其治疗急、慢性咽炎效果良好。上述的颗粒剂，并未有相关的对其进行检测的方法，不能对其质量进行控制，也不利于生产厂家和监督部门对产品质量整体控制。因此，需要保证该产品的质量，便于该产品的监督管理，亟需对该药的检测方法进行探索和研究，从而保证该产品的质量和疗效。
技术实现思路
为了解决上述的技术问题，本专利技术提供了一种以同时检测治疗慢性咽炎的中药组合物中射干苷，木犀草素，肉桂酸和鸢尾黄素的方法。本专利技术中治疗慢性咽炎的中药组合物的检测方法，是通过HPLC方法对该中药组合物中的射干苷，木犀草素，肉桂酸和鸢尾黄素的含量进行测定；(1)色谱条件该检测方法具体包括以下的步骤：色谱柱为：THERMOHypersilGOLDC18色谱柱，其规格是：4.6×250mm5μm；流动相为：乙腈(A)-0.2％磷酸水溶液(B)；检测波长：270nm；流速：1.0mL·min-1；分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各10μL，注入高效液相色谱仪，测定，即得射干苷，木犀草素，肉桂酸和鸢尾黄素的含量；(2)对照品溶液的制备：精密量取射干苷对照品储备溶液4.0mL，木犀草素对照品储备溶液0.4mL，肉桂酸对照品储备溶液2.5mL和鸢尾黄素对照品储备溶液，加流动相制成每1mL分别含16.41μg射干苷、0.838μg木犀草素、3.16μg肉桂酸、4.76μg鸢尾黄素混合对照品溶液；(3)供试品溶液的制备精密称取治疗慢性咽炎的中药组合物0.5g，于50mL量瓶中，加40mL70％甲醇水溶液超声提取30min，冷却后加70％甲醇水溶液稀释定容至刻度，过0.45μm滤膜过滤，取续滤液得供试品溶液。优选的，步骤(1)中，梯度洗脱0～25min，10％→25％A；25～40min，25％→60％A；40～50min，60％A；流速：1.0mL·min-1；柱温：30℃；进样量：20μL。步骤(2)中，精密称取射干苷，木犀草素，肉桂酸和鸢尾黄素对照品适量于10mL容量瓶中；射干苷加入50％甲醇水稀释定容，木犀草素，肉桂酸和鸢尾黄素分别加入甲醇稀释定容制成对照品储备溶液；分别精密量取射干苷对照品储备溶液4.0mL，木犀草素对照品储备溶液0.4mL，肉桂酸对照品储备溶液2.5mL和鸢尾黄素对照品储备溶液2.5mL于50mL容量瓶中，甲醇稀释定容，制成每1mL分别含164.1μg射干苷、8.38μg木犀草素、31.6μg肉桂酸、47.6μg鸢尾黄素混合对照品储备溶液；精密量取1.0mL上述混合对照品储备溶液于10mL量瓶中，甲醇稀释定容，制成每1mL分别含16.41μg射干苷、0.838μg木犀草素、3.16μg肉桂酸、4.76μg鸢尾黄素混合对照品溶液；上述的治疗慢性咽炎的中药组合物为颗粒剂。针对于颗粒剂，其供试品的制备方法如下：精密称取治疗慢性咽炎的颗粒剂0.5g，研细，于50mL量瓶中，加40mL70％甲醇水溶液超声提取30min，冷却后加70％甲醇水溶液稀释定容至刻度，过0.45μm滤膜过滤，取续滤液得供试品溶液。颗粒剂由以下重量份的原料组成：玄参300，射干200，桔梗200，赤芍200，菊花100，甘草100。颗粒剂的制备方法如下：称取处方中玄参300g，射干200g，桔梗200g，赤芍200g，菊花100g，甘草100g等6味药材，加10倍量水煎煮三次，第一次2小时，合并煎液，滤过，滤液静置12小时，取上清液浓缩至相对密度为1.32～1.35(80～85℃)的清膏。取清膏，加蔗糖、糊精等辅料，制粒干燥，制成1000g颗粒，按10g每袋分装即得。本专利技术的方法所针对的颗粒剂，其主要由玄参、射干、桔梗、赤芍、菊花、甘草等6味药材组成，玄参养阴清热为君药，射干解毒利咽为臣药，现代药理研究表明玄参具有抗炎、镇痛作用、抗菌作用、免疫增强等活性，主要化学成分为环烯醚萜类、苯丙素类等，如哈巴苷、哈巴俄苷、肉桂酸等。射干具有抗炎、抗菌、抗病毒等作用，主要化合物类型为异黄酮类、甾类、三萜类等，如射干苷、鸢尾黄素、野鸢尾苷、野鸢尾黄素等，菊花主要化合物类型为黄酮类、萜类、有机酸类等，如黄酮类化合物木犀草素等。本颗粒剂主要通过HPLC法对君药玄参中的肉桂酸、臣药射干中的鸢尾黄素、射干苷及菊花中的木犀草素等指标化合物含量测定作为本制剂质量控制的方案。本专利技术制定有效严格的新制剂质量标准，按“君臣佐使”关系对制剂中中药有效成分进行含量测定，并对制剂进行体外稳定性试验研究，为研发新药打好基础。附图说明图1为本专利技术中对照品的HPLC图；图2为本专利技术供试品的HPLC图；图3为本专利技术中缺玄参阴性溶液的HPLC图；图4为本专利技术中缺射干阴性溶液的HPLC图；图5为本专利技术中缺菊花阴性溶液的HPLC图；1射干苷，2木犀草素，3肉桂酸，4鸢尾黄素；具体实施方式下面结合附图和具体实施方式来对本专利技术作更进一步的说明，以便本领域的技术人员更了解本专利技术，但并不以此限制本专利技术。实施例1制备治疗慢性咽炎的颗粒剂，其具体的制备方法如下：称取玄参300g，射干200g，桔梗200g，赤芍200g，菊花100g，甘草100g这6味药材，加10倍上述药材总重量的水煎煮三次，第一次煎煮2小时，合并煎液，滤过，滤液静置12小时；取上清液浓缩至相对密度为1.32～1.35，所述的相对密度为80～85℃的清膏；取清膏本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种治疗慢性咽炎的中药组合物的检测方法，是通过HPLC方法对该中药组合物中的射干苷，木犀草素，肉桂酸和鸢尾黄素的含量进行测定；（1）色谱条件该检测方法具体包括以下的步骤：色谱柱为：THERMO Hypersil GOLD C18 色谱柱，其规格是：4.6×250 mm 5 μm；流动相为：乙腈（A）‑0.2%磷酸水溶液（B）；检测波长：270 nm；流速：1.0 mL·min

【技术特征摘要】
1.一种治疗慢性咽炎的中药组合物的检测方法，是通过HPLC方法对该中药组合物中的射干苷，木犀草素，肉桂酸和鸢尾黄素的含量进行测定；（1）色谱条件该检测方法具体包括以下的步骤：色谱柱为：THERMOHypersilGOLDC18色谱柱，其规格是：4.6×250mm5μm；流动相为：乙腈（A）-0.2%磷酸水溶液（B）；检测波长：270nm；流速：1.0mL·min-1；分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各10μL，注入高效液相色谱仪，测定，即得射干苷，木犀草素，肉桂酸和鸢尾黄素的含量；（2）对照品溶液的制备：精密量取射干苷对照品储备溶液4.0mL，木犀草素对照品储备溶液0.4mL，肉桂酸对照品储备溶液2.5mL和鸢尾黄素对照品储备溶液，加流动相制成每1mL分别含16.41μg射干苷、0.838μg木犀草素、3.16μg肉桂酸、4.76μg鸢尾黄素混合对照品溶液；（3）供试品溶液的制备精密称取治疗慢性咽炎的中药组合物0.5g，于50mL量瓶中，加40mL70%甲醇水溶液超声提取30min，冷却后加70%甲醇水溶液稀释定容至刻度，过0.45μm滤膜过滤，取续滤液得供试品溶液。2.如权利要求1所述的一种治疗慢性咽炎的中药组合物的检测方法，其特征在于，步骤（1）中，梯度洗脱0~25min，10%→25%A；25~40min，25%→60%A；40~50min，60%A；流速：1.0mL·min-1；柱温：30℃；进样量：20μL。3.如权利要求1所述的一种治疗慢性咽炎的中药组合物的检测方法，其特征在于，步骤（2）中，精密称取射干苷，木犀草素，肉桂酸和鸢尾黄素对照品适量于10mL容量瓶中；射干苷加入50%甲醇水稀释定容，木犀草素，肉桂酸和鸢尾黄素分别加入甲醇稀释...

【专利技术属性】
技术研发人员：吕文文，张金杰，樊其忠，孙迎东，
申请(专利权)人：滨州医学院附属医院，
类型：发明
国别省市：山东,37