一种筛选抗烟草黑胫病放线菌的方法技术

本发明专利技术涉及一种筛选抗烟草黑胫病放线菌的方法，属植物保护技术领域。本方法包括菌丝生长速率法初筛活性菌株、离体叶片法复筛出活性菌株步骤，及温室盆栽活体试验验证步骤。首先用菌丝生长速率法，初筛出对烟草黑胫病菌Ｐｈｔｏｐｈｔｈｒｏ　　ｎｉｃｏｔｉｎａｅ　　Ｂｒｅｄａｄｅ　　Ｈａｎｎ菌丝生长抑制率大于７０％的放线菌发酵液提取物；再对菌丝生长速率法得到的提取物，用离体叶片法和温室盆栽烟苗复筛其对烟草黑胫病的防治效果，筛选出应用前景好的抗烟草黑胫病放线菌。本方法筛选到的具有较好抗烟草黑胫病活性的放线菌菌株，入选菌株在抗烟草黑胫病的离体及活体筛选模型上均具有较好活性，为追踪分离活性化合物提供了可靠结果。本方法还具有简便、操作、易有效地筛选出防治烟草黑胫病的放线菌等优点。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及，属植物保护

技术介绍
烟草黑胫病(Phtophthro nicotinae Breda de Hann)于1896年首次发现于印尼爪哇，现已是世界性烟草的毁灭性病害之一，从苗期到成株期都可发生。我国于1950年发现于黄淮烟区，目前全国大部分烟草种植区均有此病发生。长期以来，生产上对该病的控制主要依靠化学农药来进行防治，而化学防治难以长期持续有效，还严重污染环境。抗烟草黑胫病放线菌是一类很重要的农用抗生素产生菌，70％以上的农用抗生素均为放线菌产生，在植物病原真菌病害的生物防治中起着非常重要的作用。常规方法大多采用孢子萌发法、菌丝生长速率法等离体筛选模型，由于缺乏在活体植株的防效验证，有些对孢子萌发和菌丝生长抑制活性较高的产物在温室盆栽烟苗上却不表现出防效，造成筛选结果不可靠，并影响到实际应用。将菌丝生长速率法、离体叶片法和温室盆栽活体试验集成于有效筛选抗烟草黑胫病放线菌，目前尚未见报道。
技术实现思路
本专利技术的目的在于克服传统技术中的不足，而提供一种使筛选结果可靠的抗烟草黑胫病放线菌的筛选方法。本专利技术将离体筛选模型(菌丝生长速率法、离体叶片法)与活体筛本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种筛选抗烟草黑胫病放线菌的方法，包括菌丝生长速率初筛活性菌株、离体叶片法复筛出活性菌株步骤，其特征在于该方法还包括温室盆栽活体试验验证步骤：其中：（１）菌丝生长速率初筛活性菌株步骤中：所用的烟草黑胫病菌株从烟草病株上分离出，用Ｖ↓ ［８］汁培养基和燕麦培养基培养，２５℃保存备用；将φ５ｍｍ的烟草黑胫病菌菌丝块接种于已带发酵液提取物的Ｖ↓［８］汁培养基中，菌丝块沿培养皿周缘放置，每皿放置４块，每处理３重复，置于２８℃培养箱中，黑暗培养７天后观察记录，分析抑菌效果，初步筛选出对烟草黑胫病菌（ＰｈｔｏｐｈｔｈｒｏｎｉｃｏｔｉｎａｅＢｒｅｄａｄｅＨａｎｎ）菌丝生长抑制率大于７０％的活性...

【技术特征摘要】

【专利技术属性】
技术研发人员：曾莉，李铭刚，刘树芳，李一青，李家瑞，崔晓龙，文孟良，
申请(专利权)人：云南大学，
类型：发明
国别省市：53[中国|云南]